Чем опасно носительство вируса гепатита С? Носитель антител


что это значит, может ли заразить и чем отличается от больного?

Инфекционные заболевания, которые поражают такой важный орган, как печень, довольно часто ведут к развитию печеночной недостаточности и, как следствие, летальному исходу пациента. Поэтому большое внимание как врачей, так и других медицинских специалистов отводится именно профилактике, ранней диагностике и правильному лечению этих заболеваний.

Совет от гепатологов

В 2012 году произошёл прорыв в лечении гепатита C. Были разработаны новые противовирусные препараты прямого действия, которые с вероятностью 97% полностью избавляют вас от заболевания. С этого момента гепатит С официально считается полностью излечимым заболеванием в медицинском сообществе. В Российской Федерации и странах СНГ препараты представлены марками софосбувир, даклатасвир и ледипасвир. В настоящий момент на рынке появилось очень много подделок. Лекарства надлежащего качества можно приобрести только у компаний, имеющих лицензии и соответствующую документацию. Перейти на сайт официального поставщика >>

Заразиться вирусом гепатита может любой человек вне зависимости от возраста и пола. Высокий процент встречаемости недуга среди людей, которые являются как заболевшими лицами, так и бессимптомными носителями вируса, которые могут заразить других. Это связано с некоторыми обстоятельствами:

  1. гепатитВысокое число манипуляций, связанных с повреждением кожных покровов, а также внедрением в полости организма (медицинские манипуляции, косметические процедуры, гинекологические осмотры, стоматологические процедуры и т.д.).
  2. Отсутствие формирования как врожденного, так и приобретенного иммунитета к вирусам гепатита.
  3. Ограниченный контингент лиц, которые подвергаются вакцинации от других вирусов гепатита, а соответственно и не имеют антител против вируса.
  4. Бессимптомное и латентное течение некоторых форм вирусного заболевания, что не позволяет точно определить заболевание без специальных лабораторных исследований.

Гепатит С – это вирусное воспалительное заболевание печени, которое вызывается соответствующим вирусом, в большинстве случаев протекает бессимптомно и латентно, постепенно ведет к печеночной недостаточности и смерти пациента.

Заболевание часто может принимать хроническую форму течения – периоды обострения болезни, чередуются с периодами ремиссии (условного выздоровления).

Третья форма – носительство вируса гепатита С. Это состояние, при котором конкретный обследуемый человек имеет лабораторно подтвержденное наличие вируса в крови или ткани печени, однако не имеет выраженных признаков заболевания. Значит, что наибольшая опасность такого состояния заключается в возможности развития недуга не только у пациента, но и заражения окружающих его людей:

  • гепатит сострое развитие гепатита из-за воздействия неблагоприятных факторов окружающей среды, стресса или развития другой инфекции;
  • носительство вируса – это риск заражения окружающих людей в случае профессиональной деятельности (работники сферы косметологии, парикмахерских, тату-салонов, медицинские работники), при донорстве крови, ее компонентов или костного мозга и органов.

К сожалению, установить сам факт, что человек – носитель гепатита С крайне непросто. Это связано с тем фактом, что сам по себе гепатит С протекает латентно – то есть симптомы заболевания не свидетельствуют в большинстве случаев о том, что поражена именно печень, а имитируют незначительный инфекционных процесс. Само носительство априори подразумевает отсутствие, каких-либо проявлений заболевания.

Как диагностируется такое состояние?

Диагностика состояния носительства вируса гепатита С имеет ряд сложностей, которые носят не медицинский, а организационных характер. Главная проблема заключается в том, что вывить факт такого состояния можно, лишь проведя ПЦР крови с целью выявить РНК (HCV RNA) вируса, что подтверждает факт репликации вируса в организме человека.

рнаИсследование антител крови, которое проводится чаще всего у разных категорий пациентов, также может дать подсказку врачу, что следует заподозрить носительство вирусного гепатита С.

Однако само наличие антител, без выраженной клинической картины и нарушения функционального состояния печени (что в свою очередь также подтверждается биохимическими исследованиями) может лишь свидетельствовать о кратковременном контакте организма с таким вирусом, который закончился уничтожением инфекционного агента иммунитетом человека (такое состояние может наблюдаться при недостаточной концентрации возбудителя, который попал в кровь).

