Поликлональные и моноклональные антитела. Поликлональные антитела


Поликлональные и моноклональные антитела

Моноклональные антитела - антитела, вырабатываемые иммунными клетками, принадлежащими к одному клеточному клону, то есть произошедшими из одной плазматической клетки-предшественницы. Моноклональные антитела могут быть выработаны на почти любое вещество (в основном белки и полисахариды), которое антитело будет специфически связывать. Они могут быть далее использованы для детекции(обнаружения) этого вещества или его очистки. Моноклональные антитела широко используются в биохимии, молекулярной биологии.

Поликлональные антитела получают из сыворотки крови иммунизированного животного, обычно кролика, барана или козы. Она содержит антитела неодинаковой специфичности по отношению к различным эпитопам полидетерминантного иммуногена. Поликлональные антитела образуются в результате функционирования многочисленных клеточных клонов и, следовательно, гетерогенны на самых разных уровнях: по классу и подклассу (изотипу) антител, их специфичности, титру и аффинности. Из одного и того же стока поликлональных антител можно приготовить препарат, содержащий антитела к множеству отдельных антигенов (полиспецифичность), антитела к небольшому числу антигенов (олигоспецифичность) или антитела к одному единственному антигену (моноспецифичность).

Антитела (иммуноглобулины, Ig) подразделяют на классы в зависимости от структуры, свойств и антигенных особенностей их тяжелых цепей. Легкие цепи в молекулах иммуноглобулинов представлены двумя изотипами - лямбда (λ) и каппа (κ), которые различаются по химическому составу вариабельных и константных участков.

Изотипическая вариабельность проявляется в наличии классов антител (изотипов), различающихся по строению тяжёлых цепей и олигомерностью. Тяжелые цепи иммуноглобулинов подразделены на 5 изотипов. Они определяют их принадлежность к одному из пяти классов иммуноглобулинов - G, М, A, D, Е.

Таким образом, в состав молекул разных классов иммуноглобулинов входят легкие и тяжелые цепи, которые относятся к разным изотипическим вариантам иммуноглобулинов.

Сыворотку крови, содержащую антитела к какому-либо антигену, называют антисывороткой. Антисыворотка, как правило, поликлональна, поскольку содержит антитела, продуцируемые разными клонами плазматических клеток. Антисыворотку обычно получают путем иммунизации организма каким-либо антигеном.

Поликлональная антисыворотка может быть моноспецифической, то есть содержащей антитела к разным эпитопам одного и того же антигена. Например, выпускают поликлональные моноспецифические антисыворотки против тяжелых цепей иммуноглобулинов М, G, А человека. Каждая такая антисыворотка содержит поликлональные антитела, направленные к различным эпитопам какой-либо цепи иммуноглобулинов.

Моноклональные антитела продуцируются одним клоном плазмоцитов. Разработан метод получения больших количеств моноклональных антител с помощью, так называемой гибридомной технологии, являющейся одной из составляющих клеточной инженерии.

Гибридомы являются бессмертными клеточными клонами, продуцирующими антитела одной специфичности. Гибридомы получают путем слияния нормальных плазматических клеток, продуцирующих антитела, с опухолевыми В-лимфоцитами. Затем гибридомы отбирают в культуральной среде, не способной поддерживать рост родительских клеток. С помощью последовательных разведений и пересевов получают одиночные гибридные клетки и их клоны, способные неограниченно долго размножаться в условиях in vitro и продуцировать антитела. Клеточные линии, полученные из таких клеток, называют гибридомами. Используя различные методы культивирования гибридом, нарабатывают большие количества моноклональных антител.

Моноклональные антитела идентичны по своему строению, то есть относятся к одному и тому же классу, изотипу, аллотипу, имеют одинаковые активные центры, обладают одной и той же специфичностью, взаимодействуют с одним и тем же эпитопом антигена с одинаковой аффинностью.

Моноклональные антитела могут нарабатываться в неограниченных количествах и используются в качестве стандартных реагентов в иммунодиагностике, а также в качестве терапевтических антител. За создание гибридомной технологии Келер и Мильштейн в 1984 году получили Нобелевскую премию.

Практическое применение

Ученые из Медицинской Школы Горы Синай (Mount Sinai School of Medicine, США) показали, что применение поликлональных антител к фолликулостимулирующему гормону (ФСГ) может стать более эффективным подходом к лечению больных остеопорозом, чем современные методы. Результаты исследования опубликованы в журнале Proceedings of the National Academy of Sciences.

Несколько лет назад научная группа из Медицинской Школы Горы Синай под руководством профессора Моне Заиди (Mone Zaidi) продемонстрировала, что фолликулостимулирующий гормон (ФСГ) напрямую регулирует обмен веществ в костной ткани. Синтез ФСГ в организме женщины повышается на раннем этапе менопаузы, что снижает плотность костной ткани и замедляет рост кости.

Задачей нового исследования ученых стало создание поликлональных антител к ФСГ, применение которых поможет предотвратить развитие остеопороза, а также вылечить уже больных этим заболеванием женщин. Ученые оценили эффективность новых поликлональных антител на мышах с удаленными яичниками. Результаты экспериментов показали, что поликлональные антитела усиливают регенерацию костной ткани, что одновременно приводит к замедлению ее разрушения и усиливает образование новой кости.

