Исследования на вирусные гепатиты методом ифа. Реакция антител hcv методом ифа


Anti-HCV, антитела, ИФА: исследования в лаборатории KDLmed

Anti-HCV – специфические иммуноглобулины классов IgM и IgG к белкам вируса гепатита С, свидетельствующие о возможной инфицированности или ранее перенесённой инфекции.

Синонимы русские

Суммарные антитела к вирусу гепатита С, антиHCV.

Синонимы английские

Antibodies to Hepatitis C Virus, IgM, IgG; HCVAb, Total.

Метод исследования

Иммунохемилюминесцентный анализ.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Венозную кровь.

Как правильно подготовиться к исследованию?

Не курить в течение 30 минут до сдачи крови.

Общая информация об исследовании

Вирус гепатита С (ВГС) – РНК-содержащий вирус из семейства Flaviviridae, который поражает клетки печени и вызывает гепатит. Он способен размножаться в клетках крови (нейтрофилах, моноцитах и макрофагах, В-лимфоцитах) и ассоциирован с развитием криоглобулинемии, болезни Шегрена и В-клеточных лимфопролиферативных заболеваний. Среди всех возбудителей вирусных гепатитов у ВГС наибольшее количество вариаций, а благодаря высокой мутационной активности он способен избегать защитных механизмов иммунной системы человека. Существует 6 генотипов и множество субтипов вируса, которые имеют разные значения для прогноза заболевания и эффективности противовирусной терапии.

Основной путь передачи инфекции – через кровь (при переливании элементов крови и плазмы, пересадке донорских органов, через нестерильные шприцы, иглы, инструменты для татуирования, пирсинга). Вероятна передача вируса при половом контакте и от матери ребёнку во время родов, но это происходит реже.

Острый вирусный гепатит, как правило, протекает бессимптомно и остаётся невыявленным в большинстве случаев. Только у 15 % инфицированных заболевание протекает остро, с тошнотой, ломотой в теле, отсутствием аппетита и потерей веса, редко оно сопровождается желтухой. У 60-85 % заражённых развивается хроническая инфекция, что в 15 раз превышает частоту хронизации при гепатите В. Для хронического вирусного гепатита С характерна «волнообразность» с повышением печёночных ферментов и слабовыраженными симптомами. У 20-30 % больных заболевание приводит к циррозу печени, увеличивая риск развития печеночной недостаточности и гепатоцеллюлярной карциномы.

Специфические иммуноглобулины вырабатываются к ядру (нуклеокапсидному белку core), оболочке (нуклеопротеинам Е1-Е2) и фрагментам генома вируса (неструктурным белкам NS). У большинства больных ВГС первые антитела появляются через 1-3 месяца после инфицирования, но иногда могут отсутствовать в крови больше года. В 5 % случаев антитела к вирусу так никогда и не обнаруживаются. При этом о ВГC будет свидетельствовать выявление суммарных антител к антигенам вируса.

В острый период болезни образуются антитела классов IgM и IgG к нуклеокапсидному белку core. В период латентного течения инфекции и при её реактивации в крови присутствуют антитела класса IgG к неструктурным белкам NS и нуклеокапсидному белку core.

После перенесённой инфекции специфические иммуноглобулины циркулируют в крови 8-10 лет с постепенным снижением концентрации или сохраняются пожизненно в очень низких титрах. Они не защищают от вирусной инфекции и не снижают риска повторного заражения и развития заболевания.

Для чего используется исследование?

  • Для диагностики вирусного гепатита С.
  • Для дифференциальной диагностики гепатитов.
  • Для выявления ранее перенесённого вирусного гепатита С.

Когда назначается исследование?

  • При симптомах вирусного гепатита и повышении уровня печёночных трансаминаз.
  • Если известно о перенесённом гепатите неуточненной этиологии.
  • При обследовании людей из группы риска по заражению вирусным гепатитом С.
  • При скрининговых обследованиях.

Что означают результаты?

Референсные значения

Результат: отрицательно.

Отношение S/CO (signal/cutoff): 0 — 1.

Причины положительного результата:

  • острый или хронический вирусный гепатит С;
  • ранее перенесённый вирусный гепатит С.

Причины отрицательного результата:

  • отсутствие вируса гепатита С в организме;
  • ранний период после инфицирования;
  • отсутствие антител при вирусном гепатите С (серонегативный вариант, около 5 % случаев).

Что может влиять на результат?

  • При неправильном взятии и хранении материала может быть получен недостоверный результат.
  • Ревматоидный фактор в крови способствует ложноположительному результату.

Важные замечания

  • При положительном результате для подтверждения диагноза «вирусный гепатит С» выполняется тест с определением структурных и неструктурных белков вируса (NS, Core).
  • При имеющихся факторах риска заражения и подозрении на вирусный гепатит С рекомендовано определение РНК вируса в крови методом ПЦР даже при отсутствии специфических антител.

Также рекомендуется

Кто назначает исследование?

Инфекционист, гепатолог, гастроэнтеролог, терапевт.