Это значит, что такие пациенты обычно не могут заразить окружающих.

Таким образом, наличие антител в крови пациента без проведения ПЦР реакции для выявления РНК вируса гепатита С не может точно ответить на вопрос – является ли пациент носителем заболевания или нет.

Носитель гепатита С при незнании данного факта часто может неумышленно заразить большое число людей.

Тем не менее, назначение лабораторных исследований для выявления антител к вирусам гепатита у таких категорий населения, как беременные женщины, стационарные больные, длительно болеющие дети, пациенты с иммунодефицитными состояниями, люди, контактирующие с больными гепатитами, которые чаще всего и могут быть носителями гепатита С, является быстрым и незаменимым методом.

Избавление от гепатита C. Моя история!

Недавно я прочитала статью, в которой рассказывается о примененнии комплекса препаратов  "СОФОСБУВИР & ДАКЛАТАСВИР" для лечения гепатиат Ц. При помощи данного комплекса можно НАВСЕГДА избавиться от ГЕПАТИТА C.

Я не привыкла доверять всякой информации, но решила проверить и заказала. Препараты не дешевые, но жизнь ДОРОЖЕ! Никаких побочных действий от приема я на себе не ощущала, уже думала что все зря, но месяц спустя — сдала анализы и ПЦР не обнаружен, не обнаружен уже после месяца лечения!!! Кардинально улучшилось настроение, снова появилось желание жить и радоваться жизни! Лекарства я принимала в течении 3 месяцев и в результате вирус УШЕЛ. Попробуйте и вы, а если кому интересно, то ниже ссылка на статью.

Читать статью -->

Профилактика и лечение гепатита С

Мероприятия по предупреждению развития такого состояния, как носительство гепатита С и, как следствие, развития заболевания или повышенного шанса заразить другого человека, несложные. Профилактические меры можно объединить в такие группы:

  1. гепатитСоблюдение стерильности в медицинских учреждениях, косметических салонах, парикмахерских, тату-салонах и т.д.

    Проверить факт регулярной уборки и обработки поверхностей и инструментария, которые контактируют с телом, может непосредственно и сам человек путем расспроса персонала о том, каким образом проводятся данные мероприятия, подтверждения наличия специальных стерилизаторов (автоклавов, сухожаровых шкафов) для стерилизации инструментария, типа используемых антисептиков, наличия у персонала медицинских книг.

  2. Использование одноразового инструментария, который непосредственно повреждает кожу или проникает в полости человеческого организма (инъекционные и тату иглы, катетеры и т.д.). Такой факт также легко проверить – открытие неповрежденной упаковки таких средств должно проводиться при пациенте или клиенте учреждения. По сути, внедрения одноразовых инструментов в медицинскую практику и позволило снизить риск заражения пациентов практически до минимума.
  3. гепатитИспользование контрацептивов барьерного типа, которые охватывают максимальную площадь слизистой оболочки половых органов (презервативы, фемидомы (женские презервативы) и т.д.). Однако в целом риск заражения вирусом гепатита С при половом акте крайне низок, по сравнению с парентеральным путем.
  4. Профилактические осмотры и лабораторные исследования антител крови. Также тщательное исследование доноров и компонентов крови, которые будут применяться для переливания человеку на наличие вируса гепатита С.

Лечение носительства вируса гепатита С, если нет изменений печени и клинической картины, не проводится. Больному назначается поддерживающая терапия, диета, гепатопротекторы.

Вам все еще кажется, что победить Гепатит С невозможно?

Судя по тому, что вы сейчас читаете эти строки - победа в борьбе с Гепатитом С пока не на вашей стороне...

И вы уже принимали токсичные препараты, у которых было куча побочек? Оно и понятно, ведь игнорирования болезни, может привести к тяжелым последствиям. Усталость, потеря веса, тошнота и рвота, желтоватый или сероватый оттенок кожи, горечь во рту, ломота в теле и в суставах... Все эти симптомы знакомы вам не понаслышке?

Эффективное средство от Гепатита С существует. Перейдите по ссылке и узнайте, как вылечила Гепатит С у себя Ольга Сергеева...