Видео: Моноклональные антитела в лечении рака 

biofile.ru

Поликлональные антитела для научных исследований

Артикул Антиген Клон Вид хозяина Разведение Производитель E2920  14-3-3 beta  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience E12600  14-3-3 zeta  N/A Rabbit 1:50 SpringBioscience E16450  ACTH/Adrenocorticotrophic Hormone  SPM501 Mouse 1:400 SpringBioscience E3490  ACTH/Adrenocorticotrophic Hormone  N/A Rabbit 1:500 SpringBioscience AC-0167RUO  Actin alpha, Smooth Muscle  EP188 Rabbit 1:100-1:200 Epitomics M4240  Actin-beta  SP124 Rabbit 1:200 SpringBioscience E16650  Actin-Skeletal Muscle  5C5.F8.C7 Mouse 1:50 SpringBioscience E3880  Actin-Skeletal Muscle  N/A Rabbit 1:200 SpringBioscience E14340  Actin-Smooth Muscle  1A4 Mouse 1:200 SpringBioscience E2460  Actin-Smooth Muscle  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience E19220  Actin-Smooth Muscle Alpha  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience M4710  Actin-Smooth Muscle/SMA  SP171 Rabbit 1:200 SpringBioscience 393A  Adipophilin  N/A Rabbit 1:25-1:100 Cell Marque  Corporation 203R  AFP/Alpha-Fetoprotein  EP209 Rabbit 1:100-1:500 Cell Marque  Corporation E10840  AKT1/2  N/A Rabbit 1:50 SpringBioscience E13450  AKT1/PKB/phospho Ser 473  N/A Rabbit 1:25 SpringBioscience 400M  ALDh2A1  44 Mouse 1:25-1:100 Cell Marque  Corporation AC-0136RUO  ALDh2A1  EP168 Rabbit 1:100-1:200 Epitomics M5960  ALDh2A1  SP296 Rabbit 1:100 SpringBioscience M5970  ALDh2A1  SP297 Rabbit 1:100 SpringBioscience M5980  ALDh4A1  SP298 Rabbit 1:100 SpringBioscience M4440  ALK/Anaplastic Lymphoma Kinase  SP144 Rabbit 1:200 SpringBioscience M5880  Alpha B Crystallin  SP288 Rabbit 1:100 SpringBioscience E3450  alpha-1-Antichymotrypsin  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience M4540  Alpha-Fetoprotein  SP154 Rabbit 1:50 SpringBioscience E3400  Amylin Peptide  N/A Rabbit 1:200 SpringBioscience E3530  Amyloid beta/Amyloid A4  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience M4070  Androgen Receptor  SP107 Rabbit 1:400 SpringBioscience E2720  Androgen Receptor  N/A Rabbit 1:200 SpringBioscience 200R  Androgen Receptor   SP107 Rabbit 1:50-1:200 Cell Marque  Corporation 200R  Androgen Receptor   EP120 Rabbit 1:100-1:200 Cell Marque  Corporation M5420  Androgen Receptor (AR) (C-term)  SP242 Rabbit 1:100 SpringBioscience E14030  Annexin A1  N/A Rabbit 1:25 SpringBioscience E12380  Annexin VI  N/A Rabbit 1:50 SpringBioscience AC-0286RUO  Anterior Gradient 2 (AGR2)  EP329 Rabbit 1:100 - 1:200 Epitomics E3950  APAF-1/Apoptosis Protease Activating Factor 1  N/A Rabbit 1:200 SpringBioscience E4080  APC/Adenomatous Polyposis Coli  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience E2650  APP/Amyloid Precursor Protein  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience 380R  Arginase-1  SP156 Rabbit 1:25-1:100 Cell Marque  Corporation 380R  Arginase-1  EP261 Rabbit 1:50-1:200 Cell Marque  Corporation M4560  Arginase-1  SP156 Rabbit 1:100 SpringBioscience E19280  Arginase-1  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience M5240  ATM  SP224 Rabbit 1:100 SpringBioscience M5010  Aurora Kinase A/B/C  SP201 Rabbit 1:100 SpringBioscience M5060  B7-h4/CD276  SP206 Rabbit 1:100 SpringBioscience M5650  B7-h4/CD276  SP265 Rabbit 1:100 SpringBioscience E3320  Bak  N/A Rabbit 1:300 SpringBioscience M3470  Bax  SP47 Rabbit 1:50 SpringBioscience E17990  Bax  N/A Rabbit 1:200 SpringBioscience M4530  BCL-10  SP153 Rabbit 1:100 SpringBioscience E19030  Bcl-10 (Internal Region)  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience E19240  Bcl-10 (N-Terminus)  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience M3660  Bcl-2 alpha  SP66 Rabbit 1:100 SpringBioscience 227R  BCL6  EP278 Rabbit 1:100-1:500 Cell Marque  Corporation M4550  Bcl-6  SP155 Rabbit 1:100 SpringBioscience AC-0098RUO  Bcl-x  EP94 Rabbit 1:100 - 1:200 Epitomics E3370  Bcl-X  N/A Rabbit 1:200 SpringBioscience E16660  Bcl-XL  7D9 Mouse 1:400 SpringBioscience E4200  Bcl-XL  N/A Rabbit 1:50 SpringBioscience AC-0276RUO  Beclin-1  EP304 Rabbit 1:100-1:200 Epitomics E2260  Beta-Catenin/Catenin-Beta  N/A Rabbit 1:250 SpringBioscience E4360  Bim/BOD  N/A Rabbit 1:25 SpringBioscience AC-0168RUO  BMI-1/PCGF4/RNF51  EP199 Rabbit 1:100-1:200 Epitomics E16840  Bnip3L  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience 294R  BOB.1  SP92 Rabbit 1:100-1:500 Cell Marque  Corporation M3920  BOB-1/B-Cell Specific Octamer Binding Protein-1  SP92 Rabbit  1:100 SpringBioscience E19300  BRAF  pBR1 Rat 1:100 SpringBioscience E19290  BRAF V600E  VE1 Mouse 1:50 SpringBioscience E19290-1  BRAF V600E  VE1 Mouse 1:50 SpringBioscience M5040  C4.4A  SP204 Rabbit 1:100 SpringBioscience M5080  C4.4A  SP208 Rabbit 1:100 SpringBioscience M5500  C4.4A/LYPD3  SP250 Rabbit 1:100 SpringBioscience 404R  C4d  SP91 Rabbit 1:50-1:200 Cell Marque  Corporation AC-0137RUO  CA-9/Carbonic Anhydrase 9  EP161 Rabbit 1:100-1:200 Epitomics M4060  CA-9/Carbonic Anhydrase 9  SP106 Rabbit 1:100 SpringBioscience E18420  CA-9/Carbonic Anhydrase 9  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience E4000  c-Abl  N/A Rabbit 1:50 SpringBioscience E2360  Cadherin (pan)  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience 378R  Cadherin-17  SP183 Rabbit 1:25-1:100 Cell Marque  Corporation M4830  Cadherin-17  SP183 Rabbit 1:100 SpringBioscience AC-0207RUO  Cadherin-6  EP217 Rabbit 1:100-1:200 Epitomics E8640  Cadherin-E/E-Cadherin  SPM471 Mouse 1:100 SpringBioscience M3640  Cadherin-E/E-Cadherin  SP64 Rabbit 1:100 SpringBioscience M3900  Cadherin-N/N-Cadherin  SP90 Rabbit  1:100 SpringBioscience E10340  Calbindin D28  N/A Rabbit 1:400 SpringBioscience 229R  Calcitonin  SP17 Rabbit 1:100-1:500 Cell Marque  Corporation M3170  Calcitonin  SP17 Rabbit 1:100 SpringBioscience E1150  Calcitonin  N/A Rabbit 1:300 SpringBioscience M5260  Caldesmon-Pan  SP226 Rabbit 1:100 SpringBioscience M3810  Calpain  SP81 Rabbit 1:100 SpringBioscience E18780  Calpain  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience M3820  Calpastatin  SP82 Rabbit 1:100 SpringBioscience E18790  Calpastatin  N/A Rabbit  1:200 SpringBioscience M4800  Calponin-1  SP180 Rabbit 1:100 SpringBioscience M4810  Calponin-1  SP181 Rabbit 1:100 SpringBioscience M4930  Calponin-1  SP193 Rabbit 1:100 SpringBioscience 232R  Calretinin  SP13 Rabbit 1:25-1:100 Cell Marque  Corporation M3130  Calretinin  SP13 Rabbit 1:100 SpringBioscience E1170  Calretinin  N/A Rabbit 1:200 SpringBioscience E10600  CaM Kinase IV  N/A Rabbit 1:50 SpringBioscience E13850  CaM Kinase Kinase alpha  N/A Rabbit 1:50 SpringBioscience E10810  CAS  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience E3910  Caspase 1  N/A Rabbit 1:50 SpringBioscience E10850  Caspase 10  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience E2280  Caspase 8  N/A Rabbit 1:50 SpringBioscience M5840  Caspase-7  SP284 Rabbit 1:100 SpringBioscience E10620  CaSR/Calcium Sensing Receptor  N/A Rabbit 1:50 SpringBioscience E3680  Catenin-gamma/gamma-Catenin  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience AC-0090RUO  Cathepsin D  EP81 Rabbit 1:100-1:200 Epitomics E2820  Cathepsin D  N/A Rabbit 1:50 SpringBioscience 402M  Cathepsin K  3F9 Mouse 1:25-1:100 Cell Marque  Corporation M3430  Caveolin 1  SP43 Rabbit 1:50 SpringBioscience E17640  Caveolin 1 (C-terminus)  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience E10780  Caveolin 1 (N-terminus)  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience 412M  Caveolin-1  2297 Mouse 1:25-1:100 Cell Marque  Corporation E13840  CBP (CREB-Binding Protein) [aa 2422-2441]  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience E18460  CCR7/Chemokine receptor 7  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience M4790  CD10/CALLA  SP179 Rabbit 1:100 SpringBioscience M3670  CD10/CALLA  SP67 Rabbit 1:100 SpringBioscience 437R  CD103  EP206 Rabbit 1:25-1:100 Cell Marque  Corporation AC-0170RUO  CD103  EP206 Rabbit 1:100 - 1:200 Epitomics M6010  CD103  SP301 Rabbit 1:100 SpringBioscience E4230  CD105/Endoglin/TGF 1/3 Receptor  N/A Rabbit 1:50 SpringBioscience E1440  CD117/c-kit  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience AC-0043RUO  CD11b/Integrin alpha M/ITGAM/Mac-1  EP45 Rabbit 1:100 - 1:200 Epitomics 111M  CD11c  5D11 Mouse 1:20-1:80 Cell Marque  Corporation 111R  CD11c  EP157 Rabbit 1:100-1:500 Cell Marque  Corporation AC-0134RUO  CD11c/Integrin, alpha X/ITGAX  EP157 Rabbit 1:100-1:200 Epitomics 198M  CD123  6H6 Mouse 1:25-1:100 Cell Marque  Corporation 113R  CD13  SP187 Rabbit 1:25-1:100 Cell Marque  Corporation AC-0107RUO  CD13  EP117 Rabbit 1:100-1:200 Epitomics M4820  CD13  SP182 Rabbit 1:100 SpringBioscience M4870  CD13  SP187 Rabbit 1:100 SpringBioscience 138R  CD138  EP201 Rabbit 1:100-1:500 Cell Marque  Corporation M4520  CD138  SP152 Rabbit 1:100 SpringBioscience 114R  CD14  EPR3653 Rabbit 1:50-1:200 Cell Marque  Corporation M4920  CD14  SP192 Rabbit 1:100 SpringBioscience M4590  CD15  SP159 Rabbit 1:50 SpringBioscience 116R  CD16  SP175 Rabbit 1:25-1:100 Cell Marque  Corporation AC-0138RUO  CD163  EP152 Rabbit 1:100-1:200 Epitomics M3960  CD163  SP96 Rabbit 1:100 SpringBioscience E18680  CD163  N/A Rabbit  1:200 SpringBioscience E18740  CD168  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience M5130  CD169  SP213 Rabbit 1:100 SpringBioscience M5160  CD169  SP216 Rabbit 1:100 SpringBioscience M4750  CD16a  SP175 Rabbit 1:100 SpringBioscience M4890  CD16a  SP189 Rabbit 1:100 SpringBioscience M4100  CD19  SP110 Rabbit 1:200 SpringBioscience M5910  CD19  SP291 Rabbit 1:100 SpringBioscience E18960  CD19  N/A Rabbit  1:200 SpringBioscience 119R  CD19    EP169 Rabbit 1:50-1:200 Cell Marque  Corporation 101R  CD1a  EP3622 Rabbit 1:25 - 1:100 Cell Marque  Corporation M4570  CD1a  SP157 Rabbit 1:100 SpringBioscience E19270  CD1a  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience 102R  CD2  EP222 Rabbit 1:50-1:200 Cell Marque  Corporation M6040  CD2  SP304 Rabbit 1:100 SpringBioscience E3040  CD2  N/A Rabbit 1:50 SpringBioscience 120R  CD20  SP32 Rabbit 1:100-1:500 Cell Marque  Corporation M3320  CD20  SP32 Rabbit 1:100 SpringBioscience E2560  CD20  N/A Rabbit 1:300 SpringBioscience AC-0140RUO  CD205/Lymphocyte antigen 75/LY75  EP176 Rabbit 1:100-1:200 Epitomics M4860  CD21  SP186 Rabbit 1:100 SpringBioscience M4990  CD21  SP199 Rabbit 1:100 SpringBioscience M4040  CD22  SP104 Rabbit 1:100 SpringBioscience E19020  CD22  N/A Rabbit 1:200 SpringBioscience 123R  CD23  SP23 Rabbit 1:100-1:500 Cell Marque  Corporation 123R  CD23  EP75 Rabbit 1:100-1:500 Cell Marque  Corporation M4630  CD23  SP163 Rabbit 1:50 SpringBioscience E3020  CD23  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience M4760  CD25  SP176 Rabbit 1:200 SpringBioscience M3980  CD278/ICOS  SP98 Rabbit 1:100 SpringBioscience E18650  CD278/ICOS  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience M4620  CD3  SP162 Rabbit 1:150 SpringBioscience E1250  CD3  N/A Rabbit 1:200 SpringBioscience E3050  CD3 zeta  N/A Rabbit 1:200 SpringBioscience M4640  CD31  SP164 Rabbit 1:50 SpringBioscience E11110  CD31  N/A Rabbit 1:50 SpringBioscience 131R  CD31    EP78 Rabbit 1:100-1:500 Cell Marque  Corporation 133M  CD33  PWS44 Mouse 1:20-1:80 Cell Marque  Corporation M5660  CD33  SP266 Rabbit 1:400 SpringBioscience 134R  CD34  EP88 Rabbit 1:50-1:200 Cell Marque  Corporation E1280  CD34/Endothelial cell marker  QBEnd/10 Mouse 1:200 SpringBioscience M4910  CD35  SP191 Rabbit 1:100 SpringBioscience M4970  CD35  SP197 Rabbit 1:100 SpringBioscience 118R  CD38  SP149 Rabbit 1:100-1:500 Cell Marque  Corporation M4490  CD38  SP149 Rabbit 1:100 SpringBioscience E19170  CD38 (C-Terminus)  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience 104R  CD4  SP35 Rabbit 1:25 - 1:100 Cell Marque  Corporation E17680  CD4 (internal domain)  N/A Rabbit 1:50 SpringBioscience E3700  CD40  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience AC-0174RUO  CD41/Integrin alpha 2b  EP178 Rabbit 1:100-1:200 Epitomics M5020  CD42b  SP202 Rabbit 1:100 SpringBioscience M5190  CD42b  SP219 Rabbit 1:100 SpringBioscience 143R  CD43  SP55 Rabbit 1:100-1:500 Cell Marque  Corporation E17950  CD43  N/A Rabbit 1:200 SpringBioscience E17360  CD44  SPM521 Mouse 1:50 SpringBioscience M3370  CD44  SP37 Rabbit 1:100 SpringBioscience E17370  CD44  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience E16480  CD45RA  SPM504 Mouse 1:200 SpringBioscience E12430  CD45RB/T200/LCA  SPM496 Mouse 1:100 SpringBioscience M5790  CD47  SP279 Rabbit 1:100 SpringBioscience AC-0142RUO  CD48  EP148 Rabbit 1:100-1:200 Epitomics 205R  CD5  SP19 Rabbit 1:100 - 1:500 Cell Marque  Corporation M3190  CD5  SP19 Rabbit 1:50 SpringBioscience E2470  CD5  N/A Rabbit 1:200 SpringBioscience 156R  CD56  MRQ-42 Rabbit 1:100-1:500 Cell Marque  Corporation E11100  CD56  123C3 Mouse 1:50 SpringBioscience E17510  CD63  SPM524 Mouse 1:200 SpringBioscience AC-0177RUO  CD63/MAA/Melanoma Associated Antigen  EP211 Rabbit 1:100-1:200 Epitomics M5510  CD68  SP251 Rabbit 1:100 SpringBioscience E19160  CD68 (C-Terminus)  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience E19190  CD68 (Internal Region)  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience 107R  CD7  EP132 Rabbit 1:100-1:500 Cell Marque  Corporation M3940  CD7  SP94 Rabbit 1:50 SpringBioscience E18930  CD7  N/A Rabbit  1:200 SpringBioscience 171M  CD71  MRQ-48 Mouse 1:100-1:500 Cell Marque  Corporation 174R  CD74  EP167 Rabbit 1:50-1:200 Cell Marque  Corporation E17420  CD74  SPM523 Mouse 1:100 SpringBioscience 179R  CD79a  SP18 Rabbit 1:200-1:1000 Cell Marque  Corporation 179R  CD79a  EP82 Rabbit 1:100-1:500 Cell Marque  Corporation E2490  CD79a  N/A Rabbit 1:200 SpringBioscience M5400  CD79b  SP240 Rabbit 1:100 SpringBioscience 108R  CD8  SP16 Rabbit 1:100-1:500 Cell Marque  Corporation M3160  CD8  SP16 Rabbit 1:100 SpringBioscience M5390  CD8  SP239 Rabbit 1:100 SpringBioscience E2480  CD8  N/A Rabbit 1:200 SpringBioscience AC-0144RUO  CD82  EP160 Rabbit 1:100-1:200 Epitomics E2500  CD95 (Fas)  N/A Rabbit 1:160 SpringBioscience AC-0178RUO  CD95/APO-1/FasR  EP208 Rabbit 1:100-1:200 Epitomics M4190  CD99  SP119 Rabbit 1:200 SpringBioscience E4150  CDC2 p34  N/A Rabbit 1:200 SpringBioscience E18830  Cdh2  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience M3800  CDK2/Cyclin-dependent kinase 2  SP80 Rabbit 1:50 SpringBioscience E18540  CDK2/Cyclin-dependent kinase 2  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience AC-0179RUO  Cdk4  EP180 Rabbit 1:100-1:200 Epitomics M3540  CDX2  SP54 Rabbit 1:100 SpringBioscience E2970  CEA/Carcino Embryonic Antigen/CD66e  N/A Rabbit 1:200 SpringBioscience E18480  c-erbB-2 (Paired1248)  N/A Rabbit  1:50 SpringBioscience M4010  c-erbB-2/HER-2  SP101 Rabbit 1:100 SpringBioscience E2440  c-erbB-2/HER-2  N/A Rabbit 1:300 SpringBioscience E18470  c-erbB-2/Phospho Y1248  N/A Rabbit  1:50 SpringBioscience M3710  c-erbB-3/HER-3  SP71 Rabbit 1:100 SpringBioscience E18580  c-erbB-3/HER-3  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience E2760  c-erbB-4/HER-4  N/A Rabbit 1:50 SpringBioscience E4460  c-fos  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience E4510  Cholecystokinin (CCK-8)  N/A Rabbit 1:200 SpringBioscience M3120  Chromogranin A  SP12 Rabbit 1:200 SpringBioscience E1520  Chromogranin A  N/A Rabbit 1:500 SpringBioscience 424M  CITED1  5H6 Mouse 1:25-1:100 Cell Marque  Corporation M4280  Claudin 1  SP128 Rabbit 1:200 SpringBioscience E3410  Claudin 1  N/A Rabbit 1:200 SpringBioscience E10240  Claudin 10  N/A Rabbit 1:50 SpringBioscience E8770  Claudin 11/OSP  N/A Rabbit 1:400 SpringBioscience E3830  Claudin 3  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience E3980  Claudin 4  N/A Rabbit 1:200 SpringBioscience E3750  Claudin 5  N/A Rabbit 1:50 SpringBioscience 418M  Claudin 7  5D10F3 Mouse 1-25:1:100 Cell Marque  Corporation E10590  Claudin 7  N/A Rabbit 1:200 SpringBioscience AC-0289RUO  Claudin 8   EP305 Rabbit 1:20 Epitomics M5760  Cleaved PARP-1 (Asp214)  SP276 Rabbit 1:100 SpringBioscience M5270  Cleaved PTEN (D301)  SP227 Rabbit 1:100 SpringBioscience AC-0180RUO  Clusterin/Apolipoprotein J   EP181 Rabbit 1:100-1:200 Epitomics M3440  c-Met  SP44 Rabbit 1:50 SpringBioscience E10610  c-Met  N/A Rabbit 1:50 SpringBioscience M3590  c-Met (Paired 1003)  SP59 Rabbit 1:100 SpringBioscience E18110  c-Met (Paired1003)  N/A Rabbit 1:50 SpringBioscience 213M  CMV/Cytomegalovirus  8B1.2,1G5.2&2D4.2 Mouse по запросу Cell Marque  Corporation 213M  CMV/Cytomegalovirus  DDG9/CCh3 Mouse по запросу Cell Marque  Corporation 395R  c-Myc  EP121 Rabbit 1:25-1:100 Cell Marque  Corporation M4960  Coagulation Factor XIIIa  SP196 Rabbit 1:100 SpringBioscience AC-0223RUO  COL1A1   EP236 Rabbit 1:100-1:200 Epitomics M3910  Complement component C4d  SP91 Rabbit  1:100 SpringBioscience E17340  Complement component C4d  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience E2740  Connexin 43  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience E14310  COX1  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience M3210  COX2  SP21 Rabbit 1:100 SpringBioscience E3030  COX2  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience E10250  CRF/Corticotropin Releasing Factor  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience E18430  Cripto-1  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience M5110  CSF-1R  SP211 Rabbit 1:100 SpringBioscience M3830  c-TEN  SP83 Rabbit 1:100 SpringBioscience E18190  c-TEN  N/A Rabbit 1:50 SpringBioscience E3790  Cullin-1/CUL-1  N/A Rabbit 1:50 SpringBioscience E4160  Cullin-2/CUL-2  N/A Rabbit 1:200 SpringBioscience E18440  CXCR4  N/A Rabbit 1:50 SpringBioscience E4100  Cyclin B1  N/A Rabbit 1:200 SpringBioscience 241R  Cyclin D1  SP4 Rabbit 1:100 - 1:500 Cell Marque  Corporation