Литература

  • Возианова Ж. И. Инфекционные и паразитарные болезни: В 3 т. — К.: Здоровье, 2000. – Т.1.: 600-690.
  • Кишкун А. А. Иммунологические и серологические исследования в клинической практике. – М.: ООО «МИА», 2006. – 471-476 с.
  • Harrison’s Principles of Internal Medicine. 16th ed. NY: McGraw-Hill; 2005: 1822-1855.
  • Lerat H, Rumin S, Habersetzer F, and others. In vivo tropism of hepatitis C virus genomic sequences in hematopoietic cells: influence of viral load, viral genotype, and cell phenotype. Blood. 1998 May 15;91(10):3841-9.PMID:9573022.
  • Revie D, Salahuddin SZ. Human cell types important for hepatitis C virus replication in vivo and in vitro: old assertions and current evidence. Virol J. 2011 Jul 11;8:346. doi: 10.1186/1743-422X-8-346. PMID:21745397.

kdlmed.ru

Исследования на вирусные гепатиты методом ифа. Вирусные гепатиты. LuchshijLekar.ru

ИФА в диагностике вирусных гепатитов. Возможности иммуноферментного анализа

Специфическая лабораторная диагностика вирусных гепатитов основывается на применении иммунохимических и молекулярно-биологических методов исследований. Основными иммунохимическими методами являются радиоизотопный или радиоиммунный (РИА) и иммуноферментный (ИФА). В основе иммунохимических методов диагностики лежит специфическое взаимодействие антиген — антитело с последующим выявлением комплекса при помощи специальных меток. Наиболее распространенным является иммуноферментный анализ.

Первые сообщения о применении иммуноферментного анализа. как метода для определения каких-либо веществ были опубликованы в 1971 году одновременно двумя исследовательскими группами — В. Van Weemen, A. Schuurs и Е. Engvall, P. Perlmann. В основе иммуноферментного анализа лежит следующий принцип: на твердой фазе, в качестве которой используется, главным образом, поверхность лунок полистиролового планшета, фиксируется антиген возбудителя инфекции или антитела (часто смесь антител) к антигенам, которые необходимо обнаружить. Этот антиген или антитела, которые зафиксированы на твердой фазе, называются иммуносорбентом.

В результате инкубации иммуносорбента и испытуемой сыворотки при наличии определяемого агента происходит их связывание в комплекс антиген — антитело. После процедуры промывки, в ходе которой удаляются несвязанные антигены и антитела, проводится инкубация с конъюгатом. В качестве конъюгата при детекции HBsAg используют анти-HBs, при детекции антител к вирусу гепатита С —антитела к иммуноглобулинам человека (антивидовой конъюгат), меченные пероксидазой хрена. В итоге этой инкубации происходит присоединение к уже имеющимся комплексам антиген — антитело дополнительно внесенного конъюгата. После удаления несвязавшегося конъюгата (отмывки) в лунки вносится субстрат. При использовании пероксидазного конъюгата в качестве субстрата используют перекись водорода в сочетании с индикатором, в качестве которого наиболее часто применяют ортофенилендиамин (ОФД) или тетраметилбензидин (ТМБ). Результат оценивается фотометрически.

Качество и надежность аналитических возможностей иммуноферментного метода характеризуются рядом критериев, к числу которых относятся чувствительность, специфичность, правильность и воспроизводимость.

Чувствительность — то минимальное количество вещества, которое может быть обнаружено при помощи иммуноферментного анализа. При этом нижним пределом чувствительности данного метода является концентрация исследуемого вещества в образце, которая соответствует наименьшему положительному результату определения, статистически достоверно отличающемуся от показателей заведомо отрицательных образцов. Чувствительность ИФТС зависит от ряда обстоятельств, связанных как с конструкцией тест-системы (аффинность иммуносорбента, качества экстракционных и буферных систем), так и разрешающей способностью и точностью метода регистрации.

Специфичность — способность выявлять именно те компоненты, для определения которых предназначена данная иммуноферментная тест-система. Специфичность ИФА определяется во многом перекрестной реакцией антител или антигенов (то есть композиции, используемой в качестве иммуносорбента), с близкородственными соединениями, а также составом инкубационной среды (матрикс-эффект).

Правильность — соответствие среднего значения результатов повторных определений одного и того же контрольного образца с истинной величиной измеряемого параметра. Правильность определения в ИФА зависит от качества самой тест-системы и контрольного образца. Для хороших иммуноферментных тест-систем показатели правильности лежат в пределах 90-110 %. Особенностью медико-биологических исследований в ИФА является невозможность установления точной величины, и поэтому за истинную величину принимается средняя от нескольких экспертных лабораторий. Статистическим критерием правильности служит средняя арифметическая и степень ее отклонения от истинного значения, выраженная в процентах.

Воспроизводимость — способность тест-системы показывать одни и те же значения при повторных исследованиях одного и того же образца. Воспроизводимость зависит как от случайных погрешностей (ошибок) при проведении процедуры постановки реакции, так и от качества тест-систем и точности метода регистрации результатов. Считается, что воспроизводимость одних и тех же контрольных образцов одной фирмы в разных лабораториях не должна превышать величину коэффициента вариации в 15%.