Якутина Светлана

Якутина Светлана

Эксперт проекта VseProPechen.ru

Статья помогла вам?

Дайте нам об этом знать - поставьте оценку

Загрузка...

vsepropechen.ru

Носительство антител Гепатита С - 2 ответа

Людмила, Брянск

4 ноября 2017

Здравствуйте!7 лет назад, во время беременности, мне поставили диагноз "Носительство HCV". Ребенок родился здоровым, без антител Гепатита С. Первые 3 года (сейчас 1 раз в год) я каждые полгода сдавала ПЦР РНК Гепатита С. Результат всегда был "не обнаружено". При этом Anti HCV всегда оставался положительным. Биохимия, фиброскан, УЗИ печени – в норме.По прошествии 3-4 лет с момента, когда я узнала о своем диагнозе доктор говорил, что вирус может у меня в крови и быть, но только «спать». И такого теста, который определял бы есть вирус в крови, но он «спит» или он «ушел совсем» - нет… В прошлом году, при сдаче анализа AntiHCV в различных лабораториях (я сдавала 5 анализов в 4 лабораториях в течение месяца), только 1 результат был положительным, а остальные 4 (из 3-х других лабораторий, в одной я сдавала дважды) были отрицательными. Сдача ПЦР РНК – результат «не обнаружено». При обращении в инфекционную больницу по месту жительства врач-гепатолог объяснил это тем, что скорее всего тесты, на которых проводилось исследование были не очень высокой чувствительности…Год назад гепатолог объяснил мне , что диагноза "носительство HCV" в медицине нет, и указал , что я являюсь "носителем антител HCV". Также доктор пояснил, что я не являюсь "опасной" для окружающих и не могу никого заразить, в том числе и своего полового партнера, потому как антитела не передаются. Но в интернете, на различных порталах, я нахожу информацию о том, что носитель антител Гепатита С тоже является «опасным». Как нахожу и такую информацию, что «не опасен». Также слышу мнение некоторых людей, что даже если человек носит антитела, то он все равно потом будет болен Гепатитом С. Он может быть носителем 10, 20 и 30 лет, но итог один – Гепатит С , далее цирроз и рак печени. Помогите разобраться….

Ответьте мне, пожалуйста, на следующие вопросы:1. При незащищенном половом акте, могу ли я заразить своего партнера? Также нигде не нашла информации - какова вероятность заражения при оральном сексе?2. Возможно ли заразить партнера при поцелуе, если у здорового партнера на губах герпес?3. Если моим маникюрным инструментом, бритвой, зубной щеткой кто-то воспользуется, то какова вероятность заражения?4. Иногда читаю на форумах, что со временем ПЦР может стать положительной . Все-таки, при моем диагнозе может случиться так, что через какое-то время я заболею Гепатитом С, с вытекающими последствиями? Или тот диагноз, который у меня сейчас имеется не может спровоцировать заболевание? 5. Также читаю, что люди сдают кровь на несколько видов антител к ВГС. Я всегда сдавала только анализ - Anti HCV. Нужно ли мне сдавать еще какие-то?6. Нужно ли мне придерживаться диеты (стараюсь меньше употреблять жирной пищи)? Как относиться к алкоголю – отказаться полностью или по каким-то поводам можно, в каком количестве, как часто?7. Кто такой вирусоноситель Гепатита С и человек болеющий Гепатитом С, или это одно и тоже?8. Вирус в моем организме все-таки присутствует, но не проявляет никакой активности , или его нет? Если присутствует, то что может спровоцировать вирус на проявление активности?9. Как часто нужно делать УЗИ печени, фиброскан, сдавать анализ на биохимию?10. В 2010 году делала прививку от Гепатита В. Что делала 2 раза из 3-х помню отлично, а как приходила в третий раз не помню. Пришла в поликлинику уточнить, но к сожалению у них нет никакой информации о том, что я ее делала. Если все-таки в 2010 году прививка была сделана, а я не помню , и если я сделаю ее сейчас, то не наврежу себе? Через какое время нужно проводить ревакцинацию против Гепатита В?