E1540  Cyclin D1  N/A Rabbit 1:200 SpringBioscience M5070  Cyclin D3  SP207 Rabbit 1:100 SpringBioscience E3600  Cyclin E  N/A Rabbit 1:50 SpringBioscience AC-0120RUO  Cyclin E1   EP126 Rabbit 1:100-1:200 Epitomics M4460  Cyclin E1  SP146 Rabbit 1:100 SpringBioscience E18300  Cyr61  N/A Rabbit 1:50 SpringBioscience 452M  Cytokeratin  CAM 5.2 Mouse 1:25-1:100 Cell Marque  Corporation 410R  Cytokeratin 10  EP97 Rabbit 1:25-1:100 Cell Marque  Corporation 314R  Cytokeratin 14  SP53 Rabbit 1:100 - 1:500 Cell Marque  Corporation 317R  Cytokeratin 17  EP98 Rabbit 1:50-1:200 Cell Marque  Corporation E2430  D4-GDI  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience E12580  D5DR  N/A Rabbit 1:50 SpringBioscience E16860  DAPK2  N/A Rabbit 1:50 SpringBioscience 243R  Desmin  EP15 Rabbit 1:100-1:500 Cell Marque  Corporation AC-0019RUO  Desmin   EP15 Rabbit 1:100-1:200 Epitomics M4380  Desmin  SP138 Rabbit 1:100 SpringBioscience E3900  DFF-45  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience E18220  DHFR  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience E8760  DJ-1  N/A Rabbit 1:50 SpringBioscience AC-0231RUO  DNMT1   EP269 Rabbit 1:100-1:200 Epitomics E16710  DOG-1  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience E16830  DOK1  N/A Rabbit 1:50 SpringBioscience E16730  DOK2  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience E16750  DRAK2  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience E2670  Dysferlin  N/A Rabbit 1:50 SpringBioscience E14010  Dystrophin  SPM499 Mouse 1:50 SpringBioscience E2660  Dystrophin  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience AC-0225RUO  E2F4   EP252 Rabbit 1:100-1:200 Epitomics E19130  EGFL7  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience 414R  EGFR  EP22 Rabbit 1:50-1:200 Cell Marque  Corporation 414R  EGFR  SP84 Rabbit 1:25-1:100 Cell Marque  Corporation AC-0016RUO  EGFR Phospho (pY1068)   EP11 Rabbit 1:100-1:200 Epitomics M3840  EGFR/Epidermal Growth Factor Receptor  SP84 Rabbit 1:100 SpringBioscience E18170  EGFR/Epidermal Growth Factor Receptor  N/A Rabbit 1:50 SpringBioscience AC-0262RUO  eIF-4E   EP280 Rabbit 1:100-1:200 Epitomics E4110  eNOS/Endothelial Nitric Oxide Synthase/NOS-3  N/A Rabbit 1:70 SpringBioscience E11170  Ep-CAM/ESA/Epithelial Specific Antigen  SPM491 Mouse 1:100 SpringBioscience E19310  EpCAM-ICD  4A7 Mouse 1:100 SpringBioscience M4690  EphA2  SP169 Rabbit 1:100 SpringBioscience M4110  Epidermal Growth Factor Receptor (EGFR) (E746-A750del)   SP111 Rabbit 1:100 SpringBioscience M4250  Epidermal Growth Factor Receptor (EGFR) (L858R)  SP125 Rabbit 1:100 SpringBioscience E10320  ERAB  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience AC-0206RUO  ERCC1   EP219 Rabbit 1:100-1:200 Epitomics M3680  ERCC1/Excision Repair Cross Complementing  SP68 Rabbit 1:100 SpringBioscience E18890  ERCC1/Excision Repair Cross Complementing  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience 434R  ERG  EP111 Rabbit 1:100-1:200 Cell Marque  Corporation E3560  ERK1  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience E3970  ERK2  N/A Rabbit 1:200 SpringBioscience 249R  Estrogen Receptor  SP1 Rabbit по запросу Cell Marque  Corporation E1640  Estrogen Receptor  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience 415M  EZh3  11 Mouse 1:25-1:100 Cell Marque  Corporation M4290  EZh3  SP129 Rabbit 1:100 SpringBioscience E19090  EZh3  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience M4150  F4/80  SP115 Rabbit 1:100 SpringBioscience E18970  F4/80  N/A Rabbit  1:100 SpringBioscience E2710  Fas Ligand  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience M5370  FBXW7  SP237 Rabbit 1:100 SpringBioscience E10580  FGFR-1  N/A Rabbit 1:50 SpringBioscience M5730  FGFR2  SP273 Rabbit 1:100 SpringBioscience E10570  FGFR-2  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience E10230  FGFR-3  N/A Rabbit 1:25 SpringBioscience E3640  FHIT/Fragile Histidine Triad  N/A Rabbit 1:200 SpringBioscience E4280  Fli-1  N/A Rabbit 1:50 SpringBioscience M4230  FLK1 (mouse)  SP123 Rabbit 1:100 SpringBioscience E3710  FLK1/VEGFR2  N/A Rabbit 1:50 SpringBioscience E2800  FLT1/VEGFR1  N/A Rabbit 1:50 SpringBioscience E3870  FLT4/VEGFR3  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience E19080  Fn14 N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience M4340  Fn14   SP134 Rabbit 1:100 SpringBioscience 405M  FOXA1  2F83 Mouse 1:25-1:100 Cell Marque  Corporation AC-0246RUO  FOXA1   EP277 Rabbit 1:100-1:200 Epitomics M3880  FOXA1  SP88 Rabbit 1:100 SpringBioscience E18850  FOXA1  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience AC-0264RUO  FOXO1   EP290 Rabbit 1:100-1:200 Epitomics E17820  FOXO1A  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience E17730  FOXO3A  N/A Rabbit 1:50 SpringBioscience 350R  FoxP1  SP133 Rabbit 1:100-1:500 Cell Marque  Corporation 350R  FoxP1  EP137 Rabbit 1:100-1:500 Cell Marque  Corporation AC-0129RUO  FOXP1   EP137 Rabbit 1:100-1:200 Epitomics M4330  FOXP1  SP133 Rabbit 1:100 SpringBioscience E19060  FOXP1  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience AC-0304RUO  FOXP3   EP340 Rabbit 1:100 - 1:200 Epitomics M3970  FoxP3  SP97 Rabbit 1:100 SpringBioscience E18490  FoxP3  N/A Rabbit 1:200 SpringBioscience E16390  FOXP4  N/A Rabbit 1:50 SpringBioscience E18340  FPGS/Folylpoly-gamma-glutamate synthetase  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience E4210  Fra2  N/A Rabbit 1:50 SpringBioscience 207R  FSH  EP257 Rabbit 1:100-1:500 Cell Marque  Corporation E3310  GAD65/Glutamic Acid Decarboxylase 65  N/A Rabbit 1:50 SpringBioscience E10260  GAD67/Glutamic Acid Decarboxylase 67  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience E10980  GADD153  N/A Rabbit 1:50 SpringBioscience M5470  Galectin-1  SP247 Rabbit 1:100 SpringBioscience E14080  GANP  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience E4490  Gastrin 1  N/A Rabbit 1:200 SpringBioscience 417M  GATA1  4F5 Mouse 1:25-1:100 Cell Marque  Corporation 390M  GATA-3  L50-823 Mouse 1:100-1:500 Cell Marque  Corporation M4850  GCDFP-15  SP185 Rabbit 1:100 SpringBioscience 906H  GCDFP-15 & Mammaglobin Cocktail  23A3+(304-1A5+31A5) Rabbit готовые к применению Cell Marque  Corporation E16740  GCS/Gamma Glutamylcysteine Synthetase  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience E16510  GFAP/Glial Fibrillary Acidic Protein  SPM507 Mouse 1:200 SpringBioscience M3780  GFAP/Glial Fibrillary Acidic Protein  SP78 Rabbit 1:100 SpringBioscience E18320  GFAP/Glial Fibrillary Acidic Protein  N/A Rabbit 1:200 SpringBioscience 208R  GH  EP267 Rabbit 1:100-1:500 Cell Marque  Corporation 259R  Glucagon  EP74 Rabbit 1:100-1:200 Cell Marque  Corporation E18180  Glucagon  N/A Rabbit 1:50 SpringBioscience E3060  GluR1  N/A Rabbit 1:50 SpringBioscience E3000  GluR2/3  N/A Rabbit 1:50 SpringBioscience E2930  GluR6/7  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience E13810  GLUT-1  SPM498 Mouse 1:200 SpringBioscience M4680  GLUT-1  SP168 Rabbit 1:200 SpringBioscience E2840  GLUT-1  N/A Rabbit 1:200 SpringBioscience 413A  GLUT3  N/A Rabbit 1:25-1:100 Cell Marque  Corporation E3270  GLUT-3  N/A Rabbit 1:50 SpringBioscience 389M  Glutamine Synthetase  GS-6 Mouse 1:25-1:100 Cell Marque  Corporation M3860  Glypican-3  SP86 Rabbit 1:100 SpringBioscience E18870  Glypican-3  N/A Rabbit  1:50 SpringBioscience E17940  GNB2  N/A Rabbit 1:50 SpringBioscience M5990  GPNMB  SP299 Rabbit 1:100 SpringBioscience 262R  Granzyme B  EP230 Rabbit 1:100-1:500 Cell Marque  Corporation E2580  Granzyme B  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience AC-0279RUO  GRB7   EP308 Rabbit  1:100 - 1:200 Epitomics E12490  GRP75  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience E12570  GRP78  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience E13860  GRP94  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience E18690  GRSF-1 N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience E2910  GSK-3  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience E10270  Guanylyl Cyclase beta  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience 216A  HBcAg/Hepatitis B Virus Core Antigen  N/A Rabbit по запросу Cell Marque  Corporation 217M  HBsAg/Hepatitis B Virus Surface Antigen  S1-210 Mouse по запросу Cell Marque  Corporation E3550  HDAC1  N/A Rabbit 1:200 SpringBioscience E10640  HDAC2  N/A Rabbit 1:50 SpringBioscience 398M  Heat Shock Protein 27  G3.1 Mouse 1:25-1:100 Cell Marque  Corporation E18380  Helicobacter Pylori  SPM526 Mouse 1:100 SpringBioscience E3010  Helicobacter Pylori  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience M5120  Hemoglobin Alpha Chain  SP212 Rabbit 1:100 SpringBioscience M4200  hENT1  SP120 Rabbit 1:100 SpringBioscience 264R  Hepatocyte Specific Antigen (Hep-Par1)  EP265 Rabbit 1:50-1:200 Cell Marque  Corporation AC-0146RUO  HER2 / ErbB2 Phospho (pY877)   EP123 Rabbit 1:100-1:200 Epitomics 237R  Her2/Neu  EP3 Rabbit по запросу Cell Marque  Corporation 237R  Her-2/Neu  SP3 Rabbit по запросу Cell Marque  Corporation E19260  HER-3  SPM738 Mouse 1:100 SpringBioscience 361M  Herpes Simplex Virus I  10A3 Mouse по запросу Cell Marque  Corporation 375M  HGAL  MRQ-49 Mouse 1:100 - 1:500 Cell Marque  Corporation E17470  hGH  N/A Rabbit 1:200 SpringBioscience AC-0108RUO  HIF-1 alpha  EP118 Rabbit 1:100-1:200 Epitomics M5280  HLA-DP alpha1  SP228 Rabbit 1:100 SpringBioscience M5290  HLA-DP beta1  SP229 Rabbit 1:100 SpringBioscience AC-0088RUO  HLA-Dra (DR alpha chain)   EP96 Rabbit 1:100-1:200 Epitomics AC-0183RUO  HLA-DRB1   EP191 Rabbit 1:100-1:200 Epitomics E16330  HMGA2  N/A Rabbit 1:50 SpringBioscience E2980  hPL/Human Placental Lactogen  N/A Rabbit 1:250 SpringBioscience E12450  HSP60/Heat Shock Protein 60  N/A Rabbit 1:200 SpringBioscience E12330  HSP70/Heat Shock Protein 70  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience E16410  Id2  N/A Rabbit 1:50 SpringBioscience E14050  Id3  N/A Rabbit 1:50 SpringBioscience M5820  IDO1  SP282 Rabbit 1:100 SpringBioscience M5600  IDO-1  SP260 Rabbit 1:400 SpringBioscience M5770  IDO-1  SP277 Rabbit 1:100 SpringBioscience 267R  IgA  EP170 Rabbit 1:100-1:500 Cell Marque  Corporation 268R  IgD  EP173 Rabbit 1:25-1:100 Cell Marque  Corporation 367M  IgG4  MRQ-44 Mouse 1:100 - 1:500 Cell Marque  Corporation 367R  IgG4  EP138 Rabbit 1:100-1:500 Cell Marque  Corporation M4080  IKAROS  SP108 Rabbit 1:100 SpringBioscience E19000  IKAROS  N/A Rabbit 1:200 SpringBioscience 433R  IMP3  EP286 Rabbit 1:25-1:100 Cell Marque  Corporation E17390  Inhibin alpha  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience M4260  iNOS/Inducible Nitric Oxide Synthase/NOS-2  SP126 Rabbit 1:100 SpringBioscience E3740  iNOS/Inducible Nitric Oxide Synthase/NOS-2  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience AC-0306RUO  INPP4B   EP328 Rabbit 1:100 - 1:200 Epitomics E2860  Integrin beta 5  N/A Rabbit 1:50 SpringBioscience E10630  Involucrin  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience E16580  IPO-38 (Proliferation Marker)  SPM515 Mouse 1:50 SpringBioscience E12590  IRS-1  N/A Rabbit 1:50 SpringBioscience 431R  Islet-1  EP283 Rabbit 1:25-1:100 Cell Marque  Corporation E10280  JAB1  N/A Rabbit 1:200 SpringBioscience M4050  J-chain  SP105 Rabbit 1:100 SpringBioscience E19010  J-chain  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience E14000  JM4  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience 274R  Kappa  EP171 Rabbit 1:100-1:500 Cell Marque  Corporation M4480  Kappa Light Chain  SP148 Rabbit 1:100 SpringBioscience M3990  Keratin 10  SP99 Rabbit 1:100 SpringBioscience E18980  Keratin 10  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience M3530  Keratin 14  SP53 Rabbit 1:100 SpringBioscience E2620  Keratin 14  N/A Rabbit 1:200 SpringBioscience M3950  Keratin 17  SP95 Rabbit  1:100 SpringBioscience E18920  Keratin 17  N/A Rabbit  1:200 SpringBioscience M3690  Keratin 18  SP69 Rabbit  1:200 SpringBioscience E18330  Keratin 18  N/A Rabbit 1:200 SpringBioscience E2630  Keratin 19  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience E16440  Keratin 20  N/A Rabbit 1:200 SpringBioscience M5100  Keratin 4  SP210 Rabbit 1:100 SpringBioscience M3270  Keratin 5  SP27 Rabbit 1:100 SpringBioscience M4780  Keratin 5  SP178 Rabbit 1:100 SpringBioscience E13820  Keratin 5  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience M3870  Keratin 6  SP87 Rabbit 1:200 SpringBioscience E18880  Keratin 6  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience E18000  Keratin 7  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience M4020  Keratin 8  SP102 Rabbit 1:100 SpringBioscience E1870  Ki-67  N/A Rabbit 1:300 SpringBioscience AC-0280RUO  KIM-1 (HAVcr-1)   EP309 Rabbit 1:100 - 1:200 Epitomics E18310  KOC/L523S  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience M4300  Ku80  SP130 Rabbit 1:100 SpringBioscience E19110  Ku80 (C-terminus)  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience E19120  Ku80 (internal domain)  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience 277R  Lambda  EP172 Rabbit 1:100-1:500 Cell Marque  Corporation M4470  Lambda Light Chain  SP147 Rabbit 1:100 SpringBioscience E19200  Lambda Light Chain (B-Cell Marker)  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience E13490  Lamin B  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience 392M  Langerin  12D6 Mouse 1:25 - 1:100 Cell Marque  Corporation 442R  LEF1  EP310 Rabbit 1:25-1:100 Cell Marque  Corporation E17380  Lewis A  SPM522 Mouse 1:200 SpringBioscience M4320  LH/Luteinizing Hormone  SP132 Rabbit 1:100 SpringBioscience E17480  LH/Luteinizing Hormone  N/A Rabbit 1:500 SpringBioscience AC-0095RUO  LI-Cadherin   EP86 Rabbit 1:100-1:200 Epitomics E18700  LIMD1 N/A Rabbit 1:50 SpringBioscience E18810  Lipocalin 2  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience M6000  LIV-1  SP300 Rabbit 1:100 SpringBioscience 370R  LMO2  SP51 Rabbit 1:500 - 1:2000 Cell Marque  Corporation E17650  LMO2  1A9-3D11 Mouse 1:100 SpringBioscience M3510  LMO2  SP51 Rabbit 1:100 SpringBioscience E17830  LMO2  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience AC-0152RUO  LSP1   EP164 Rabbit 1:100-1:200 Epitomics 278R  Lysozyme  EP134 Rabbit 1:100-1:500 Cell Marque  Corporation E4500  MAGE-1  N/A Rabbit 1:200 SpringBioscience M4880  MAGE-A1  SP188 Rabbit 1:100 SpringBioscience M4940  MAGE-A1  SP194 Rabbit 1:100 SpringBioscience E18900  MALT1  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience 280R  Mammaglobin  31A5 Rabbit 1:100 - 1:500 Cell Marque  Corporation 280C  Mammaglobin Cocktail  304-1A5/31A5 Rabbit по запросу Cell Marque  Corporation M4770  MAP4K4   SP177 Rabbit 1:100 SpringBioscience E2640  Mcl-1  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience AC-0039RUO  MCM2   EP40 Rabbit 1:100-1:200 Epitomics M3850  MCM2  SP85 Rabbit 1:100 SpringBioscience E12480  MCM2  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience E18730  MCM2  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience 435R  MCM3  EP202 Rabbit 1:25-1:100 Cell Marque  Corporation AC-0094RUO  MCM5   EP84 Rabbit 1:100-1:200 Epitomics E13830  MCM5  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience E18670  MDGI (near N-terminus)  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience E18620  MDGI (N-terminus)  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience E12390  MEF2  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience E4450  Melanoma (gp100)  N/A Rabbit 1:50 SpringBioscience 439R  Mesothelin  EP140 Rabbit 1:25-1:100 Cell Marque  Corporation M3740  Mesothelin  SP74 Rabbit 1:100 SpringBioscience E18390  Mesothelin  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience E2890  mGluR1  N/A Rabbit 1:50 SpringBioscience E2870  mGluR5  N/A Rabbit 1:50 SpringBioscience AC-0307RUO  MGMT  EP337 Rabbit 1:20 Epitomics E12680  MIP-1 alpha  N/A Rabbit 1:50 SpringBioscience E17810  MLh2  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience E3570  MMP-1/Matrix Metalloproteinase 1  N/A Rabbit 1:200 SpringBioscience E3860  MMP-14/MT1-MMP/Matrix Metalloproteinase 14  N/A Rabbit 1:30 SpringBioscience E4120  MMP-15/MT2-MMP/Matrix Metalloproteinase 15  N/A Rabbit 1:50 SpringBioscience E4030  MMP-19/Matrix Metalloproteinase 19  N/A Rabbit 1:25 SpringBioscience E18010  MMP-2 (72kDa Collagenase IV)  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience E4040  MMP-23/Matrix Metalloproteinase 23  N/A Rabbit 1:50 SpringBioscience E3660  MMP-9 (92kDa Collagenase IV)  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience AC-0122RUO  MMP-9/Matrix Metalloproteinase 9   EP127 Rabbit 1:100-1:200 Epitomics 289R  MPO/Myeloperoxidase  SP72 Rabbit 1:25-1:100 Cell Marque  Corporation M3720  MPO/Myeloperoxidase  SP72 Rabbit 1:100 SpringBioscience E17710  MPO/Myeloperoxidase  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience AC-0295RUO  MRE11   EP318 Rabbit 1:100 - 1:200 Epitomics AC-0097RUO  MRP8 / S100A8   EP90 Rabbit 1:100-1:200 Epitomics M3460  MSh3  SP46 Rabbit 1:50 SpringBioscience E17790  MSh3  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience E18940  MSh4  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience 287R  MSH6  SP93 Rabbit 1:50-1:200 Cell Marque  Corporation E18370  MSH6  SPM525 Mouse 1:100 SpringBioscience M3930  MSH6  SP93 Rabbit  1:100 SpringBioscience E17670  MSH6  N/A Rabbit 1:50 SpringBioscience AC-0198RUO  MSMB (PSP94)   EP203 Rabbit 1:100-1:200 Epitomics E18590  mTOR (C-terminus)  N/A Rabbit 1:50 SpringBioscience 290R  MUC-1  EP85 Rabbit 1:100-1:500 Cell Marque  Corporation E11200  MUC-1 Underglycosylated  SPM493 Mouse 1:50 SpringBioscience E11190  MUC-1/EMA/Epithelial Membrane Antigen  SPM492 Mouse 1:150 SpringBioscience E3540  MUC-1/EMA/Epithelial Membrane Antigen  