Существует несколько специфических схем ИФА для определения маркеров вирусных гепатитов: а) прямой иммуноферментный анализ; б) непрямой иммуноферментный анализ; в) конкурентное ингибирование; в) «ловушеч-ный», или «capture» метод.

Из молекулярно-биологических методов диагностики вирусных гепатитов чаще используются полимеразная цепная реакция и гибридизация. Эти методы, особенно ПЦР, позволяют выявлять очень малые количества специфической вирусной ДНК или РНК и, таким образом, судить о репликации, а в ряде случаев и об активности репликации.

Анализ крови на гепатит С

Гепатит С является одним из самых распространенных заболеваний печени, которое возникает при инфицировании вирусом гепатита С (HСV), проникающим в организм преимущественно при контакте с кровью инфицированного человека. Встречается хронический и острый гепатит С. У 70-80 процентов пациентов с острым гепатитом С нет никаких симптомов заболевания, только в некоторых случаях через какое-то время после заражения бывают проявления болезни, которые выражаются в усталости, боли в животе, потере аппетита, потемнении мочи, рвоте, тошноте, осветлении кала, желтухе, боли в суставах. Как правило, симптомы возникают спустя 6-7 недель после заражения, но срок появления признаков заболевания варьируется от 2 недель до полугода. При возникновении вышеперечисленных симптомов нужно обратиться к врачу-инфекционисту и сдать анализ крови на гепатит С. Диагностика гепатита, проведенная своевременно, позволяет обнаружить заболевание еще на ранних стадиях и существенно увеличить шансы на выздоровление.

Когда назначается анализ на гепатит С

Ситуации, когда обязательно назначается анализ на гепатит С:

  • во время вынашивания беременности и при планировании семьи;
  • пациентам с симптомами хронического или острого гепатита;
  • человек находится в группе риска. Это медицинские работники, лица, пребывающие в местах лишения свободы, сотрудники правоохранительных органов, лица, которые употребляют наркотики, имеют большое число половых партнеров, страдают СПИДом, находятся на гемодиализе и прочие.

Подготовка к анализу на гепатит С

Специальной подготовки к анализу на гепатит С не требуется. Для анализа производится забор крови из вены натощак, при этом после последнего приема пищи должно пройти не менее восьми часов.

Анализы ИФА на гепатит С

Первый анализ, обычно назначаемый для диагностики гепатита С – ИФА тест (иммуноферментный анализ). Анализы ИФА на гепатит С позволяют обнаружить в крови наличие антител к вирусу гепатита С (anti-HCVAb). Если результат ИФА теста положительный, то это указывает на наличие контакта организма с вирусом гепатита С. Но у 40 процентов людей, у которых положительный ИФА, в крови тест вируса не обнаруживается. Это явление называется ложноположительным результатом. Также при помощи ИФА проверятся донорская кровь.

Анализы RIBA на гепатит С

Анализ RIBA на гепатит С используется для подтверждения положительного результата ИФА. Метод рекомбинантного иммуноблотинга (RIBA) является более точным исследованием наличия антител к вирусу гепатита С. Наличие в организме вируса гепатита С положительный результат этого анализа также не определяет, а только подтверждает присутствие антител.

Анализы ПЦР на гепатит С

С целью выявить наличие в крови вирусов гепатита С (RNA HCV) и поставить диагноз, чаще всего пользуются анализом методом полимеразной цепной реакции (ПЦР). Это исследование дает возможность обнаружить с высокой точностью присутствие в крови даже малого количества вируса. Анализ ПЦР на гепатит С может выявить наличие вируса уже спустя 5 дней после заражения, задолго до возникновения антител. Когда результат анализа ПЦР положительный, то это означает наличие активной инфекции.

Существуют такие вариации анализа ПЦР:

  • количественный ПЦР, позволяющий определить не только сам факт наличия вируса, но и вирусную нагрузку (количество вируса). Этот показатель имеет большое значение для определения эффективности лечения;
  • генотипирование, устанавливающее генотип вируса гепатита С, что важно для определения продолжительности и тактики лечения. Вируса гепатита С существует более 10 генотипов, но для клинической практики достаточно определения пяти, наиболее распространенных типов: 1a, 1b, 2,3а/3b.

Количественный анализ ПЦР проводится:

  • при качественном положительном тесте на присутствие в сыворотке РНК вируса гепатита С;
  • для точной оценки эффективности лечения;
  • для определения тактики лечения пациента.

Прямой взаимосвязи между тяжестью гепатита С и количеством вируса в крови не существует. Концентрация вируса влияет на инфекционность заболевания, то есть, чем больше количество вируса в крови больного, тем больше риск передачи вируса, к примеру, при половом контакте или от матери ребенку. Также от концентрации вируса зависит эффективность лечения. При проведении терапии благоприятным фактором является низкая вирусная нагрузка, а очень высокая – неблагоприятным.