Вопрос закрыт

Без вознаграждения

sprosivracha.com

Что такое носительство антител гепатита с. Что делать при гепатите. IzlechiSebya.ru

Главная » Что делать при гепатите

Носительство гепатита С - это очень опасно? Нужно лечение? Он передаётся по наследству?

Мария Шестова Мастер (1320) 5 лет назад

да, опасно да, нужно лечение передается при контакте с зараженной кровью

Татьяна Мыслитель (7814) 5 лет назад

Гепатит С называют ласковым убийцей , лечение необходимо, и по наследству передается и заразен при половых отношениях в 100%

HerpesZoster Мыслитель (7668) 5 лет назад

Да опасно. Разумеется нужно лечить. По наследству не передаётся, разве что может половым путём (с кровью).

Ольга Мудрец (11978) 5 лет назад

Такого диагноза не существует. Есть носительство антител к гепатиту С, это, когда антитела есть, а вирус в крови не определяется. Антитела - это защитная реакция организма и они говорят лишь о том, что организм сталкивался с вирусом, в результате чего могло произойти самоизлечение (примерно 15% бывает при гепатите С, в остальных случаях гепатит С хронизируется). По наследству антитела не передаются. Но, если обнаруживаются антитела (при нелеченном гепатите, а самопроизвольном излечении). то нужно наблюдаться и сдавать периодически (прим. раз в год) кровь на РНК вируса гепатита С методом ПЦР.

При носительстве антител лечения не требуется. Т. к антитела, как правило, остаются на всю жизнь, как свидетельство того, что организм сталкивался с вирусом. В этом нет ничего страшного. Антитела - это не ВИРУС.

И ещё раз, для таких, как некоторые вышеотписавшиеся. Гепатит С не смертельное заболевание. С гепатитом С можно прожить довольно долгую жизнь, а умереть от кирпича, свалившегося на голову. И он вполне излечим. При помощи современных противовирусных таблеток и препаратов интерферона. Он лечится и вполне успешно. И половым путём он передаётся КРАЙНЕ редко. Примерно в 5% случаях. Основной путь передачи - заражённая кровь. Заразиться можно при медицинских манипуляциях (стоматология, гинекология, операции). Ещё в группе особого риска инъекционные наркоманы.

Носительство не опасно для самого носителя. А вот донором он быть не может. И, лучше предохраняться.

Лариса Седюко Профи (641) 5 лет назад

У носителя гепатита С в первую очередь разрушается печень и ее нужно поддерживать в рабочем состоянии. Гепатит передается половым путем и через кровь

Лиза Просветленный (47991) 5 лет назад

носительство чревато последствиями - может развиться сам гепатит и цирроз, передается в тату салонах, трансмисионно - у гинекологов, стоматологов, хирургов, при использовании одной иглы у наркоманов. через грудное молоко. лечение во время беременности мне кажется не стоит поскольку химиотерапия тяжело переноситься. но все зависит от стадии и теченя

AlexeY Мудрец (17332) 5 лет назад

Как правило, наличие вируса гепатита С в крови очень долгое время не приносит никаких осложнений. Можно вообще не замечать его присутствия, если не делать специальные анализы. Однако со временем (порой через десятилетия! ) у 25% хронически больных гепатитом С ( носительство вируса гепатита С) - вирус приводит к серьезным заболеваниям. Как в печени, так и вне нее. Необходимость противовирусной терапии определяется по результатам обследований. Решение о начале лечения принимают при наличии патологических процессов в печени или при появлении внепеченочных проявлений вируса. По наследству вирус не передается. Он передается только с кровью. И может попасть в организм ребенка от инфицированной матери при травматичных родах. Этот риск оценивают в 5-7%. От отца вирус не передастся никак.

Источник: http://www.hcv.ru/forum/ - Вирусные гепатиты. Информация, форум для общения больных, консультации практикующих гепатологов

Алевтина Бодунова Ученик (200) 5 лет назад

Да опасно. передается при контакте с зараженной кровью

Вопрос по такой теме:

Носительство гепатита С - это очень опасно? Нужно лечение? Он передаётся по наследству?

Ответ №1Http://www.gepatit.com/c/infect.php вот ссылка там все подробно описывается за сайт ручаюсь.