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience AC-0188RUO  MUC-2   EP187 Rabbit 1:100-1:200 Epitomics E16560  MUC-2/Mucin 2  SPM512 Mouse 1:200 SpringBioscience 406M  MUC4  8G7 Mouse 1:10-1:50 Cell Marque  Corporation AC-0235A  MUC4   EP256 Rabbit 1:20 Epitomics M5410  MUC-4  SP241 Rabbit 1:100 SpringBioscience E11080  MUC-5AC/Mucin 5AC  45M1 Mouse 1:100 SpringBioscience 358R  MUM1  MRQ-43 Rabbit 1:100 - 1:500 Cell Marque  Corporation 358R  MUM1  EP190 Rabbit 1:100-1:500 Cell Marque  Corporation M4140  MUM1/IRF4  SP114 Rabbit 1:100 SpringBioscience 289R  Myeloperoxidase  SP72 Rabbit 1:25-1:100 Cell Marque  Corporation 386R  MyoD1  EP212 Rabbit 1:25-1:100 Cell Marque  Corporation 296R  Myogenin  EP162 Rabbit 1:25-1:100 Cell Marque  Corporation E2990  Myoglobin  N/A Rabbit 1:200 SpringBioscience AC-0155RUO  Myosin Heavy Chain 11   EP166 Rabbit 1:100-1:200 Epitomics AC-0099RUO  Myosin Light Chain 2   EP99 Rabbit 1:100-1:200 Epitomics 298R  Myosin, Smooth Muscle  EP166 Rabbit 1:100-1:500 Cell Marque  Corporation 443R  Nanog  EP225 Rabbit 1:50-1:200 Cell Marque  Corporation 352M  Napsin A  MRQ-60 Mouse 1:100-1:500 Cell Marque  Corporation 352R  Napsin A  EP205 Rabbit 1:100-1:500 Cell Marque  Corporation E11040  NCK2  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience AC-0199RUO  NDRG1   EP200 Rabbit 1:100-1:200 Epitomics E18160  Nephrin  N/A Rabbit 1:50 SpringBioscience 388M  Nestin  10C2 Mouse 1:25-1:100 Cell Marque  Corporation M4030  Nestin  SP103 Rabbit 1:100 SpringBioscience E18750  Nestin  N/A Rabbit  1:200 SpringBioscience E18610  Nestin  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience 302R  Neurofilament  EP79 Rabbit 1:100-1:500 Cell Marque  Corporation M5030  Neutrophil Elastase   SP203 Rabbit 1:100 SpringBioscience E3630  NFkB p50  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience E2750  NFkB p65  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience 441R  NKX3.1  EP353 Rabbit 1:50-1:200 Cell Marque  Corporation E14100  NKX3.1  N/A Rabbit 1:25 SpringBioscience AC-0254RUO  NM23   EP276 Rabbit 1:100-1:200 Epitomics E10860  Notch-1  N/A Rabbit 1:200 SpringBioscience M4740  N-Ras/Q61R  SP174 Rabbit 1:100 SpringBioscience E12500  Nrf2  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience M5360  Nucleophosmin (NPM)  SP236 Rabbit 1:100 SpringBioscience E17460  Occludin  N/A Rabbit 1:50 SpringBioscience E3840  Oct-1  N/A Rabbit 1:50 SpringBioscience AC-0111RUO  OCT-2   EP115 Rabbit 1:100-1:200 Epitomics 387M  Olig2  211F1.1 Mouse 1:25-1:100 Cell Marque  Corporation 387R  Olig2  EP112 Rabbit 1:50-1:200 Cell Marque  Corporation E3280  Osteopontin  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience AC-0102RUO  Osteopontin (SPP1)   EP106 Rabbit 1:100-1:200 Epitomics M4950  OX-40  SP195 Rabbit 1:100 SpringBioscience E17530  p120/Catenin delta 1  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience M5710  P14ARF  SP271 Rabbit 1:100 SpringBioscience E4350  p14ARF  N/A Rabbit 1:25 SpringBioscience E2600  p27Kip1  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience E14070  p300/CBP  N/A Rabbit 1:50 SpringBioscience 504R  P504s  13h5 Rabbit по запросу Cell Marque  Corporation 453R  p53  SP5 Rabbit 1:25-1:100 Cell Marque  Corporation E16570  p53  SPM514 Mouse 1:400 SpringBioscience M4610  p53  SP161 Rabbit 1:100 SpringBioscience E2010  p53  N/A Rabbit 1:50 SpringBioscience M4180  p57  SP118 Rabbit 1:100 SpringBioscience E18990  p57  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience E18640  p70S6k  N/A Rabbit  1:50 SpringBioscience E18510  p70S6k (Paired421/424)  N/A Rabbit  1:50 SpringBioscience AC-0309RUO  p84 (THOC1)   EP320 Rabbit 1:20 Epitomics E12550  PAK alpha  N/A Rabbit 1:50 SpringBioscience E3420  PAR-4/Prostate Apoptosis Response-4  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience E17890  Parathyroid Hormone Receptor 1  N/A Rabbit 1:50 SpringBioscience E3470  Parkin  N/A Rabbit 1:30 SpringBioscience E4220  PARP/Poly ADP-Ribose Polymerase  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience 396M  Parvalbumin  2E+11 Mouse 1:10-1:50 Cell Marque  Corporation 396R  Parvalbumin  EP300 Rabbit 1:25-1:100 Cell Marque  Corporation 311R  PAX-2  EP235 Rabbit 1:10-1:50 Cell Marque  Corporation 312M  PAX-5  24 Mouse готовые к применению Cell Marque  Corporation 312R  Pax-5  SP34 Rabbit 1:100 - 1:500 Cell Marque  Corporation E4390  Pax-5  N/A Rabbit 1:50 SpringBioscience 363M  Pax-8  MRQ-50 Mouse 1:50 - 1:200 Cell Marque  Corporation AC-0096RUO  Paxillin   EP89 Rabbit 1:100-1:200 Epitomics AC-0255RUO  PD-1 (PDCD1)   EP239 Rabbit 1:100-1:200 Epitomics M5690  PD-1/CD279  SP269 Rabbit 1:100 SpringBioscience E18660  PD1/CD279 (N-terminus)  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience AC-0100RUO  PDCD4   EP102 Rabbit 1:100-1:200 Epitomics E17690  PDCD6  N/A Rabbit 1:50 SpringBioscience E2690  PDGFR alpha  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience E2730  PDGFR beta  N/A Rabbit 1:50 SpringBioscience M5700  PDHK1  SP270 Rabbit 1:100 SpringBioscience E18410  PDK1  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience E18530  Pds1/Securin  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience AC-0131RUO  PDX1  EP139 Rabbit 1:100-1:200 Epitomics E3340  PGP 9.5/Protein gene product/UCH-L1  N/A Rabbit 1:200 SpringBioscience M5200  PHLPP2  SP220 Rabbit 1:100 SpringBioscience 369A  Phosphohistone h4 (PHh4)  N/A Rabbit 1:100 - 1:500 Cell Marque  Corporation E3080  Phosphotyrosine  SPM102 Mouse 1:20 SpringBioscience 422R  PHOX2B  EP312 Rabbit 1:25-1:100 Cell Marque  Corporation M3620  PI3k p85  SP62 Rabbit 1:100 SpringBioscience M4390  pI3KCA  SP139 Rabbit 1:100 SpringBioscience E18200  PI3Kp85  N/A Rabbit 1:50 SpringBioscience E18710  PIM-1  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience E18800  PIM2  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience 321R  PLAP  SP15 Rabbit 1:500 - 1:1000 Cell Marque  Corporation E14110  PLC beta1  N/A Rabbit 1:25 SpringBioscience E12470  PLC gamma2  N/A Rabbit 1:50 SpringBioscience E18820  Pleiotrophin  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience E12400  PML  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience E3520  PMP-22/Peripheral Myelin Protein  N/A Rabbit 1:50 SpringBioscience AC-0221RUO  PODXL   EP248 Rabbit 1:100-1:200 Epitomics E3480  Presenilin  N/A Rabbit 1:30 SpringBioscience M3420  Progesterone Receptor  SP42 Rabbit 1:400 SpringBioscience E2070  Progesterone Receptor  N/A Rabbit 1:200 SpringBioscience E17750  Prohibitin  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience 210R  Prolactin  EP193 Rabbit 1:100-1:500 Cell Marque  Corporation E17490  Prolactin  N/A Rabbit 1:200 SpringBioscience 324M  PSA/Prostate Specific Antigen  ER-PR8 Mouse 1:50 - 1:200 Cell Marque  Corporation E3290  PSCA/Prostate Stem Cell Antigen  N/A Rabbit 1:75 SpringBioscience M3290  PSMA/Prostate Specific Membrane Antigen  SP29 Rabbit 1:100 SpringBioscience E17330  PSMA/Prostate Specific Membrane Antigen  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience M4700  PTEN  SP170 Rabbit 1:100 SpringBioscience M5180  PTEN  SP218 Rabbit 1:200 SpringBioscience M4510  PTH/Parathyroid Hormone  SP151 Rabbit 1:100 SpringBioscience E18090  PTH/Parathyroid Hormone  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience M5380  PU.1  SP238 Rabbit 1:100 SpringBioscience E18910  RACK-1  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience AC-0193RUO  RAD51   EP189 Rabbit 1:100-1:200 Epitomics E19100  RAD51  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience E12460  Ran  N/A Rabbit 1:50 SpringBioscience E16370  RCAS1  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience E11050  RCC/Renal Cell Carcinoma/GP200  SPM487 Mouse 1:100 SpringBioscience E13440  RCC1/Regulator of Chromosome Condensation 1  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience E4310  Retinoblastoma (Rb)  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience E4370  Retinoic Acid Receptor beta  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience E4330  Retinoic X Receptor gamma  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience E4190  ROC1  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience AC-0217RUO  RRM1   EP242 Rabbit 1:100-1:200 Epitomics M4670  RRM1  SP167 Rabbit 1:100 SpringBioscience E18040  RRMI  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience M4270  S100 beta  SP127 Rabbit 1:100 SpringBioscience 408R  S100A1  EP184 Rabbit 1:25-1:100 Cell Marque  Corporation E4440  S100A4  N/A Rabbit 1:200 SpringBioscience AC-0297RUO  S100A6   EP313 Rabbit 1:100-1:200 Epitomics AC-0195RUO  S100A9   EP185 Rabbit 1:100-1:200 Epitomics 376M  S100P  16/f5 Mouse 1:100 - 1:500 Cell Marque  Corporation AC-0161RUO  S100P   EP186 Rabbit 1:100-1:200 Epitomics E18080  S6 (Paired235/236)  N/A Rabbit 1:50 SpringBioscience E18070  S6 (S235/236)  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience M3450  S6 (S240/244)  SP45 Rabbit 1:50 SpringBioscience E17780  S6 Ribosomal  N/A Rabbit 1:50 SpringBioscience E17770  S6 Ribosomal (paired240/244)  N/A Rabbit 1:50 SpringBioscience E17760  S6 Ribosomal (S240/244)  N/A Rabbit 1:50 SpringBioscience M3500  S6(S235/236)  SP50 Rabbit 1:100 SpringBioscience 385M  SALL4  6E3 Mouse готовые к применению Cell Marque  Corporation M5890  SALL4  SP289 Rabbit 1:100 SpringBioscience M5800  SATB1  SP280 Rabbit 1:100 SpringBioscience M5870  SATB1  SP287 Rabbit 1:100 SpringBioscience 384R  SATB2  EP281 Rabbit 1:25-1:100 Cell Marque  Corporation M5810  SATB2  SP281 Rabbit 1:100 SpringBioscience AC-0256RUO  SDHB  EP288 Rabbit 1:20 Epitomics E14060  SHIP-1  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience E12440  SH-PTP2  N/A Rabbit 1:30 SpringBioscience E14120  SKP1 p19  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience M4220  SLIT2  SP122 Rabbit 1:100 SpringBioscience E19050  SLIT2  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience E11250  Smad3  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience 377M  Smoothelin  R4A Mouse 1:100 - 1:500 Cell Marque  Corporation E10990  SMRTe  N/A Rabbit 1:25 SpringBioscience E16720  SOCS-2  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience E16850  SOCS-3  N/A Rabbit 1:50 SpringBioscience E16780  SOCS-6  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience E10290  Sodium Channel (Pan)  N/A Rabbit 1:200 SpringBioscience 332R  Somatostatin  EP130 Rabbit 1:100-1:500 Cell Marque  Corporation AC-0162RUO  Somatostatin receptor type 2   EP149 Rabbit 1:100-1:200 Epitomics E17920  Sonic Hedgehog  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience 383A  SOX-10  N/A Rabbit 1:25 - 1:100 Cell Marque  Corporation 383R  SOX-10  EP268 Rabbit 1:50-1:200 Cell Marque  Corporation M5670  SOX-10  SP267 Rabbit 1:100 SpringBioscience M5750  SOX-10  SP275 Rabbit 1:100 SpringBioscience 382M  SOX-11  MRQ-58 Mouse 1:25 - 1:100 Cell Marque  Corporation E16820  SOX14  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience AC-0101RUO  SOX2   EP103 Rabbit 1:100 - 1:200 Epitomics M3760  SOX2  SP76 Rabbit 1:100 SpringBioscience E18600  SOX2  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience 371R  SOX-2  EP103 Rabbit 1:50-1:200 Cell Marque  Corporation 371R  SOX-2  SP76 Rabbit 1:50 - 1:200 Cell Marque  Corporation AC-0284RUO  SOX9   EP317 Rabbit 1:100 - 1:200 Epitomics E13470  SOX9 [aa 1-150]  N/A Rabbit 1:50 SpringBioscience E14040  SOX9 [aa 316-510]  N/A Rabbit 1:50 SpringBioscience E12540  SP1  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience M4660  Spink1  SP166 Rabbit 1:100 SpringBioscience E17870  ST13  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience E18840  Stanniocalcin-2  N/A Rabbit  1:50 SpringBioscience M5830  STAT5  SP283 Rabbit 1:100 SpringBioscience E3590  STAT5 alpha  N/A Rabbit 1:200 SpringBioscience 426R  STAT6  EP325 Rabbit 1:25-1:100 Cell Marque  Corporation E4290  STAT6  N/A Rabbit 1:75 SpringBioscience 394R  Stathmin  SP49 Rabbit 1:25 - 1:100 Cell Marque  Corporation M3490  Stathmin  SP49 Rabbit 1:100 SpringBioscience E18060  Stathmin  N/A Rabbit 1:200 SpringBioscience AC-0113RUO  Survivin   EP119 Rabbit 1:100-1:200 Epitomics M3790  Survivin  SP79 Rabbit 1:100 SpringBioscience E3770  Survivin  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience E4050  Syk  N/A Rabbit 1:200 SpringBioscience 336R  Synaptophysin  MRQ-40 Rabbit по запросу Cell Marque  Corporation E2170  Synaptophysin  N/A Rabbit 1:300 SpringBioscience M3360  Syntaxin 1A  SP36 Rabbit 1:100 SpringBioscience E17700  Syntaxin 1A  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience E2680  Synuclein alpha  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience E2770  Synuclein beta  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience E2790  Synuclein pan  N/A Rabbit 1:50 SpringBioscience M3700  Tau/Neuronal Marker  SP70 Rabbit 1:100 SpringBioscience E18290  Tau/Neuronal Marker  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience 368R  T-bet  MRQ-46 Rabbit 1:100 - 1:500 Cell Marque  Corporation M5480  TCL1A  SP248 Rabbit 1:100 SpringBioscience 338R  TdT  EP266 Rabbit  1:50-1:200 Cell Marque  Corporation M4500  TdT/Terminal Deoxynucleotidyl Transferase  SP150 Rabbit 1:100 SpringBioscience E19230  TdT/Terminal Deoxynucleotidyl Transferase  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience M5300  Tenascin X  SP230 Rabbit 1:100 SpringBioscience 354R  TFE3  MRQ-37 Rabbit 1:50 - 1:200 Cell Marque  Corporation AC-0269RUO  TFE3   EP285 Rabbit 1:100-1:200 Epitomics AC-0045RUO  TFF1   EP47 Rabbit 1:100-1:200 Epitomics AC-0103RUO  TFF3   EP107 Rabbit 1:100-1:200 Epitomics E18020  TGF beta 2  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience E3940  TGFb3/Transforming Growth Factor beta3 (C-terminus)  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience E12340  TGFR1/Transforming Growth Factor R1  N/A Rabbit 1:50 SpringBioscience E3610  Thioredoxin Reductase 2 (TrxR2)  N/A Rabbit 1:50 SpringBioscience E12530  Thrombin R/ATAP2  N/A Rabbit 1:50 SpringBioscience AC-0175RUO  Thrombomodulin   EP175 Rabbit 1:100-1:200 Epitomics E4060  Thyroid Hormone Receptor (a1/a2)  N/A Rabbit 1:150 SpringBioscience E4070  Thyroid Hormone Receptor (b)  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience 409R  Thyroid Peroxidase  EP159 Rabbit 1:25-1:100 Cell Marque  Corporation E17520  Tie-1  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience E3360  TIMP-1  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience E4180  TIMP-2  N/A Rabbit 1:50 SpringBioscience E3850  TIMP-3  N/A Rabbit 1:70 SpringBioscience 401M  TLE1  1F5 Mouse 1:10-1:50 Cell Marque  Corporation E4320  TNF-R2/Tumor Necrosis Factor Receptor 2  N/A Rabbit 1:50 SpringBioscience E18860  Topoisomerase 1  N/A Rabbit 1:50 SpringBioscience 220A  Toxoplasma gondii  N/A Rabbit по запросу Cell Marque  Corporation E4340  TRADD  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience 423M  Transgelin  2A10C2 Mouse 1:25-1:100 Cell Marque  Corporation 397A  Treponema pallidum  N/A Rabbit по запросу Cell Marque  Corporation M5930  TROP-2  SP293 Rabbit 1:100 SpringBioscience M5940  TROP-2  SP294 Rabbit 1:100 SpringBioscience M5950  TROP-2  SP295 Rabbit 1:100 SpringBioscience AC-0093RUO  Troponin I, Cardiac Muscle (Troponin 1)   EP73 Rabbit 1:100-1:200 Epitomics AC-0104RUO  Troponin T, Cardiac Muscle (TNNT2)   EP108 Rabbit 1:100-1:200 Epitomics 342R  Tryptase  EP259 Rabbit 1:100-1:200 Cell Marque  Corporation M4120  TS/Thymidylate Synthase  SP112 Rabbit 1:100 SpringBioscience E17910  TS/Thymidylate Synthase  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience E18570  TS/Thymidylate Synthase (C-terminus)  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience 211R  TSH  EP254 Rabbit 1:100-1:500 Cell Marque  Corporation E17500  TSH/Thyroid Stimulating Hormone  N/A Rabbit 1:200 SpringBioscience 343R  TTF-1  EP229 Rabbit 1:50-1:200 Cell Marque  Corporation E17080  TTF-1/Thyroid Transcription Factor-1  8G7G3/1 Mouse 1:50 SpringBioscience M4410  TTF-1/Thyroid Transcription Factor-1  SP141 Rabbit 1:100 SpringBioscience E19180  TTF-1/Thyroid Transcription Factor-1  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience E4130  Tubulin alpha  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience E3810  Tubulin beta  N/A Rabbit 1:200 SpringBioscience E10330  Tubulin gamma  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience E3350  Ubiquitin  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience E3930  uNOS/Universal Nitric Oxide Synthase  N/A Rabbit 1:50 SpringBioscience M5150  URI  SP215 Rabbit 1:100 SpringBioscience M3730  Uroplakin III  SP73 Rabbit 1:100 SpringBioscience E18240  Uroplakin III  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience 345R  Uroplakin III    SP73 Rabbit 1:500-1:1000 Cell Marque  Corporation E12560  USF-2  N/A Rabbit 1:50 SpringBioscience 364M  Varicella Zoster Virus  cocktail Mouse по запросу Cell Marque  Corporation E2610  VEGF/Vascular Endothelial Growth Factor  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience M4450  Villin  SP145 Rabbit 1:100 SpringBioscience E16640  Villin  N/A Rabbit 1:50 SpringBioscience 347R  Vimentin  SP20 Rabbit 1:100 - 1:500 Cell Marque  Corporation 347R  Vimentin  EP21 Rabbit 1:50-1:200 Cell Marque  Corporation M4170  Vinculin  SP117 Rabbit 1:100 SpringBioscience E18720  Vinculin  N/A Rabbit  1:200 SpringBioscience M5340  VPAC1  SP234 Rabbit 1:100 SpringBioscience M5350  VPAC2  SP235 Rabbit 1:100 SpringBioscience E3960  Wnt-1  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience E19070  XMRV/Xenotropic murine leukemia virus-related virus  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience E4010  XRCC2/X-Ray Cross Complementing 2  N/A Rabbit 1:200 SpringBioscience E12520  ZAP-70/Zeta chain associated protein kinase 70  N/A Rabbit 1:100 SpringBioscience