Анализ генотипирования делается:

  • при качественном положительном тесте на присутствие в сыворотке РНК вируса гепатита С;
  • для точной оценки эффективности лечения;
  • для определения тактики лечения пациента;
  • для прогнозирования хронизации инфекционного процесса;
  • для определения прогрессирования заболевания.

Выявление генотипа вируса имеет большое значение для определения продолжительности лечения, что важно, поскольку интерферону присущи широкий спектр побочных действий и низкую переносимость больными.

Расшифровка анализа на гепатит С

В норме РНК вируса, антитела к ним и антигены полностью отсутствуют. Присутствие антител в крови свидетельствует о наличии хронического или острого гепатита С либо о периоде выздоровления. Если в крови присутствует RNA HCV, который определяется при анализе ПЦР, это указывает на наличие в крови вируса.

При неправильной технике проведения исследования, нарушениях транспортировки и забора крови анализ ПЦР иногда может показывать ложноположительные результат. Анализы ИФА и RIBA на ранних стадиях заболевания, когда организмом еще не выработано достаточное количество антител, могут показывать ложноотрицательный результат.

Если при расшифровке анализа на гепатит С получены положительные результаты, необходимо обращение к врачу-инфекционисту и гастроэнтерологу для дальнейшей диагностики и лечения.

Нейтрофилы сегментоядерные понижены

Тромбоциты у ребенка - норма, повышены, понижены

Тиреотропный гормон ТГТ

Диагностика гепатитов

Определить присутствие в организме гепатита одной из форм можно не сразу, поскольку инкубационный период заболевания может длиться до четырех недель. Когда же появляются первые признаки болезни, то в пораженном организме происходят радикальные изменения состава крови: биохимический анализ сообщает о серьезной проблеме со здоровьем и присутствии болезнетворного вируса. Однако для постановки окончательного диагноза вовсе недостаточно сдать кровь на гепатит, также необходима подробная диагностика гепатитов.

Лабораторная диагностика гепатитов

Проводить ее желательно после окончания инкубационного периода, чтобы врач с предельной точностью смог определить присутствующее в организме заболевание печенки. В противном случае назначенное лечение не даст желанного терапевтического эффекта и даже усугубит преобладающую клиническую картину.

Диагностика гепатита A

Как правило, диагностика гепатита A начинается с подробного расспроса пациента и назначения ряда анализов, которые необходимо выполнить в самые кратчайшие сроки. Это:

  • биохимический анализ крови;
  • полный клинический анализ крови;
  • метод ПЦР;
  • ИФА;
  • коагулограмма.

Если прогрессирует болезнь Боткина, то по результатам биохимического анализа крови наблюдается аномальный скачок билирубина, АлАТ и АсАТ, тимоловой пробы. Мало того, вырабатываются специфические анти-ВГА IgМ, которые являются неопровержимым фактом присутствия в организме гепатита A.В общем анализе крови определяется спад лейкоцитов, скачок СОЭ и лимфоцитоз. И, тем не менее, самым надежным является метод ПЦР, который определяет показатель РНК болезнетворного вируса.Дополнительно врач изучает симптоматику заболевания, после чего может поставить окончательный диагноз и преступить к наиболее эффективной терапии. Необходимость в инструментальном обследовании возникает крайне редко. После успешного консервативного лечения в условиях госпитализации и карантина пациента ожидает окончательное выздоровление, причем повторно гепатит A не рецидивирует.

Диагностика гепатита B

Определить присутствие вируса гепатита B также можно по результатам лабораторных исследований, и для этого первым делом требуется сдать кровь на гепатит. По своей природе болезнетворный вирус имеет три главных антигена – НВsАg, НВcАg и НВеАg, к которым в организме вырабатываются антитела. Основным в данной клинической картине является ИФА – иммуноферментный анализ, который как раз и выявляет специфические маркеры гепатита B.Сразу стоит уточнить, что антиген НВsАg появляется в крови еще до первых симптомов гепатита и достоверно определяется в желтушном периоде. Однако отрицательный тест не исключает присутствия гепатита B, поэтому дополнительно требуется применение не менее эффективного метода полимеразной цепной реакции (ПЦР).При подозрении на гепатит обязательным является биохимический анализ крови, который рекомендуется сдать в самую первую очередь. Выполнение биопсии печени и УЗИ органов брюшины оговаривается индивидуально, но, когда история болезни предельно ясна, в клинических методах обследования не возникает необходимости.

Эхограмма печени при аутоиммунном гепатите на стадиии хронического гепатита

Диагностика гепатита C

Для постановки этого диагноза вовсе недостаточно сдать кровь на гепатит, поскольку вирус может преобладать в организме в скрытой форме. И, тем не менее, основными лабораторными исследованиями являются все анализы, представленные выше, а также дополнительное выполнение биопсии печени. Это микроскопическое исследование биологического материала (в нашем случае кусочка ткани печени) определяет степень распространения патологического процесса и фиброз тканей. Забор материала выполняется под местным обезболивающим, осложнения такой процедуры выявляются в медицинской практике крайне редко.При подозрении на гепатит C основным методом клинического обследования является УЗИ органов брюшины. Объясняется это просто: болезнь часто проявляется визуальным изменением пораженной печени, переменами в ее структуре и размерах. Таким способом можно определить:

  • размеры печенки, селезенки, поджелудочной железы и желчного пузыря;
  • патологические изменения в этих органах;
  • состояние общего кровотока в органах брюшины;
  • оптимальную зону для выполнения биопсии печени.