Ответ №2да,опасно да,нужно лечение передается при контакте с зараженной кровью

Ответ №3Гепатит С называют ласковым убийцей , лечение необходимо, и по наследству передается и заразен при половых отношениях в 100%

Ответ №4Да опасно. Разумеется нужно лечить. По наследству не передаётся, разве что может половым путём(с кровью).

Ответ №5Такого диагноза не существует. Есть носительство антител к гепатиту С, это, когда антитела есть, а вирус в крови не определяется. Антитела - это защитная реакция организма и они говорят лишь о том, что организм сталкивался с вирусом, в результате чего могло произойти самоизлечение (примерно 15% бывает при гепатите С, в остальных случаях гепатит С хронизируется). По наследству антитела не передаются. Но, если обнаруживаются антитела (при нелеченном гепатите, а самопроизвольном излечении), то нужно наблюдаться и сдавать периодически (прим. раз в год) кровь на РНК вируса гепатита С методом ПЦР. При носительстве антител лечения не требуется. Т.к антитела, как правило, остаются на всю жизнь, как свидетельство того, что организм сталкивался с вирусом. В этом нет ничего страшного. Антитела - это не ВИРУС. И ещё раз, для таких, как некоторые вышеотписавшиеся. Гепатит С не смертельное заболевание. С гепатитом С можно прожить довольно долгую жизнь, а умереть от кирпича, свалившегося на голову. И он вполне излечим. При помощи современных противовирусных таблеток и препаратов интерферона. Он лечится и вполне успешно. И половым путём он передаётся КРАЙНЕ редко. Примерно в 5% случаях. Основной путь передачи - заражённая кровь. Заразиться можно при медицинских манипуляциях (стоматология, гинекология, операции). Ещё в группе особого риска инъекционные наркоманы.

Ответ №6Носительство не опасно для самого носителя. А вот донором он быть не может. И, лучше предохраняться.

Оставить комментарий

Гепатит – это надолго

19 мая 2010 года, 19:55

Иллюстрация с сайта speaking-up.com

Заболеваемость вирусными гепатитами B и С - одна из наиболее серьезных проблем российского здравоохранения. По приблизительным оценкам, в стране насчитывается несколько миллионов носителей этих инфекций, число же получающих необходимое лечение составляет несколько тысяч, и вряд ли увеличится в ближайшее время. Эпидемии вирусных гепатитов в России была посвящена пресс-конференция, состоявшаяся в Москве во вторник, 18 мая. В мероприятии, приуроченном к Международному дню борьбы с гепатитом (отмечается 19 мая) приняли участие глава Федерального центра по профилактике и борьбе со СПИДом Вадим Покровский и руководитель научно-консультативного центра ЦНИИ эпидемиологии Роспотребнадзора Владимир Чуланов.

Эпидемиология и экономика

Заболевания, вызванные вирусами гепатита B и С развиваются медленно и во многих случаях остаются не выявленными на протяжении десятков лет. У значительной части больных инфекция принимает хроническую форму, ведущую к циррозу и раку печени. Бессимптомное носительство вирусных гепатитов также небезобидно: сохраняющаяся в организме инфекция может активизироваться и привести к развитию заболевания, кроме того, носитель вируса, не подозревая об этом, представляет опасность для окружающих, в первую очередь #8211; для родных и близких.

Вадим Покровский, фото пресс-службы Bristol-Myers Squibb

Участники конференции привели различные данные относительно числа инфицированных вирусными гепатитами россиян. По оценкам Вадима Покровского, в стране насчитывается от 5 до 7 миллионов носителей вирусного гепатита C, доля больных, у которых эта инфекция переходит в хроническую форму, достигает 80 процентов. Хроническим гепатитом B, по расчетам Покровского, страдают не менее миллиона россиян.

По словам Владимира Чуланова, результаты эпидемиологических исследований в Москве свидетельствуют о том, что носителями вируса гепатита B являются около 2 процентов населения города. Экстраполяция этих данных на все население РФ дает 3 миллиона носителей. Впрочем, по признанию Чуланова, существуют и менее оптимистичные оценки, согласно которым число инфицированных может составлять от 6 до 8 миллионов человек. У многих больных присутствуют сразу обе инфекции, что серьезно осложняет лечение. Кроме того, заражение вирусными гепатитами часто сочетается с ВИЧ-инфекцией.