www.biovitrum.ru

45_Антиген Антитело

Авидность антител — суммарная сила взаимодействия антитела с антигеном. Антитела содержат от двух до десяти антигенсвязывающих центров. Поливалентность антител существенно усиливает прочность их соединения с антигеном, поскольку для диссоциации образующихся комплексов необходим разрыв сразу всех связей. Применительно к физиологическим условиям более адекватно рассматривать авидность, а не аффинность антител.

В отдельных случаях одни антитела могут распознавать вариабельные участки других антител, составляющие их активные центры. Поскольку нет двух В-клеточных клонов, продуцирующих антитела одной и той же специфичности, то разные вариабельные участки активных центров являются, по существу, маркерами разных клонов В-лимфоцитов. Такие участки называют идиотипами (idios (греч.) — собственный, частный). Идиотип — вариант уникального антигенсвязывающего участка молекулы иммуноглобулина. В организме могут нарабатываться антитела против собственных идиотипов, поскольку каждый новый идиотип является антигеном, с которым иммунная система никогда ранее не встречалась. Антиидиотипические антитела, с одной стороны, взаимодействуют с идиотипом, с другой стороны, сами являются новым антигеном для иммунной системы и могут вызывать иммунный ответ на собственный активный центр. Это приводит к возможному появлению антител уже к их идиотипу. Таким образом, формируется антиидиотипическая сеть, несущая иммунорегуляторные функции. В настоящее время этот эффект используется в практической иммунобиотехнологии и лечении некоторых заболеваний.

Биологические функции антител

1. Нейтрализация вирусов.

— Связываются с вирусами, предотвращая их проникновение в клетку и последующую репликацию.

— Вызывают агрегацию вирусов с последующим поглощением фагоцитирующими клетками.

— Взаимодействуют с клеточными рецепторами вирусов, ингибируя связывание вирусов с клеточной поверхностью.

— Блокируют межклеточное проникновение вирусов.

— Обладают ферментативными свойствами.

Антитела особенно эффективны в тех случаях, когда вирусу для достижения клеток-мишеней необходимо пройти через кровоток. Тогда эффективными могут быть даже относительно низкие концентрации антител в крови. Поэтому наиболее очевидный защитный эффект антител наблюдается при инфекциях с длительным инкубационным периодом, когда вирус, прежде чем достичь клеток-мишеней, должен пройти через кровоток, где может быть нейтрализован даже очень небольшим количеством специфических антител.

2. Нейтрализация токсинов. Циркулирующие в крови продукты бактериального происхождения и другие экзотоксины (например, фосфолипаза пчелиного яда) связываются направленными против них антителами. Антитело, присоединившись вблизи активного центра токсина, может блокировать его взаимодействие с субстратом. Даже связываясь с токсином на некотором расстоянии от его активного центра, антитела могут подавить токсичность в результате аллостерических конформационных изменений. В комплексе с антителами токсин теряет способность к диффузии в тканях и может стать объектом фагоцитоза.

3. Опсонизация бактерий. Опсонизация — связывание антител с антигенами поверхности бактерий. В результате опсонизации бактерии становятся объектом интенсивного поглощения фагоцитирующими клетками. Действие антител усиливается белками системы комплемента, которые также связываются с бактериальной поверхностью. (Белки системы комплемента могут и самостоятельно опсонизировать бактерии.) На фагоцитирующих клетках имеются рецепторы для Fc-участков иммуноглобулинов и рецепторы для белков комплемента.

4. Активация системы комплемента. Связываясь с поверхностью клеток, антитела классов IgM и IgG приобретают способность инициировать классический путь активации комплемента. Активация приводит к отложению белков системы комплемента на поверхности бактериальных клеток, образованию пор в мембране и гибели клеток с последующим привлечением к месту событий фагоцитов и поглощением клеток фагоцитами.

5. Антителозависимая клеточная цитотоксичность. Антитела, связавшиеся с чужеродными антигенами на поверхности клеток, приобретают способность взаимодействовать с Fc-рецепторами на мембране цитотоксических клеток (естественные киллеры, цитотоксические Т-лимфоциты). Примерами мембранных чужеродных антигенов могут служить вирусные белки, появляющиеся на поверхности вирусинфицированных клеток. В результате взаимодействия антигена с антителом и Fc-рецептором образуется мостик, сближающий клетку-мишень и цитотоксическую клетку. После сближения цитотоксическая клетка убивает клетку-мишень.

6. Защита от паразитов. Существуют паразиты, слишком крупные, чтобы их можно было уничтожить путем фагоцитоза, например гельминты. Выделяемые паразитом антигены могут взаимодействовать с IgE, связанными через соответствующий рецептор с тучными клетками. В результате такого взаимодействия тучные клетки выбрасывают медиаторы, привлекающие эозинофилы. Последние уничтожают или нейтрализуют гельминтов путем выброса во внеклеточное пространство специфических эффекторных молекул.

7. Иммунорегуляторная функция. Антиидиотипические антитела взаимодействуют с активными центрами других антител (идиотипами) и осуществляют регуляцию гуморального иммунного ответа, подавляя их активность.

8. Проникновение через плаценту. В эмбриональный период и первые несколько месяцев жизни, когда собственная иммунная система ребенка еще недостаточно развита, защиту от инфекций обеспечивают материнские антитела, проникающие через плаценту или поступающие с молозивом и всасывающиеся в кишечнике. Через плаценту в кровь плода поступают антитела класса IgG. Основные классы иммуноглобулинов грудного молока — это IgG и секреторный IgA. Они не всасываются в кишечнике, а остаются в нем, защищая слизистые оболочки. Эти антитела направлены к бактериальным и вирусным антигенам, часто попадающим в кишечник.

Поликлональные и моноклональные антитела. Сыворотку крови, содержащую антитела к какому-либо антигену, называют антисывороткой. Антисыворотка, как правило,поликлональна, поскольку содержит антитела, продуцируемые разными клонами плазматических клеток. Антисыворотку обычно получают путем иммунизации организма каким-либо антигеном. Поликлональная антисыворотка может быть моноспецифической, то есть содержащей антитела к разным эпитопам одного и того же антигена. Например, выпускают поликлональные моноспецифические антисыворотки против тяжелых цепей иммуноглобулинов М, G, А человека. Каждая такая антисыворотка содержит поликлональные антитела, направленные к различным эпитопам какой-либо цепи иммуноглобулинов.

Моноклональные антитела продуцируются одним клоном плазмоцитов. Разработан метод получения больших количеств моноклональных антител с помощью, так называемой гибридомной технологии, являющейся одной из составляющих клеточной инженерии. Гибридомы являются бессмертными клеточными клонами, продуцирующими антитела одной специфичности.

Моноклональные антитела идентичны по своему строению, то есть относятся к одному и тому же классу, изотипу, аллотипу, имеют одинаковые активные центры, обладают одной и той же специфичностью, взаимодействуют с одним и тем же эпитопом антигена с одинаковой аффинностью. Моноклональные антитела могут нарабатываться в неограниченных количествах и используются в качестве

Существует два типа перекрестной реактивности антител.

— Антитела, направленные против какого-либо антигена одного вида животных, могут реагировать с антигенами другого вида. Причиной такой перекрестной реактивности является консервативность гомологичных биологических структур, например, белков, сохраняющих свою аминокислотную последовательность неизменной в процессе эволюции. Так, известен высоко консервативный белок, называемый Thy-1 антигеном и характерный для клеток тимуса позвоночных. Моноклональные антитела, взаимодействующие с Thy-1 антигеном человека, реагируют с Thy-1 антигеном земноводных и пресмыкающихся.

— Антитела, взаимодействующие со стереохимически сходными эпитопами, имеющими разную природу. Так, стрептококки несут антигены, конформационно сходные с антигенами сердечных клапанов. В результате, у лиц, перенесших стрептококковую ангину, может развиться ревматизм сердца вследствие наработки в организме перекрестно реагирующих антител к собственным антигенам. Такие антитела называют также аутоантителами, то есть антителами, направленными против собственных антигенов. В здоровом организме аутоантитела обычно присутствуют в следовых количествах.

Наличие эффекта перекрестного реагирования создает определенные трудности в оценке диагностической специфичности.

Иммуноглобулины отличаются от других белков исключительным полиморфизмом. Полиморфизм проявляется в наличии разных изотопов, аллотипов иммуноглобулинов, а также в разнообразии активных центров антител (идиотипов), определяющих их специфичность по отношению к антигенным детерминантам.

Во всех клетках, кроме созревающих В-лимфоцитов, кодирующая легкие и тяжелые цепи ДНК находится в так называемой «зародышевой конфигурации». Такую конфигурацию называют также генами зародышевой линии, или гаметными генами.

Тяжелые и легкие цепи иммуноглобулинов кодируются набором кодирующих нуклеотидных последовательностей, названных генными сегментами и разделенных друг от друга некодирующими участками ДНК. Генные сегменты являются предшественниками функционально активных генов и представляют собой экзоны, перемежающие с интронами. В ходе В-клеточного созревания эти генные сегменты перестраиваются и особым образом соединяются вместе, давая функционально активные гены цепей иммуноглобулинов. У человека и мыши существует три группы генных сегментов, обеспечивающих синтез всего многообразия тяжелых цепей иммуноглобулинов: V (variable — вариабельный), D (diversity — обеспечивающий разнообразие) и J (joining — соединительный). Сегменты расположены последовательно группами от 5' к 3' концу. Аналогичным образом выглядит зародышевая конфигурация ДНК, кодирующей легкие цепи.