Этот метод клинического обследования определяет все очаговые патологии органа на микроскопическом уровне. Если на экране печень представлена в серой шкале, требуется немедленное проведение биопсии, поскольку серый цвет визуализирует пораженные ткани «человеческого фильтра».

Профилактика гепатитов

Поскольку болезнь проявляется не сразу, приступить к немедленному лечению получается далеко не во всех клинических картинах. Пациент может просто не знать о существовании в организме болезнетворного вируса, а тот, в свою очередь, стремительно распространяется в кровь и поражает здоровые клетки печени.Чтобы избежать столь трагичной участи, рекомендуется соблюдать все профилактические меры. Такая бдительность заметно сократит риск заболеваемости и избавит от серьезных проблем со здоровьем в будущем. Основные правила профилактики представлены ниже:

  • мыть руки после улицы;
  • подвергать качественной обработке свежие овощи, фрукты;
  • выполнять все профилактические прививки, указанные в ежегодном календарном плане;
  • избирательно относиться к сексуальным партнерам;
  • избегать контакта с больными людьми;
  • пользоваться только одноразовыми шприцами и проявлять особую бдительность на станциях переливания крови.

Также рекомендуется регулярно (один раз в полгода) сдавать кровь на гепатит, чтобы удостовериться, что вирус не проник в организм, и не поражает некогда здоровые клетки печенки. Если же диагноз определен, требуется немедленно стать на диспансерный учет и следовать всем рекомендациям специалиста.

Автор публикации: Сыропятов Сергей Николаевич Образование: Ростовский Государственный Медицинский Университет (РостГМУ), Кафедра гастроэнтерологии и эндоскопии.ГастроэнтерологДоктор Медицинских Наук

Источники: http://meduniver.com/Medical/zabolevania_pecheni/ifa_v_diagnostike_gepatita.html, http://www.luxmama.ru/1/l48/analiz-krovi-na-gepatit-s/, http://lechupechen.ru/gepatit/diagnostika-gepatitov/

Комментариев пока нет!

luchshijlekar.ru

HCV анализ крови - что это: расшифровка без помощи специалистов

Как всем известно, сдача анализов — это не очень приятная процедура. Она становится особенно неприятной, когда по тем или иным причинам приходится сдавать анализ крови. Во-первых, любого нормального человека не может радовать вся эта возня со шприцами и иголками, поиском вен и прокалыванием плоти. Во-вторых, вид крови многих заставляет содрогнуться. А в-третьих, всех пугает неизвестность, а вдруг найдут что-нибудь нехорошее. Волнение возрастает, когда приходят результаты исследований (в которых очень сложно разобраться без помощи специалистов), и наступает момент истины, когда многие здоровые люди мгновенно становятся пациентами.

Довольно часто гражданам, проходящим диспансеризацию, назначают HBS и HCV анализ крови — что же это за исследование? На этот вопрос можно ответить просто — эти тесты проводятся для обнаружения опасных вирусных заболеваний печени, зачастую протекающих бессимптомно. Расшифровка результатов данных анализов не представляет собой ничего сложного. Плюс или слово «положительный» в результате исследования обозначает, что вы заразились, и вам необходимо в ближайшее время обратиться в специализированный медицинский центр.

В поисках гепатита С

hcv анализ кровиHCV анализ крови позволяет выявить в организме исследуемого антитела к РНК-содержащему вирусу гепатита С. Поэтому иногда его еще называют anti-HCV тест.

Гепатит С — это инфекционное заболевание печени, которое может протекать бессимптомно как в острой, так и в хронической форме. Заражение этим вирусом происходит только при непосредственном контакте с кровью больного. При отсутствии лечения острая стадия этого заболевания перетекает в хроническую. Хронический гепатит С со временем может привести к следующим заболеваниям:

  • циррозу печени;
  • печеночной недостаточности;
  • раку печени.

Кроме того, эта инфекция может также поражать и разрушать ткани поджелудочной железы, желчного пузыря и селезенки. Лечение этой болезни очень дорогое. Лечат ее при помощи интерферон-содержащих фармацевтических препаратов и рибавирина. Продолжительность и, соответственно, стоимость лечебного курса зависит от генотипа вируса и стадии заболевания.

Для того чтобы выяснить, в какой стадии у конкретного пациента протекает инфекция — острой или хронической, назначается расширенный анализ HCV методом ИФА, призванный выявить различные антитела к вирусу.

Антитела к этой инфекции бывают 2 классов:

  1. IgG.
  2. IgM.

Оба класса антител обнаруживаются уже через месяц-полтора после заражения. Наличие в крови обоих классов антител чаще всего информирует о том, что болезнь протекает в острой фазе, и ее можно быстро и относительно недорого вылечить. Наличие в организме только IgG антител с большой вероятностью указывает на перетекание болезни в хроническую форму.