Имеющиеся сейчас данные о числе инфицированных говорят о том, что эпидемический процесс по-прежнему не взят под контроль, считает Покровский. Между тем, распространение вирусных гепатитов оказывает существенное негативное влияние на продолжительность жизни россиян, сказывается на трудоспособности взрослого населения и, в конечном итоге, наносит ощутимый экономический ущерб.

Не только наркомания

Заражение вирусными гепатитами происходит при контакте с кровью и биологическими жидкостями инфицированного человека. Наиболее опасен в этом отношении вирус гепатита B, способный долгое время сохраняться во внешней среде и достаточно устойчивый к температурными воздействиям. Вероятность заражения этой инфекцией при незащищенном сексе, внутривенном введении наркотиков и любых манипуляциях и медицинских вмешательствах, связанных с нарушением целостности кожных покровов, многократно превосходит риск заражения ВИЧ.

На протяжении многих лет основной движущей силой эпидемии вирусных гепатитов, равно как и эпидемии ВИЧ/СПИДа, была наркомания. Однако сейчас ситуация быстро меняется: быстро растет число заразившихся ВИЧ и вирусными гепатитами при гетеросексуальных контактах. По данным Покровского, среди вновь выявленных носителей гепатита B доля этого пути передачи инфекции достигает 40 процентов. Чаще всего таким образом заражаются молодые женщины, вступавшие в интимные отношения с мужчинами, употреблявшими или продолжающими употреблять наркотики.

Весомый вклад в распространение вирусных гепатитов вносят и медицинские учреждения. По оценкам Покровского, до 10 процентов инфицированных гепатитом B были заражены при различных медицинских вмешательствах. Доля таких людей среди больных гепатитом С еще выше. Многие медицинские учреждения по-прежнему не соблюдают официально действующие в стране правила предупреждения передачи инфекции, то есть экономят на стерилизации оборудования и многократно используют одноразовые инструменты, поясняет Покровский. Точно так же экономят на безопасности клиентов салоны татуировок и косметологические салоны. В такой ситуации, считает глава Федерального центра по борьбе со СПИДом, Роспотребнадзору следовало бы ужесточить наказания за предоставление населению небезопасных услуг. Однако, полагает Покровский, эффективность надзорных мероприятий остается невысокой, поскольку ведомство Геннадия Онищенко лишено возможности проверять медицинские учреждения без предварительного предупреждения.

Профилактика для миллионов

Впрочем, в борьбе с вирусными гепатитами есть и серьезные достижения. В течение многих лет в России проводится вакцинация против гепатита B: прививки в обязательном порядке получают дети первых месяцев жизни, а также некоторые группы взрослого населения, отнесенные государством к группе повышенного риска по этой инфекции (медработники, военные и т.д.). За время вакцинации было привито в общей сложности 62 миллиона жителей России, то есть почти 40 процентов населения.

Владимир Чуланов, фото пресс-службы Bristol-Myers Squibb

По данным Владимира Чуланова, массовая иммунизация населения приносит ощутимые результаты: если в 2000 году в России было выявлялось 40 случаев острого гепатита B на 100 тысяч жителей, то сейчас этот показатель снизился до 2,7 случаев на 100 тысяч человек в год. Впрочем, иммунизация пока что не сказалась на числе случаев хронического гепатита B и хронического носителя этой инфекции. Хроническое заболевание, вызванное инфекцией, в настоящее время выявляется ежегодно у 15 человек на 100 тысяч, носительство #8211; у 30 на 100 тысяч. Эти цифры остаются стабильными на протяжении многих лет. Такая ситуация связана с большим числом людей, заразившихся до начала вакцинации, которых выявляют спустя многие годы после заражения в результате случайных обследований, поясняет Чуланов.

Лечение - для богатых

По словам экспертов, современная медицина располагает целым рядом эффективных лекарств для лечения вирусных гепатитов. Для борьбы с инфекциями используются пегилированные альфа-интерфероны, воздействующие на иммунную систему больного, а также противовирусные препараты, воздействующие непосредственно на возбудитель заболевания. Использование новых методов лечения позволило в разы повысить его эффективность и снизить вероятность развития лекарственной устойчивости.