Весь путь созревания В-лимфоцита от незрелой клетки-предшественницы до антителосекретирующей плазматической клетки можно разделить на несколько этапов.

1. Соматическая рекомбинация — перестройка (реаранжировка) генных сегментов, кодирующих вариабельные домены цепей иммуноглобулинов. Это первый этап на пути к синтезу антител и ключевой момент формирования функциональных вариабельных областей легких и тяжелых цепей. Соматическая рекомбинация идет на ранних этапах созревания В-лимфоцитов в костном мозге с участием специализированных ферментов. В результате соматической рекомбинации объединяются генные сегменты, кодирующие вариабельные домены цепей иммуноглобулинов. Объединенные экзоны, кодирующие V-домен, остаются при этом разделены интроном с генными сегментами, кодирующими константные домены. Соматической рекомбинации в ходе созревания В-лимфоцитов сначала подвергаются генные сегменты тяжелой цепи, затем - генные сегменты легких цепей.

Дополнительным источником разнообразия формирующихся активных центров являются включение вставок между сегментами (так называемые P и N-вставки), вариации в соединении сегментов, приводящие к потере или появлению новых нуклеотидов и, соответственно, к сдвигу рамки считывания, комбинации V-доменов легких и тяжелых цепей при сборке полной молекулы иммуноглобулина и, наконец, соматические гипермутации, происходящие позднее в более зрелых В-клетках. В перестроенных генах гипервариабельные участки V-доменов иммуноглобулинов кодируются последовательностями, находящимися на границе между сегментами. Гипервариабельность этих участков связана с тем, что дополнительные механизмы формирования разнообразия затрагивают именно эти районы нуклеотидной последовательности.

Перестройка генов легких и тяжелых цепей происходит только в одной из двух гомологичных хромосом. Это обеспечивает аллельное исключение в отношении продуцируемых клеткой антител. В итоге одна В-клетка и ее потомство способны продуцировать только иммуноглобулины, имеющие идентичные активные центры.

2. Синтез цепей иммуноглобулинов. Образуется первичный транскрипт РНК, содержащий нуклеотидные последовательности, включающие некодирующие интроны и генные сегменты, кодирующие домены иммуноглобулинов. Первичный транскрипт процессируется с удалением всех участков нуклеотидной последовательности кроме тех, которые кодируют вариабельный и константные домены мю-цепи. Образовавшаяся матричная РНК транспортируется из ядра в цитоплазму, где происходит синтез мю-цепей на полирибосомах шероховатого эндоплазматического ретикулюма. Мю-цепи после синтеза заякореваются на мембране эндоплазматического ретикулюма и объединяются с суррогатным полипептидом, заменяющим им легкую цепь. Затем происходит перестройка гена легкой цепи. На этой стадии В-лимфоцит представляет собой пре-B клетку. Синтез легкой цепи приводит к появлению на мембране лимфоцита полноценного мембранного IgM и к переходу В-лимфоцита в стадию незрелой B-клетки. Созревание в зрелую наивную B-клетку сопровождается одновременным появлением на клетке мембранного IgM и IgD. Они имеют один и тот же активный центр, но разные константные домены, образующиеся за счет альтернативного сплайсинга матричной РНК. Обе формы мембранного иммуноглобулина входят в состав В-клеточных рецепторов. В-лимфоцит, экспрессирующий (несущий на мембране) B-клеточный рецептор, выходит из костного мозга и приобретает способность активироваться при встрече с антигеном, взаимодействующим с активным центром иммуноглобулина.

3. Дополнительные модификации. Зрелые наивные В-клетки мигрируют в лимфоузлы и другие лимфоидные органы, где в результате встречи с антигеном происходит их активация. Активация приводит к трем дополнительным событиям, затрагивающим перестроенные гены иммуноглобулинов и характер их экспрессии:

— Переключение изотипа. Путем альтернативного сплайсинга матричной РНК генные сегменты, кодирующие мю-цепи и дельта-цепи, удаляются. На их место перемещаются сегменты, кодирующие константные домены тяжелых цепей других изотипов. В результате взамен иммуноглобулинов классов М и D В-клетки начинают синтезировать иммуноглобулины класса G, А или Е. Такие иммуноглобулины имеют тот же активный центр (вариабельный домен), но принадлежат к другому изотипу. Каждый В-лимфоцит в этом случае синтезирует иммуноглобулины только одного изотипа. Переключение изотипов регулируется цитокинами.

— Образование растворимых иммуноглобулинов (антител). Активация В-лимфоцитов приводит к их превращению в плазматические клетки — конечный этап дифференцировки В-клеток. Плазматические клетки теряют способность продуцировать мембранную форму иммуноглобулинов, но начинают синтез растворимых иммуноглобулинов.

— Соматические гипермутации. Затрагивают только гипервариабельные участки, кодирующие V-домены. Происходят в зародышевых (терминальных) центрах лимфоузлов, где концентрируются активированные В-клетки. Скорость мутаций вариабельных участков в генах легких и тяжелых цепей иммуноглобулинов на несколько порядков превышает нормальный темп мутаций. Одна мутация возникает в среднем за два клеточных деления. Клетки делятся каждые 6 часов. Механизм соматических гипермутаций остается неизвестным.

Иммунологические методы анализа построены на взаимодействии антиген-антитело. С помощью таких методов можно выявлять как антитела, так и антигены. Определение может быть качественным и количественным. Эта группа методов не требует большого количества материала для анализа (микроанализ). Объем анализируемого материала в наиболее совершенных методах составляет 0,1 мл, а чувствительность достигает десятых долей нанограмма на миллилитр.

1. Иммунопреципитация. Метод основан на поливалентности антител. За счет наличия нескольких активных центров в составе иммуноглобулинов они могут взаимодействовать с одинаковыми эпитопами на нескольких антигенах. В результате образуются видимые глазом и выпадающие в осадок агрегаты (преципитат). Если антиген содержит несколько эпитопов, то с ним связывается несколько антител, что увеличивает массу агрегата. Различают иммунопреципитацию в растворе (наименее чувствительная) и преципитацию в геле (позволяет определять антитела и антигены с более высокой чувствительностью.Таким способом можно определить наличие или отсутствие в пробе антигена или антител.

Радиальная иммунодиффузия. В этом случае подготавливается плоский гель, в котором один из компонентов системы антиген-антитело размещен равномерно по всей толще геля. Второй компонент, тестируемый в системе антиген-антитело, помещают в лунку в центре плоского геля. Последующая диффузия тестируемого компонента приводит к образованию кольца преципитации вокруг центральной лунки. Чем выше концентрация тестируемого компонента, тем больше диаметр образующегося кольца. При использовании соответствующих калибровочных образцов, то есть набора проб с известной концентрацией, может быть проведено количественное определение компонента, наносимого в центральную лунку.

Иммуноэлектрофорез. Метод является качественным. С его помощью можно одновременно в одной пробе определить наличие множества антигенов, выявляемых антителами. Проводят электрофорез тестируемого образца в агарозном геле, затем по сторонам геля параллельно направлению миграции антигенов делают длинные лунки (траншеи), в которые заливают антисыворотку, содержащую антитела к тестируемым антигенам. При наличии в тестируемом образце искомых антигенов образуются дуги преципитации в тех зонах, куда мигрировали при электрофорезе антигены. Этим же методом можно определить наличие антител к конкретному антигену, находящемуся в смеси с другими антигенами.

Агглютинация (от лат. agglutinatio — склеивание). В основе метода лежит формирование видимых невооруженным глазом конгломератов клеток или частиц при образовании между ними молекулярных мостиков. В качестве мостиков могут выступать антитела и антигены. В основе феномена агглютинации лежит поливалентность антител, дающая возможность одному антителу связаться с несколькими клетками или частицами одновременно. Агглютинация может происходить между бактериальными клетками, между клетками крови, в частности эритроцитами, между латексными частицами. Бактериальные клетки несут поверхностные антигены. При добавлении к бактериальным клеткам антител против таких антигенов будет происходить их агглютинация. Определение групп крови с помощью соответствующих антисывороток также основано на феномене агглютинации. В этом случае образование конгломератов клеток с последующим их осаждением происходит в том случае, когда эритроциты несут на своей поверхности антигены (изоагглютинины), взаимодействующие с добавляемой к ним антисывороткой. При агглютинации эритроцитов метод называют гемагглютинацией.

2. Методы, основанные на использовании специфической метки

Иммунофлуоресценция. Метод основан на применении в качестве метки флуоресцирующих соединений. Метку химически пришивают к антителу или антигену. Это позволяет регистрировать реакцию антиген-антитело с помощью соответствующих приборов и увеличивает чувствительность анализа. Иммунофлуоресцентный метод широко используется для иммунофенотипирования клеток иммунной системы, то есть для определения набора антигенов, представленных на поверхности клетки. Как правило, с этой целью применяют наборы моноклональных антител, направленных против различных антигенов. Если используют меченые моноклональные антитела, то метод называют прямым. Если клетки обрабатывают немечеными моноклональными антителами, а затем флуоресцентно мечеными антителами, направленными против моноклональных антител, то метод называют непрямым.

Иммуноферментный метод. Объединяет возможности иммунологических и биохимических подходов. В качестве метки используются ферменты, химически сшитые с антигеном или антителом. Он шире других методов распространен в диагностической практике. Обладает высокой чувствительностью (десятые доли нанограмма на миллилитр), позволяет анализировать одновременно множество проб, может быть, как качественным, так и количественным методом, легко стандартизуется, не требует большого количества времени. Существует множество различных вариантов иммуноферментного метода. Чаще всего применяется твердофазный иммуноферментный анализ (ИФА). Один из компонентов системы «антиген-антитело» сорбируется на твердую фазу, в качестве которой обычно используется полистирол, имеющий 96 лунок объемом 0,2 мл. В каждой лунке планшета проводится отдельная реакция, которая затем может быть отдельно проанализирована.

При анализе антигенов на стенке лунок полистиролового планшета сорбируются антитела против данного антигена, затем добавляется раствор тестируемого антигена и проводится инкубация, в ходе которой происходит взаимодействие «антиген-антитело». После отмывания не-связавшегося материала в лунки планшетов добавляют антитела против того же антигена, сшитые с ферментом. Формируется связанный с твердой фазой комплекс, состоящий из антител, антигена и антител, меченых ферментом. Комплекс напоминает бутерброд, в связи с чем такой вариант иммуноферментного анализа назван сэндвич-методом. Для повышения специфичности метода используют моноклональные антитела, направленные к разным эпитопам антигена.

Реакция «антиген-антитело» проявляется добавлением в отмытую лунку планшета субстрата для фермента. Используются такие субстраты, которые способны менять свою окраску в присутствии фермента. Чаще всего в качестве фермента используется пероксидаза хрена. Она расщепляет перекись водорода на воду и атомарный кислород. Последний окисляет бесцветные фенольные соединения, у которых появляется окраска. В настоящее время в этих целях применяют ортофенилендиамин (ОФД) и тетраметилбензидин (ТМБ). Появление окрашивания свидетельствует о связывании фермента с твердой фазой и, в данном случае, о положительной реакции на антиген. Количество антигена в растворе оценивается по интенсивности окрашивания раствора субстрата.

Существуют конкурентные и неконкурентные методы анализа. Сэндвич-метод (образование комплекса, состоящего из антител, антигена и антител, меченых ферментом) является неконкурентным. В конкурентном варианте определения антигена взамен антител, сшитых с ферментом, одновременно с немеченым добавляется стандартизированный антиген, меченый ферментом. Он конкурирует с немеченым антигеном за связывание с сорбированными антителами. Чем выше концентрация тестируемого (немеченого) антигена, тем меньше меченого антигена свяжется с твердой фазой. То есть в данном случае снижение интенсивности иммуноферментной реакции будет свидетельствовать о наличии антигена в тестируемом растворе.

Иммуноферментный анализ применяется для определения самых различных антигенов. С его помощью тестируют наличие в крови антител к самым разным возбудителям инфекций, определяют аутоантитела, оценивают содержание вирусных и бактериальных антигенов, белков крови, опухолевых антигенов, гормонов, наркотиков и многое другое. Метод применяется не только в биомедицине и научных исследованиях, но и в сельском хозяйстве, при экологическом мониторинге и так далее.

Радиоиммунный анализ. Обладает наибольшей чувствительностью. Способен выявлять пикограммовые концентрации антигена в миллилитре. Однако т связи с тем, что в качестве метки применяются изотопы, не нашел столь широкого применения, как иммуноферментный метод. Кроме того, выполнение радиоиммунного анализа требует специализированного оборудования и специальных условий, что также осложняет распространение этого метода. Чаще всего при проведении радиоиммунного анализа используют конкурентные методы. Радиоиммунологический анализ в медицине используется для определения кортикостероидных гормонов и некоторых других антигенов.

studfiles.net

Поликлональные антитела - Справочник химика 21

    В иммуноферментном анализе используются поли- и моноклональные антитела как по отдельности, так и вместе. Относительная легкость получения поликлональных антител из антисывороток иммунизированных животных в ряде случаев дает возможность пренебречь их гетерогенностью. Однако разработка метода получения моноклональных антител — продуктов гибридных клеток — дала им огромные преимущества в иммунохимическом анализе в связи с уникальными свойствами, выгодно отличающими их от антисывороток. Использование моноклональных антител в иммуноферментном анализе дает возможность работать с практически неограниченным источником антител, однородных по молекулярным и иммунологическим свойствам. С их появлением открылись новые возможности для структурного изучения антигенов. Это связано с тем, что моноклональные антитела, продуцируемые гибридомами, связываются со специфическим участком на поверхности белковой молекулы — антигенной детерминантой и могут быть использованы в качестве селективных зондов на определенные структурные участки. [c.306]     ПОЛУЧЕНИЕ ПОЛИКЛОНАЛЬНЫХ АНТИТЕЛ [c.307]

    А — сэндвич >-анализ с поликлональными антителами стадия 1 — инкубация антигена с иммобилизованными антителами с последующей отмывкой несвязавшихся компонентов стадия II — добавление меченных ферментом антител, инкубация и отмывка несвязавшихся компонентов стадия III — детекция ферментативной активности Б — сэндвич>-ана-лиз с моноклональными антителами стадия 1 — инкубация антигена с моноклональными иммобилизованными антителами и конъюгатом антител с ферментом с последующей отмывкой всех несвязавшихся компо- [c.119]

    ИС - неочищенная сыворотка крови МАТ - моноклональные антитела ПАТ - поликлональные антитела  [c.301]

    Объединяют первые 5—6 фракций с самым высоким содержанием белка. Концентрируют до 15—20 мг/мл. Определяют содержание белка. Методом электрофореза определяют состав полученного препарата IgG. Диализуют против боратного буфера pH 8,4 в течение ночи при 4°С и хранят при —20°С. Здоровый кролик дает 100—200 мг IgG. Таким же образом можно получить поликлональные антитела к другим белковым антигенам. [c.309]

    Идея применения ферментов в качестве лекарственных средств (фармакологии ферментов) всегда казалась заманчивой. Однако их нестабильность, короткий период полураспада, нежелательные антигенные свойства, связанные с белковой природой ферментов и опасностью развития аллергических реакций, трудности доставки к пораженным органам и тканям (мишеням) существенно ограничивали возможности использования ферментных препаратов. В разработке методов иммобилизации ферментов (см. ранее) наметились конкретные пути преодоления указанных трудностей применение водорастворимых, биосовместимых носителей, например полимолочной кислоты (легко разлагается в организме), использование методов химической модификации и микрокапсулирования, приготовление MOHO- и поликлональных антител и ферментсодержащих липосом и т.д. [c.168]

    Получение и очистка поликлональных антител [c.161]