Определение генотипа этого вируса производится при помощи ПЦР исследования.

Довольно часто при обнаружении данного заболевания медицинские специалисты немедленно направляют заразившихся на проведение HBS теста.

В поисках гепатита В

HBS анализ крови бывает 2 видов:

  1. HBSag.
  2. Anti HBS.

Первый вид исследования позволяет определить наличие в организме пациента вируса гепатита В.

Anti HBS тест позволяет выявить в организме больного антитела к этому вирусу.

анализ крови на гепатитГепатит В — это инфекционное вирусное заболевание, заражение которым происходит как при непосредственном контакте с кровью больного, так и при половом контакте. Это более заразное заболевание, чем гепатит С. Острая стадия этой инфекции часто протекает бурно — с рвотой, повышением температуры и желтухой. Лечится острая форма этой болезни очень быстро и дешево. Пациенту просто проводится детоксикационная терапия, которая в 80-90% случаев приводит к полному излечению.

Однако у 10-20% пациентов эта болезнь перетекает в хроническую форму. Описание последствий хронического течения данной инфекции ничем не отличается от последствий хронического течения гепатита С. Лечение хронической формы заболевания производится при помощи интерферон-содержащих препаратов.

Положительный результат anti HBS теста не информирует о наличии вируса в организме, он свидетельствует о присутствии антител. У людей, излечившихся от острого гепатита В, антитела к этому вирусу могут сохраняться в крови в течение многих лет. Кроме того, наличие этих антител в организме людей, прививавшихся от данной инфекции, совершенно естественно.

101analiz.ru

Методы ИФА и иммуноблотинга в диагностике гепатита С

Констатация HCV-инфекции (гепатита С, ВГС) основывается на обнаружении специфических серологических маркеров. Это важно как для дифференциальной диагностики данного заболевания, так и для суждения о его стадии, прогнозирования процесса и анализа активности его развития, а также оценки эффективности применяемой терапии. Наиболее широко в данном случае практикуется выявление антител к вирусу гепатита С (анти-HCV). Принципиально значимая роль отводится генодиагностике, основанной на детекции РНК ВГС. Также сегодня существует возможность обнаружения циркулирующих вирусных антигенов.

Метод ИФА

Обнаружение анти-HCV проводится методом ИФА (иммуноферментного анализа). Сегодня с этой целью используются диагностические системы третьего поколения, построенные из рекомбинантных и/или синтетических фрагментов структурных и неструктурных вирусных белков (С, NS3, NS4 и NS5). Разработка и внедрение данного метода позволили сократить сроки первичного выявления антител при острой инфекции гепатита С, существенно повысить специфичность и чувствительность реакции. Далеко не каждая страна располагает развитыми технологиями для выявления подобных заболеваний. В клиниках Израиля для лечения и диагностики ВГС гепатологами используются новейшие исследовательские методики.

Частота обнаружения анти-HCV среди РНК вируса позитивных образцов крови близка к 100 %. При хронической фазе гепатита С антитела обнаруживаются постоянно, а после устранения инфекции сохраняются в течение 48 и более лет. Таким образом, наличие анти-HCV не всегда указывает на присутствие вируса в организме, что не позволяет оценить активность процесса. Судить о вирусной нагрузке, активности HCV репликации, риске хронизации, продолжительности инфекционного процесса, разграничении острой и хронической стадий, а также степени поражения печени позволяет определение спектра антител к белкам ВГС. Таким же образом обеспечивается наблюдение за их количественной и качественной динамикой. Однако получаемая информация является ориентировочной и требует подтверждения иными методами.

Обнаружение антител к антигенам гепатита С имеет самостоятельное значение в диагностике. Так, анти-core, анти-Е и анти-NS3 выявляются на начальных этапах сероконверсии, анти-NS4 и анти-NS5 в большинстве случаев появляются позднее. По мере эскалации инфекционного процесса титры обнаруженных антител к вирусу гепатита С увеличиваются.

Установлено, что наличие в сыворотке крови анти-HCV-core является достаточно надежным маркером репликации ВГС, так как их присутствие может быть взаимосвязано с наличием специфической мРНК. Этот тест может использоваться для подтверждения при исследовании образцов с «неопределенными» результатами. Сыворотки крови, в которых анти-НCV-core выявляются в разведении 1:1000, вероятнее всего являются реально позитивными и содержат инфекцию. Образцы, позитивные в разведении 1:200 и отрицательные при показателях 1:1000, в дальнейшем должны быть исследованы на наличие вирусной РНК. С высокой вероятностью такие сыворотки могут быть отнесены к реально негативным. Таким образом, использование предварительного анти-HCV-core теста позволяет значительно снизить количество образцов, для которых требуется подтверждение методом ПЦР. Также имеются данные, что у беременных женщин (срок – 4 неделя и выше) тест на анти-HCV-core может быть ложноположительным.