Впрочем, стоят современные лекарства недешево. Месячный курс наиболее эффективных противовирусных препаратов для лечения гепатита B обходится в 700 долларов в месяц. 12-месячный курс лечения гепатита С может стоить более 1,5 тысяч долларов в месяц.

Полностью обеспечить нуждающихся в лечении необходимыми лекарствами государство в настоящее время не в состоянии. Сейчас, по словам Вадима Покровского, бесплатные медикаменты получают всего несколько тысяч пациентов с хроническими гепатитами. С учетом экономических реалий рассчитывать на то, что в ближайшее время их число заметно возрастет, не приходится.

Поделитесь с друзьями

Источники: http://otvet.mail.ru/question/63950127, http://gepatitik.ru/articles/chto-takoe-nositelstvo-gepatita-s/, http://medportal.ru/mednovosti/main/2010/05/19/hepday/

Комментариев пока нет!

www.izlechisebya.ru

Диагностическое значение иммуноглобулинов как носителей антител при серологической диагностике бруцеллеза

Серологическая диагностика бруцеллеза является самой распространенной в ветеринарной практике.

В продолжение всей истории борьбы с бруцеллезом сельскохозяйственных животных серологические методы диагностики заболевания находятся в состоянии совершенствования старых методов и разработки новых. К настоящему времени широко экспериментируется или уже регламентируется в инструкциях некоторых стран ряд новых методов.

Поиски более совершенных методов обусловливаются необходимостью полного выявления в неблагополучных стадах и отарах всех инфицированных животных, так как до настоящего времени, как правило, не удается серологическая дифференциация здоровых животных от больных.

Скрытое бруцеллоносительство, при котором не бывает антител в крови животных, сильно выраженное количественное и качественное колебание бруцеллезных антител в крови животных в период инфекционного процесса и после него, появление у животных поствакцинальных антител, возникающих после вакцинации вакциной из штамма № 19 или другими агглютиногенными или слабоагглютиногенными вакцинами, а также влияние на образование антител возраста, физиологического состояния животных и другие факторы вызывают необходимость в повторном применении на практике методов прямой и дифференциальной диагностики бруцеллезных антител.

Существенное значение для совершенствования серологической диагностики вообще и серологической диагностики бруцеллеза в частности имеет разрабатываемая в последнее десятилетие иммунологическая классификация сывороточных глобулинов — носителей антител. По этой классификации иммунные глобулины человека делятся на 5 классов, различающихся в зависимости от их химической структуры. Обозначение этих классов следующее: IgG, IgM, IgA, IgD и IgE (Ig — это сокращенное название иммуноглобулина). Указанные классы иммуноглобулинов могут также обозначаться G, М, А, D и Е. Иммунные белки, различающиеся по константам седиментации Свеберга, получаемые на ультрацентрифуге в искусственном гравитационном поле, имеют разную степень иммунной активности. По современной классификации гамма-глобулины, обозначаемые 7S, преимущественно входят в класс IgG, кроме того, в класс IgA и IgD. Иммунные белки, обозначаемые 19S, входят в класс IgM, а иммуноглобулин 9S—в класс IgE.

Иммуноглобулины домашних животных, по данным Герберта (1974), изучены недостаточно по сравнению с иммуноглобулинами человека. Некоторые иммуноглобулины у животных, как и у человека, представлены различными классами, имеющими одинаковое название с человеческими, например IgG, IgM. Эти иммуноглобулины характерны для сельскохозяйственных животных и птиц.

Сравнение других иммуноглобулинов животных с иммуноглобулинами человека является весьма приблизительным, так как идентификация их проводится по признаку электрофоретической подвижности, а однозначное название иммуноглобулинов может быть тогда, когда они сравнимы еще и по другим признакам, например по константе седиментации, содержанию углеводов, месту синтеза, характеру реакции как антитела и др. Иммуноглобулины, имеющие наименьшую подвижность в электрическом поле, обозначаются у2а, в некоторых случаях они подразделяются на у2а, у2b, 72c, где буква а соответствует компоненту с меньшей подвижностью, чем компонент, обозначенный буквой в и т. д. Глобулины с большей подвижностью, чем у2, обозначаются yI. Их также подразделяют на подгруппы. Наиболее подвижными являются глобулины, обозначаемые 19S; их относят к макроглобулинам и обозначают буквой М.