    Очистка антигена. Цитозольную фракцию из мозга свиньи (с. 379) пропускают через колонку с иммуносорбентом (1x2 см) в фосфатном буфере (pH 7,4) и колонку промывают тем же буфером. Элюцию проводят 2 М глициновым буфером (pH 2,8), фракции нейтрализуют 2 М трис-НС1 буфером, pH 8,6 Определяют концентрацию белка, цАМФ-связывающую активность (с. 331) она не должна быть ниже 12 нмоль/мг. Проверяют чистоту полученного препарата регуляторной субъединицы (м. м.=56 ООО Да) методом электрофореза (с. 119). Таким же способом, имея моноклональные или поликлональные антитела к соответствующим антигенам, можно получить гомогенные препараты этих антигенов. [c.325]

    ПОЛУЧЕНИЕ И ОЧИСТКА ПОЛИКЛОНАЛЬНЫХ АНТИТЕЛ К ГЕТЕРОЛОГИЧНЫМ ФРАГМЕНТАМ ГИБРИДНЫХ БЕЛКОВ, СОДЕРЖАЩИХ -ГАЛАКТОЗИДАЗУ [c.138]

    Поликлональные антитела к фрагментам гибридных белков [c.141]

    Принципиально важным является то, что поликлональные антитела даже против одной-единственной антигенной детерминанты гетерогенны как по структуре активного центра, так и по физикохимическим свойствам. В том случае, если антиген поливалентен, например белок, то в сыворотке крови образуются антитела, направленные против каждой индивидуальной детерминанты (эпитопа), что еще более усложняет состав антител. Состав антител зависит от вида животного, а также стадии иммунного процесса. [c.11]

    Реагенты этой товарной позиции представлены либо на подложке, либо в форме препаратов и содержат более одной составляющей. Например, они могут содержать примеси из двух или более реагентов или единичных реагентов, растворенных в растворах, кроме воды. Они могут также быть представлены в форме бумаги, пластиков или других материалов (используемых в качестве подложки или основы), пропитанных или покрытых одним или более диагностических или лабораторных реагентов, таких как лакмусовая, pH или pole-finding бумага (бумага для определения полярности) или предварительно покрытые иммуно-контрольные пластинки. Реагенты этой товарной позиции могут также быть упакованы в виде наборов, состоящих из нескольких компонентов, даже если один или более компонентов являются отдельными химически определенными соединениями группы 28 или группы 29, синтетическим красящим веществом товарной позиции 3204 или любым другим веществом, которое будучи представленным отдельно классифицируется в другой товарной позиции. Примерами таких наборов являются такие, которые используются для контроля глюкозы в крови, кетонов в моче и т.п., или такие, которые основаны на ферментах. Однако диагностические наборы, имеющие основные свойства продуктов товарной позиции 3002 или 3006 (например, основанные на моноклональных или поликлональных антителах), исключаются из этой товарной позиции. [c.391]

    Получение антисывороток и поликлональны антител [c.146]

    Антитела, вырабатываемые организмом против антигенных детерминант, представляют неоднородную популяцию. Поэтому в случае поликлональных антител определяемое значение константы связывания является эффективной величиной, характеризующей образование иммунного комплекса с антителами, активные центры которых обладают различным сродством к антигену (см. гл. [c.219]

    ПОЛУЧЕНИЕ ПОЛИКЛОНАЛЬНЫХ АНТИТЕЛ И КОНТРОЛЬ ИХ КАЧЕСТВА [c.33]

    Получены экспериментальные доказательства, что, помимо белков, ферментатпвноп, каталитической активностью наделен и ряд других макромолекул, в частности РНК (названы рибозимами) и MOHO- и поликлональные антитела (абзимы)-см. главу Ферменты . [c.21]

    Основной принцип ELISA — специфическое связывание первого антитела с мишенью. Если молекула-мишень представляет собой белок, то его очищенный препарат обычно используют для получения антител, при помощи которых затем и выявляют данную мишень. Антитела, которые образуются в сыворотке (антисыворотке) крови иммунизированного животного (обычно кролика), связываются с разными антигенными детерминантами (эпитопами) моле-кулы-мишени. Такую смесь антител называют поликлональным препаратом. Использование поликлональных антител имеет два недостатка, существенных для некоторых методов диагностики 1) содержание отдельных антител в поликлональном препарате может варьировать от одной партии к другой 2) поликлональные антитела нельзя применять, если необходимо различить две сходные мишени, т. е. когда патогенная (мишень) и непатогенная (не-мишень) формы различаются единственной детерминантой. Однако эти проблемы вполне разрешимы, поскольку сейчас научились получать препараты антител, выработанных к одной антигенной детерминанте, т. е. препараты моноклональных антител. [c.184]

    Уже в начале нынешнего века, когда о поли-клональности антител ничего не знали, было ясно, что их специфичность можно использовать для подавления инфекций. Позже антитела стали применять в качестве диагностического инструмента для выявления токсичных соединений в клинических образцах. К сожалению, эффективность препаратов поликлональных антител варьирует от одной партии к другой, поскольку в одних случаях при проведении иммунизации антителопродуцирующие клетки сильнее стимулируются одними детерминантами данного антигена, а в других иммунная система активнее отвечает на другие эпитопы того же антигена. Это может влиять на способность разных препаратов нейтрализовать антигены, поскольку отдельные эпитопы обладают разной эффективностью (стимулирующей способностью). Следовательно, в данной партии поликлональных антител может содержаться мало молекул, направленных против основного эпитопа, и в результате она будет менее эффективной, чем предьщущая. [c.184]

    В медицине моноклональные антитела применяют прежде всего для диагностики различных заболеваний. Такие бактериальные заболевания, как кокковые, паразитарные инфекции, малярия, а также грибки хламидии, при помощи мкАТ диагносцируются гораздо точнее, чем другими, традиционными методами. В вирусологии использование мкАТ дало возможность разработать условия антигенного анализа вирусов гораздо более информативного, чем при использовании поликлональных антител. Этот метод позволил получить уникальную информацию об антигенных детерминантах ДНК- и РНК-содержащих вирусов и их изменчивости. В частности, были идентифицированы антигенные детерминанты вирусов гриппа, полиомиелита, гепатита А и др. [c.495]

    Хроническое действие. В условиях производства повышена частота гриппоподобных заболеваний. Астма в большинстве случаев вызвана сенсибилизащ1ей. Этиология развития кровоизлияний в легких неясна в их основе может быть как прямое токсическое воздействие, так и иммунологический механизм. Являются антигенами, стимулирующими образование поликлональных антител. [c.634]

    Клоны с иммобилизованными антителами к -галактозидазе можно приготовить, как это описано в разд. 5.4, или использовать коммерческие препараты. Возможность повторного использования колонки зависит от свойств антител (моноклональных или поликлональных) и жесткости элюирующих растворов. Колонки с поликлональными антителами (полученные, как здесь описано) могут быть использованы более 20 раз без значительного уменьшения их связывающей способности. Колонка, содержащая 5 мг аффинноочищенных поликлональных антител к -галактозидазе, обычно связывает по меньшей мере 1 мг гибридного белка. [c.157]

    Получение моноклональных антител к полипептидному продукту генетически охарактеризованной открытой рамки считывания (ОРС) открывает широкие возможности для иммунохи-мического и функционального анализа такого продукта. Этот метод сложнее, чем описанный в предыдущей главе метод получения поликлональных антител к продукту ОРС, и должен рассматриваться скорее как дополнительный, а не альтернативный подход. Общая схема получения и использования моноклональных антител приведена на рис. 6.1. Мы настоятельно рекомендуем каждому исследователю получать и поликлональные, и моноклональные антитела. Основные преимущества моноклональных антител, а именно возможность получения их в неограниченном масштабе и высокая специфичность, очень существенны в том случае, когда возникает необходимость в углубленном исследовании продукта ОРС, а не просто в его выявлении. Наличие моноклональных антител облегчает количественный анализ продукта ОРС и часто дает возможность быстро получать его в биологически активной форме. Специфичность моноклональных антител также может быть использована для тонкого картирования их участков связывания (эпитопы) па молекуле полипептида — продукта ОРС эта информация дополняется данными о способности антител усиливать или подавлять биологическую активность продукта ОРС. [c.171]

    Моноклональные антитела могут эффективно использоваться в иммунопреципитации и в иммуноцитохимических методах. На ранних этапах наших исследований при использовании и того, и другого метода мы сталкивались с трудностями из-за повышенного фонового сигнала, который отсутствовал при использовании поликлональных антител. Нам удалось преодолеть эти затруднения в табл. 6.7 и 6.9 приводятся соответствующие методики, которые, как мы обнаружили, во многих случаях хорошо работают. [c.196]

    ТТХ-связывающие белки выделены из различных объектов головного мозга, клеток нейробластомы, нейронов моллюсков, аксонов кальмара и др. С помощью моно- и поликлональных антител.показано наличие общих антигенных детерминант у белков каналов, вьщеленных с помощью тетродотоксина, Им-мунохимические данные наряду с результатами офаниченного протеолиза и химической модификации молекул свидетельствуют в пользу трансмембранной модели потенциал-независимого натриевого канала. Доступность некоторых участков белка для иммуноглобулинов в липидных мембранах или липосомах подтверждает гипотезу о значительных конформационных перестройках молекулы натриевого канала под действием электрического поля. [c.250]

    Поликлональные антитела против GGT почек быка или GGT почек крысы (легкие формы) могут быть получены иммунизацией кроликов (самки, возраст 6—8 нед) путем инъекций в подушечки задних лап эмульсии, состоящей из 50 мкг фермента в 0,5 мл Na l-натрийфосфатного буфера с 0,5 мл полного стимулятора Фрейнда на животное. Через 2 нед вводят то же количество антигена (50 мкг GGT в 0,5 мл того же буфера), хорошо эмульгированного неполным стимулятором Фрейнда, подкожно в несколько мест шеи. Целесообразно повторить последнее введение еще через 2 нед. Через 10—15 сут берут пробы крови кролика инкубируют взятые пробы при 37 Х в течение 2 ч, затем оставляют на ночь при 4 °С и отделяют антисыворотку центрифугированием при 3000 g в течение 30 мин. В анализах методом двойной иммунодиффузии антисыворотка при разбавлении 1 128 (Na l-фосфатным буфером) все еще дает дуги преципи тации с разбавленной GGT (0,025 мг/мл). [c.153]

    В очень редких случаях может наблюдаться перекрестная реактивность моноклональных антител по отношению к неродственным антигенам. Это связано со сходным пространственным распределением зарядов, полярности и гидрофобности на отдельных участках таких молекул. Подобная ситуация реализуется, например, при взаимодействии эндорфинов и алкалоидов с одними и теми же клеточными рецепторами. Однако по отношению к моноклональным антителам перекрестная реактивность подобного рода наблюдается крайне редко. Размеры структур, распознаваемых моноклональными антителами, меньше, и распознаются они точнее, чем структуры, распознаваемые смесью поликлональных антител. Учитывая то, что антигенсвязывающий центр антител имеет полицентровую структуру, необходимо помнить, что направленность моноклональных антител к одному эпитопу и высокая специфичность не исключает возможности их перекрестной реактивности с эпитопами схожей химической структуры, хотя при этом обычно наблюдается различие констант связывания. [c.170]

    Поликлональные антитела, применявшиеся ранее в тестах на беременность, неизменно давали перекрестные реакции с LH, имеющимся в моче любой женщины, поэтому с помо1Цью этих тестов можно было надежно определять только высокие концентрации h G. Кроме того, аффинность специфичность поликлональных аятисывороток и содержание специфических антител в них изменялись от партии к партии в широких пределах. Развитие гибридомной технологии получения моноклональных антител [6 ] позволило решить проблемы, связанные со специфичностью и непостоянством свойств антисывороток. На базе моноклональных антител появилась возможность создания высокочувствительных тестов с использованием не только кон урентных, но и прямых сандвич -методов. [c.94]

    Антигенные детерминанты — это определенные участки трехмерной структуры иммуногенов и антигенов. Эти структуры способны взаимодействовать как со специфическими рецепторами лимфоцитов, индуцируя тем самым иммунный ответ, так и с антигенсвязывающими центрами специфических антител. Сложные антигены обладают множеством различных антигенных детерминант. Иммунизация такими антигенами приво-,111т к образованию поликлональных антител самой различной специфичности, которые можно обнаружить в антисыворотке. Одна детерминанта может быть образована 4—6 аминогруппами гли остатками сахаров. Тем не менее детерминанты могут бьпь чрезвычайно разнообразны по форме и распределению зарядов и способствовать развитию достаточно разнообразных ре-с кцип гуморального иммунного ответа. Действительно, специфические к одной определенной детерминанте антитела могут ( ыть клонально гетерогенны и при этом еще п значительно различаться по степени аффинности (см, разд. 4). [c.19]

chem21.info

Антитела поликлональные и моноклональны - Справочник химика 21

    В разделе изложены методы иммунизации животных и гибридизации клеток для получения поликлональных и моноклональных антител, методы получения препаративных количеств антител и их очистки, способы введения ферментных меток в антитела и антигены для использования в иммуноферментном анализе, способы введения радио-изотопных меток в антитела для радиоиммунного анализа, методы изучения антигенных свойств ферментов [c.307]     В иммуноферментном анализе используются поли- и моноклональные антитела как по отдельности, так и вместе. Относительная легкость получения поликлональных антител из антисывороток иммунизированных животных в ряде случаев дает возможность пренебречь их гетерогенностью. Однако разработка метода получения моноклональных антител — продуктов гибридных клеток — дала им огромные преимущества в иммунохимическом анализе в связи с уникальными свойствами, выгодно отличающими их от антисывороток. Использование моноклональных антител в иммуноферментном анализе дает возможность работать с практически неограниченным источником антител, однородных по молекулярным и иммунологическим свойствам. С их появлением открылись новые возможности для структурного изучения антигенов. Это связано с тем, что моноклональные антитела, продуцируемые гибридомами, связываются со специфическим участком на поверхности белковой молекулы — антигенной детерминантой и могут быть использованы в качестве селективных зондов на определенные структурные участки. [c.306]

    А — сэндвич >-анализ с поликлональными антителами стадия 1 — инкубация антигена с иммобилизованными антителами с последующей отмывкой несвязавшихся компонентов стадия II — добавление меченных ферментом антител, инкубация и отмывка несвязавшихся компонентов стадия III — детекция ферментативной активности Б — сэндвич>-ана-лиз с моноклональными антителами стадия 1 — инкубация антигена с моноклональными иммобилизованными антителами и конъюгатом антител с ферментом с последующей отмывкой всех несвязавшихся компо- [c.119]

    ИС - неочищенная сыворотка крови МАТ - моноклональные антитела ПАТ - поликлональные антитела  [c.301]

    Очистка антигена. Цитозольную фракцию из мозга свиньи (с. 379) пропускают через колонку с иммуносорбентом (1x2 см) в фосфатном буфере (pH 7,4) и колонку промывают тем же буфером. Элюцию проводят 2 М глициновым буфером (pH 2,8), фракции нейтрализуют 2 М трис-НС1 буфером, pH 8,6 Определяют концентрацию белка, цАМФ-связывающую активность (с. 331) она не должна быть ниже 12 нмоль/мг. Проверяют чистоту полученного препарата регуляторной субъединицы (м. м.=56 ООО Да) методом электрофореза (с. 119). Таким же способом, имея моноклональные или поликлональные антитела к соответствующим антигенам, можно получить гомогенные препараты этих антигенов. [c.325]

    По-видимому, предела чувствительности метода электропереноса с последующим ИФА достигнуть еще не удалось. Весьма вероятно, что доступную на сегодняшний день чувствительность в ближайшем будущем удастся заметно повысить за счет улучшения качества конъюгатов и использования более чувствительных субстратов. Применение нашей методики позволяет в системе [БСА — антитела против БСА] регистрировать антитела при их концентрации в растворе 10 нг/мл, а антиген-—в количестве 10 нг на 0,5-сантиметровую полоску. При этом мы используем кроличьи поликлональные антитела. Применение моноклональных антител для обнаружения антигенов патогенных паразитов позволяет повысить чувствительность обнаружения до 50 пкг. Полагают, что предел чувствительности обнаружения антигенов на блоте с помощью ИФА может достигать 10—20 пкг. Не исключено, что применение более чувствительной системы фермент—субстрат позволит выйти за рамки названных ограничений чувствительности метода. [c.351]