Анти-NS3 могут выступать самостоятельным маркером инфекции ВГС в острой фазе. Высокий уровень этих антител указывает на значительную вирусную нагрузку, а их длительное сохранение в острой фазе свидетельствует о высоком риске хронизации процесса.

Выявление анти-NS4 и их высокие титры чаще всего свидетельствуют о длительном характере инфекционного процесса, что также связано со степенью поражения печени.

Имеются сведения о том, что выявление анти-NS5 в высоких титрах зачастую определяет наличие вирусной РНК, а в острой стадии указывает на дальнейшую хронизацию инфекционного процесса. Также известно, что имеются последовательности, имеющие неспецифическую реакцию на антитела в сыворотках крови. Эти данные были получены в результате эпитопного картирования, проведенного с помощью синтетических пептидов.

Для клинической практики большое значение может иметь выявление анти-Е1/Е2. Определение анти-Е в течение месяца после начала заболевания и быстрое дальнейшее снижение их уровня может служить подтверждением очищения организма от РНК вируса гепатита С. В то время как выявление анти-Е при хронической инфекции свидетельствует об активной репликации HCV.

Для гепатитов А, В и Д определение антител класса IgM к различным маркерам служит важным показателем наличия острой или хронической инфекции. Важность их выявления при ВГС окончательно не выяснена. Исследования показывают противоречащие результаты. Так, IgM ответ в острой фазе гепатита С не соответствует классическому пути образования антител: IgM анти-HCV могут выявляться одновременно и же позднее, чем IgG анти-HCV. Поэтому их обнаружение не указывает на наличие острого вируса ВГС. При этом длительность циркуляции антикор IgM (35 месяцев) считается фактором, прогнозирующим персистентную инфекцию, а их появление при хронической инфекции свидетельствует об обострении заболевания. Этому соответствует зависимость между эффективностью назначенной терапии и темпами снижения антикор IgM.

Иммуноблотинг

Данный метод основан на дифференцированном выявлении антител к различным антигенам (С, NS3, NS4 и NS5), которые в виде дискретных фракций («пятен») фиксируются на нитроцеллюлозных полосках и после инкубации с исследуемой сывороткой проявляются мечеными антителами как в «обычном» ИФА. Свидетельством положительного результата является выявление антител к 2 и более антигенам.

Несмотря на высокую специфичность, современные ИФА-системы не способны гарантировать отсутствие ложноположительных результатов. Для их исключения необходима динамическая оценка на основе индикации анти-HCV к дискретным антигенам – подтверждающие тесты.

Также возможно получение ложноотрицательных результатов, когда анти-HCV не удается выявить даже при наличии вируса в организме. Это могут быть следующие ситуации:

1) начальная стадия заболевания (фаза серонегативного «окна»),

2) инфицирование больных, принимающих иммунодепрессанты,

3) заражение некоторыми генотипами гепатита С (3 и 4).

В коммерческих тестах, проводимых с целью выявления антител к HCV, в качестве антигенов используются синтетические пептиды или рекомбинантные белки. Последние создаются на основе аминокислотной последовательности ВГС генотипа 1. При этом учащаются случаи, подтверждающие недостаточную эффективность данных тестов для надежной детекции антител при заражении инфекцией другого генотипа. Так, недавно проведенные исследования показали неспособность некоторых из них адекватно выявлять антитела к HCV у больных, зараженных вирусом 1а и 3а субтипов. Значимость данного наблюдения высока как для регионов, где чаще встречается HCV-инфекция других форм, так и для отдельных популяций.

Из этого следует, что для эффективной диагностики гепатита С требуется проведение высокочувствительного теста, способного адекватно реагировать с анти-HCV любого генотипа.

Помимо прямого изучения структуры РНК, сведения об инфицировании конкретным генотипом могут быть получены на основе изучения антител против генотипоспецифических эпитопов, локализованных в NS4, NS5 и С белках вируса. В настоящее время в перечень серотипируемых вариантов HCV входят субтипы 1a, 1b, 2a, 2b, 3a и 4а. Данные РНК-типирования и серотипирования в 50-95 % случаев совпадают в зависимости от генотипа. Осуществляется коммерческий выпуск диагностических препаратов для серотипирования в планшетном варианте ИФА и иммуноблоте. В настоящее время в странах с высоким уровнем развития медицины, таких, как Израиль, диагностика гепатитов включает проведение целого комплекса исследований, принятого в мировой гепатологии. Данный подход позволяет вовремя поставить точный диагноз и назначить эффективный курс противовирусной терапии.

imedexpert.ru

HCV анализ крови: о чем говорят результаты?

Вирус гепатита С (ВГС) вызывает заболевание, которое чаще протекает скрыто, но приводит к тяжелым последствиям. Выявить проблему помогает исследование крови на HCV. При этом в плазме могут быть найдены антитела IgG и IgM. Другое название метода — анализ на anti-HCV.

 

О чем говорят антитела?

Дело в том, что иммунная система человека устроена определенным образом: при попадании в организм посторонних микроорганизмов она начинает вырабатывать вещества, помогающие справиться с инфекцией — антитела. В случае с гепатитом С эти антитела носят название анти-HCV. В период обострения болезни эта методика способна определить антитела IgG и IgM. А если гепатит С является уже хроническим заболеванием, то в анализе крови будет обнаружен иммуноглобулин класса IgG.