    В сыворотке иммунизированных животных всегда накапливаются продукты, секретируемые многими клонами В-лимфоцитов. Сывороточные антитела при любых схемах иммунизации представляют собой смесь молекул антител, гетерогенных по специфичности, аффинности и классовой принадлежности, вследствие чего имеется неизбежная перекрестная реактивность иммунных сывороток с разными антигенами. Перекрестная реактивность делает трудным или невозможным идентификацию уникальных антигенов. Моноклональные антитела, в отличие от поликлональных, являются продуктами потомков всего лишь одной В-клетки, и поэтому препараты моноклональных антител имеют особые свойства, вытекающие из небывалой степени биохимической гомогенности моноклональные антитела высокоспецифичны. Они направлены против одной и той же антигенной детерминанты моноклональные антитела стабильны как эталоны в отношении специфичности и аффинности (прочности связи с антигеном). Исследователь может целенаправленно подобрать моноклон, вырабатывающий антитела только нужного сорта , т. е. класса, подкласса, специфичности, аффинитета. [c.309]

    Для скрининга могут использоваться моноклональные антитела или поликлональная антисыворотка. [c.174]

    Для скрининга можно использовать моноклональные антитела или поликлональную сыворотку. [c.188]

    Реагенты этой товарной позиции представлены либо на подложке, либо в форме препаратов и содержат более одной составляющей. Например, они могут содержать примеси из двух или более реагентов или единичных реагентов, растворенных в растворах, кроме воды. Они могут также быть представлены в форме бумаги, пластиков или других материалов (используемых в качестве подложки или основы), пропитанных или покрытых одним или более диагностических или лабораторных реагентов, таких как лакмусовая, pH или pole-finding бумага (бумага для определения полярности) или предварительно покрытые иммуно-контрольные пластинки. Реагенты этой товарной позиции могут также быть упакованы в виде наборов, состоящих из нескольких компонентов, даже если один или более компонентов являются отдельными химически определенными соединениями группы 28 или группы 29, синтетическим красящим веществом товарной позиции 3204 или любым другим веществом, которое будучи представленным отдельно классифицируется в другой товарной позиции. Примерами таких наборов являются такие, которые используются для контроля глюкозы в крови, кетонов в моче и т.п., или такие, которые основаны на ферментах. Однако диагностические наборы, имеющие основные свойства продуктов товарной позиции 3002 или 3006 (например, основанные на моноклональных или поликлональных антителах), исключаются из этой товарной позиции. [c.391]

    Особенностью таких клеток является их способность размножаться и продуцировать антитела в искусственных условиях вне организма. С помощью специальных методой клонирования можно выделить одну гибридную клетку, которая, размножаясь, будет секретировать в неограниченных количествах антитела только одного вида — моноклональные антитела. Подчеркнем, что моноклональные антитела гомогенны как по специфичности, так и по физи-ко-химическим свойствам. Вопросы, связанные с получением поликлональных и моноклональных антител для иммунохимического анализа, подробно рассмотрены в гл. 5, 6. [c.12]

    Метод может быть использован для вычисления констант связывания как поликлональных, так и моноклональных антител. [c.163]

    Используя специфические связывающие свойства антител, исследователь может выбирать между двумя различными формами реагента, приготовленного на их основе это обычные поликлональные антисыворотки (или иммуноглобулиновые фракции, полученные из сыворотки) и моноклональные антитела (МКА). Препараты и тех, и других получают различными путями с различной целью выбор между ними осуществляется зачастую не произвольно, а в большой степени зависит от соответствия специфических свойств антител требованиям теста. [c.21]

    Специфичность моноклональных антител. Основным свойством, на котором основано применение моноклональных антител в иммуноанализе, является высокая специфичность взаимодействия. Поликлональные антисыворотки часто имеют высокую перекрестную реактивность, что делает затруднительным и даже невозможным [c.170]

    Использование моноклональных антител, направленных к двум различным антигенным детерминантам на антигене ( сэндвич -мо-дификация иммуноанализа), позволяет сократить время анализа. При употреблений поликлональных антисывороток иммуноанализ [c.171]

    В этой ситуации очень большое значение имеют хорошие теоретические и методические руководства. Настоящая книга (которая выходит в двух томах) относится к категории именно таких руководств. Она написана коллективом сотрудников отдела иммунологии медицинского колледжа Университета г, Бирмингем при участии сотрудников отдела клеточной иммунологии Оксфордского университета (Англия), Особенно ценным представляется то обстоятельство, что в книге обобщен собственный экспериментальный опыт авторов, и поэтому она представляет собой последовательное изложение основных методов получения поликлональных и моноклональных антител, характеристики антигенов и качественной и количественной оценки реакций антиген — антитело. [c.5]

    Альтернативные методы скрининга космидных библиотек, описанные в гл. 3, предполагают селекцию космидных клонов с использованием феномена гомологичной рекомбинации in vivo. Остальные главы книги посвящены вопросам, связанным с экспрессией клонированных генов. Для многих белков млекопитающих удалось осуществить высокопродуктивную внутриклеточную экспрессию в Е. oli. Однако гетерологические белки, локализующиеся в цитоплазме, часто образуют трудно растворимые агрегаты, что значительно осложняет получение нативного продукта. В гл. 4 описаны эффективные способы выделения активных растворимых продуктов из нерастворимых белков цитоплазмы Е. соИ. Вероятность деградации специфическими бактериальными протеиназами многих эукариотических белков, синтезируемых в Е. oli, может быть существенно снижена, если их экспрессировать в виде гибридных белков. Такие составные белки, в которых бактериальный компонент обычно представлен -галактозидазой, можно использовать в качестве иммуногенов для получения антисыворотки и моноклональных антител к клонированному эукариотическому белковому домену. Эти вопросы >ассматриваются в двух главах — одна посвящена получению поликлональной антисыворотки, а другая — методам гибридной технологии. В последующих главах книги описаны современные эукариотические экспрессирующие системы в гл. 7 — дрожжевая, далее в трех главах — системы на основе культивируемых клеток млекопитающих и трансгенные животные. В частности, описана система экспрессии с использованием векторов, которые несут гены, обеспечивающие возможность их индуцибельной амплификации это позволяет снимать токсическое действие антибиотиков, введенных в культуральную среду. Клонированные в таком векторе гены также [c.8]

    Свойства поликлональных антисывороток и моноклональных антител [c.21]

    Основной принцип ELISA — специфическое связывание первого антитела с мишенью. Если молекула-мишень представляет собой белок, то его очищенный препарат обычно используют для получения антител, при помощи которых затем и выявляют данную мишень. Антитела, которые образуются в сыворотке (антисыворотке) крови иммунизированного животного (обычно кролика), связываются с разными антигенными детерминантами (эпитопами) моле-кулы-мишени. Такую смесь антител называют поликлональным препаратом. Использование поликлональных антител имеет два недостатка, существенных для некоторых методов диагностики 1) содержание отдельных антител в поликлональном препарате может варьировать от одной партии к другой 2) поликлональные антитела нельзя применять, если необходимо различить две сходные мишени, т. е. когда патогенная (мишень) и непатогенная (не-мишень) формы различаются единственной детерминантой. Однако эти проблемы вполне разрешимы, поскольку сейчас научились получать препараты антител, выработанных к одной антигенной детерминанте, т. е. препараты моноклональных антител. [c.184]

    В медицине моноклональные антитела применяют прежде всего для диагностики различных заболеваний. Такие бактериальные заболевания, как кокковые, паразитарные инфекции, малярия, а также грибки хламидии, при помощи мкАТ диагносцируются гораздо точнее, чем другими, традиционными методами. В вирусологии использование мкАТ дало возможность разработать условия антигенного анализа вирусов гораздо более информативного, чем при использовании поликлональных антител. Этот метод позволил получить уникальную информацию об антигенных детерминантах ДНК- и РНК-содержащих вирусов и их изменчивости. В частности, были идентифицированы антигенные детерминанты вирусов гриппа, полиомиелита, гепатита А и др. [c.495]

    Поликлональные или моноклональные, либо их комбинация в качестве первых и вторых антител [c.28]

    При ТОЛЬКО что описанной процедуре исходные антитела (анти-Х) продуцируются всей иммунной системой кролика. Следовательно, эти антитела поликлональны, ибо их вырабатывают лимфоциты, обладающие разной степенью специфичности по отношению к X. Моноклональные антитела, вырабатываемые-клетками-потомками одного лимфоцита, можно получить соответствующим скринингом, отобрав лимфоциты желательной специфичности. Получение моноклональных антител обещает сильно увеличить специфичность иммуноцитохимических методов идентификации нейроактивных веществ в нейронах. Кроме того, этот общий метод можно приспособить для еще более тонких измерений, таких как визуализация специфической РНК, в которой закодирован синтез определенного пептида или белка (см. гл. 4). [c.221]

    Как и следует ожидать от системы, работающей по принципу клональной селекции, даже одиночная антигенная детерминанта будет, как правило, активировать много различных клонов с поверхностными рецепторами, обладающими разным сродством к данной детерминанте. Напрнмер, даже сравнительно простая структура ДНФ-группы обеспечивает возможность многих различных взаимодействий, н, когда эта группа связана с белком-носителем, она обычно стимулирует выработку сотен различных видов антител к ДНФ, каждый нз которых является продетом отдельного клона В-клеток. Такой ответ называют поликлональным. Когда реагируют лишь несколько клонов, ответ называют олигоклональным, а когда весь ответ сводится к реакции лишь одного клона В- нли Т-клеток, его называют моноклональным. Ответы на большинство антигенов поликлональны. [c.14]

    Эффективность аффинной хроматофафии зависит преимущественно от выбора лиганда или акцептора, который определяет природу вьщеляемого мембранного белка. Существенным фактором в этом случае является сродство лиганда к рецептору, и поэтому самыми эффективными лигандами оказываются специфические блокаторы или антагонисты нейрорецепторных белков. Иногда для вьщеления конкретного белка используют две или три ступени аффинной хроматофафии на разных сорбентах и с разньаш лигандами. Получили широкое распространение методы иммуноаффинной хроматографии, в которых в качестве лиганда используется поликлональные или моноклональные антитела, полученные к компонентам рецептора. [c.268]

    Клоны с иммобилизованными антителами к -галактозидазе можно приготовить, как это описано в разд. 5.4, или использовать коммерческие препараты. Возможность повторного использования колонки зависит от свойств антител (моноклональных или поликлональных) и жесткости элюирующих растворов. Колонки с поликлональными антителами (полученные, как здесь описано) могут быть использованы более 20 раз без значительного уменьшения их связывающей способности. Колонка, содержащая 5 мг аффинноочищенных поликлональных антител к -галактозидазе, обычно связывает по меньшей мере 1 мг гибридного белка. [c.157]

    Наиболее простой способ снятия неспецифического фонового излучения состоит в использовании твердофазных вариантов метода. В качестве твердой фазы берут пблистирольные пробирки, микропланшеты, полиакриламидные шарики. Иммобилизация антител (моноклональных или поликлональных) на полистироле осуществляется методом нековалентной физической адсорбции, а в случае полиакриламидных частиц — ковалентным связыванием. Различие в способах иммобилизации обусловливает некоторые различия в свойствах иммобилизованных антител. Из. всех перечисленных носителей полиакриламидные шарики, как правило, обеспечивают. повышенную стабильность и иммунореактивность иммобилизованных антител, более быструю кинетику специфического взаимодействия, что улучшает точность анализа и его воспроизводимость. [c.142]

    Получение моноклональных антител к полипептидному продукту генетически охарактеризованной открытой рамки считывания (ОРС) открывает широкие возможности для иммунохи-мического и функционального анализа такого продукта. Этот метод сложнее, чем описанный в предыдущей главе метод получения поликлональных антител к продукту ОРС, и должен рассматриваться скорее как дополнительный, а не альтернативный подход. Общая схема получения и использования моноклональных антител приведена на рис. 6.1. Мы настоятельно рекомендуем каждому исследователю получать и поликлональные, и моноклональные антитела. Основные преимущества моноклональных антител, а именно возможность получения их в неограниченном масштабе и высокая специфичность, очень существенны в том случае, когда возникает необходимость в углубленном исследовании продукта ОРС, а не просто в его выявлении. Наличие моноклональных антител облегчает количественный анализ продукта ОРС и часто дает возможность быстро получать его в биологически активной форме. Специфичность моноклональных антител также может быть использована для тонкого картирования их участков связывания (эпитопы) па молекуле полипептида — продукта ОРС эта информация дополняется данными о способности антител усиливать или подавлять биологическую активность продукта ОРС. [c.171]

    Моноклональные антитела могут эффективно использоваться в иммунопреципитации и в иммуноцитохимических методах. На ранних этапах наших исследований при использовании и того, и другого метода мы сталкивались с трудностями из-за повышенного фонового сигнала, который отсутствовал при использовании поликлональных антител. Нам удалось преодолеть эти затруднения в табл. 6.7 и 6.9 приводятся соответствующие методики, которые, как мы обнаружили, во многих случаях хорошо работают. [c.196]

    Иммунологические методы пгароко используются для идентификации мембранных компонентов, их локализации, оценки количества, выделения. Это методы получения поликлональных и моноклональных антител к компонентам мембран, иммуно-блоттинг (электрофорез в полиакриламидном геле в присутствии додецилсульфата на рия с перенесением разделенных белков на нитроцеллюлозные фильтры для последуюп] его выявления с по- [c.202]

    В очень редких случаях может наблюдаться перекрестная реактивность моноклональных антител по отношению к неродственным антигенам. Это связано со сходным пространственным распределением зарядов, полярности и гидрофобности на отдельных участках таких молекул. Подобная ситуация реализуется, например, при взаимодействии эндорфинов и алкалоидов с одними и теми же клеточными рецепторами. Однако по отношению к моноклональным антителам перекрестная реактивность подобного рода наблюдается крайне редко. Размеры структур, распознаваемых моноклональными антителами, меньше, и распознаются они точнее, чем структуры, распознаваемые смесью поликлональных антител. Учитывая то, что антигенсвязывающий центр антител имеет полицентровую структуру, необходимо помнить, что направленность моноклональных антител к одному эпитопу и высокая специфичность не исключает возможности их перекрестной реактивности с эпитопами схожей химической структуры, хотя при этом обычно наблюдается различие констант связывания. [c.170]

    Поликлональная антисыворотка может содержать до 10 ООО различных типов молекул IgG. Напротив, все молекулы моноклональных антител должны быть идентичными. Моноклональные антитела предпочтительнее в методах конкурентного иммуноанализа, поскольку в этом случае можно утверждать, что меченый или связанный с твердой фазой антиген и определяемое вещество конкурируют за один и тот же центр связывания. Моноклональные антитела очень хорошо работают в сандвич -анализе, поскольку, как правило, хорошо известна специфичность их эпитопов. Такие антитела легко получать в больших количествах и с высокой степенью чистоты. Большинство нативных антител бивалентны, и все они моноспецифичны. Недавно с помощью гибридных гибридсяк и методов генной инженерии получены новые типы антител. Антитела MOiyT быть мечены или связанными с твердой фазой с помощью пассивной адсорбции или за счет ковалентных связей. [c.10]

    Поликлональные антитела, применявшиеся ранее в тестах на беременность, неизменно давали перекрестные реакции с LH, имеющимся в моче любой женщины, поэтому с помо1Цью этих тестов можно было надежно определять только высокие концентрации h G. Кроме того, аффинность специфичность поликлональных аятисывороток и содержание специфических антител в них изменялись от партии к партии в широких пределах. Развитие гибридомной технологии получения моноклональных антител [6 ] позволило решить проблемы, связанные со специфичностью и непостоянством свойств антисывороток. На базе моноклональных антител появилась возможность создания высокочувствительных тестов с использованием не только кон урентных, но и прямых сандвич -методов. [c.94]

    Я надеюсь, что предлагаемое читателю двухтомное руководство будет полезно как желающим овладеть технологией получения поликлональных или моноклональных антител, так и более широкому кругу ученых, студентов и лаборантов, нуждающихся в методическом руководстве по использованию антител. Как это принято в серии Методы , главы, расска- [c.6]

chem21.info


Смотрите также