кровь на анализ

Спустя 4–6 недель после инфицирования концентрация антител класса M становится максимальной. По прошествии 5-6 месяцев уровень IgM снижается, а в период реактивации инфекции снова повышается. Через 11-12 недель после заражения вирусом гепатита С антитела класса G достигают максимума, а на 5-6-й месяц — держатся на одном уровне в период протекания всего заболевания. Суммарный уровень антител можно определить на 4-5 неделе после заражения.

Насколько опасен вирус гепатита С?

Когда ВГС поражает печень, он внедряется в тело клеток. Пораженные клетки начинают отмирать, а в итоге развивается гепатит С. ВГС опасен еще тем, что способен размножаться в макрофагах, моноцитах и нейтрофилах крови. Кроме того, ВГС может легко мутировать, благодаря чему избегает губительного воздействия на него иммунной системы человека. В последствии могут возникнуть цирроз печени, гепатоцеллюлярная карцинома, сопровождающиеся развитием печёночной недостаточности. Эти заболевания имеют необратимые последствия для организма и могут привести к летальному исходу.

Люди, которые входят в группу риска заражения ВГС являются больными, нуждающимися в пересадке органов или переливании крови, а также теми, кто украшает свое тело тату. Отдельной группой риска являются гомосексуалисты и наркоманы. Еще существует риск передачи ВГС во время родов от роженицы к младенцу. Но главная опасность гепатита С в том, что почти во всех случаях он протекает бессимптомно. Острый период заболевания плавно переходит в хронический, сопровождаясь определенными симптомами. Возможно ухудшение течения заболевания, проявляющееся обострением.

Результаты исследований HCV

Анализ можно сделать в лаборатории частных клиник или государственных поликлиник и больниц. Исследование занимает два дня. За полчаса до забора крови нельзя курить.

Показания к анализу на HCV:

  1. Больной относится к определенной группе риска.
  2. Пациентом уже был перенесен вирус гепатита.
  3. Отсутствие аппетита, сопровождаемое снижением веса и тошнотой.
  4. Беспричинные боли по всему телу.
  5. Резкое повышение или изменение уровня печёночных трансаминаз.
  6. Скрининговые обследования.

Существует два вида исследования:

1. Иммуноферментный анализ (ИФА) позволяет найти следы уже перенесенной болезни (антитела). Если организм человека знаком с вирусом результат будет положительным (+), когда человек не болел гепатитом, результат негативный (-). Но результаты ИФА не являются окончательным основание для заключения диагноза. Дело в том, что антитела лишь подтверждают реакцию иммунитета на вирус. Они вырабатываются иммунной системой в том случае, когда вирус находится в крови. У определенных пациентов анализ hcv выявляет антитела на протяжении нескольких лет жизни, но самого вируса в крови нет.

При таких обстоятельствах врачи говорят о ложноположительном результате. Как может получиться такой результат? Иногда используются малочувствительные к определенным генотипам тест-системы. Иным объяснением может служить тот факт, что инфицированный организм сам нейтрализовал вирус гепатита, но такой исход присущ малому количеству больных. Зачастую антитела говорят о хроническом гепатите. Ложный результат можно получить при наличии в крови ревматоидного фактора.

Иногда случается, что анализ hcv показывает ложноотрицательный результат. Это свидетельствует о наличии вируса в организме, но ИФА его не распознает. Объясняется это тем, что заражение вирусом предположительно произошло около 6 месяцев назад, иммунная система еще не успела отреагировать и выработать антитела. Обычно у 70 % пациентов антитела обнаруживают при первых симптомах гепатита.

2. Полимеразная цепная реакция (ПЦР) выявляет молекулы ДНК гепатита. Уже через 1–3 недели после инфицирования, благодаря чувствительности ПРЦ, можно диагностировать наличие вируса в крови. По окончании тестирования становится понятно, болен ли человек хроническим гепатитом или же антитела выработаны иммунной системой после перенесенной болезни. Положительный результат говорит о гепатите, а отрицательный — о выздоровлении или отсутствии обострений заболевания при хронической форме.

Количественный анализ — это исследование, определяющее вирусную нагрузку (концентрацию вируса в 1 мл крови). Большая концентрация вируса свидетельствует о плохих шансах на выздоровление пациента, низкая, наоборот, эти шансы значительно увеличивает. Контролировать эффективность лечения гепатита антивирусными препаратами позволяет определение активности HCV. Устойчивость вируса гепатита С к интерферону зависит от генотипа, который определяет еще один анализ. В итоге выбирается соответствующая стратегия лечения.

Но по одному результату анализа диагноз не устанавливается, всегда должны проводиться подтверждающие тесты. Проведение анализов показано и для контроля лечения. Результаты их ни в коем случае не отменяют других методов диагностики гепатита, а, наоборот, являются дополнением. Окончательный диагноз устанавливает врач.

asosudy.ru


Смотрите также