До настоящего времени подробно изучались указанные первые 2 класса иммуноглобулинов, имеющих довольно подробную характеристику. Иммуноглобулин G, по общему признанию, является наиболее активным антителом. Так, по данным Бойда (1969), гаммаглобулины, обозначаемые 7S, проявляют до 85—90% всей активности антител. Иммуноглобулины класса IgG имеют относительно небольшого размера молекулы (микроглобулины) и по 2 активных центра, способных присоединяться к детерминантному участку антигена. Эти антитела обнаруживаются не только в крови, но и в тканевых жидкостях, так как проходят через стенки сосудов. IgG вместе с тем возникают несколько медленнее по сравнению с IgM, но более длительно удерживаются в организме. Есть предположение (Бойд, 1969), что IgG ингибируют биосинтез IgM-антител. Так, например, если в первые дни (7 дней) возникают IgM-антитела, то к 25-му дню количество их постепенно уменьшается вплоть до полного исчезновения и нарастает количество IgG-антител. Важно отметить, что по современному представлению иммуноглобулины класса IgG (7S гаммаглобулин) синтезируются одним из двух типов плазматических клеток, принимающих участие в образовании антител, а другой тип тех же клеток синтезирует иммуноглобулины класса IgM (19S гаммаглобулин). Поэтому антитела обоих классов можно обнаружить в различных тканях иммунных животных.

IgG-антитела участвуют во всех серологических реакциях, которые основаны на соединении антигена с антителом. Однако требуется сравнительно большее количество тысяч молекул IgG-антител, чтобы осуществился феномен реакции агглютинации или реакции связывания комплемента, тогда как IgM-антител для тех же самых показателей требуются единицы молекул. Считается, что IgM-антитела более активны при их анализе в серологических реакциях с микробными антигенами, а IgG-антитела слабее проявляются с микробными антигенами, но более интенсивно с токсинами и другими подобными антигенами.

IgG-антитела имеют 75% тяжелых (относительная молекулярная масса 500 тыс.) аминокислотных цепей и 25% легких (относительная молекулярная масса 200 тыс.) цепей, соединенных между собой в молекулу днсульфиднымн связями. Эти цепи не разрываются при воздействии на них 2-меркаптоэтанолом. Иммунологическая активность этих антител в основном происходит за счет тяжелых цепей, следовательно, в особенности последних могут варьировать показания серологических реакции в зависимости от антигена и методики опыта. Каждый класс иммуноглобулинов имеет различающиеся тяжелые цепи. Например, показана большая разница между тяжелыми цепями иммуноглобулинов классов IgG и IgM.

IgM-антитела представляют собой крупные (относительная молекулярная масса 900 тыс.) молекулы и имеют значительно больше (до 10) активных центров взаимодействия с антигеном. Локализуются они преимущественно внутри сосудов крови. Эти антитела не проходят через плаценту. Поэтому в плодах животных могут быть обнаружены только IgG-антитела.

Практическое значение имеет свойство химического вещества 2-меркаптоэтаиола инактивировать IgM-антитела за счет разрыва дисульфитных связей, соединяющих части молекул. При аналогичной обработке IgG-антител их молекулы не изменяются. На этой основе считают возможным дифференцировать при помощи серологических реакций острую бруцеллезную инфекцию от хронической.

IgM-антитела стимулируются в организме животных только под влиянием грамнегативных бактерий.

По данным Герберта (1974), у крупного рогатого скота обнаруживаются в сыворотке крови 3 класса иммуноглобулинов — IgG, IgM, IgA. Иммуноглобулины класса IgG представлены и двумя подклассами — 1 gG1 и IgG2, различающимися по электрофоретической подвижности. Иммуноглобулины второго подкласса более подвижны, чем первого. Тяжелые цени обоих подклассов иммуноглобулинов класса IgG одинаковы. В молозиве обнаруживаются только иммуноглобулины подкласса IgG1 которые участвуют в реакции связывания комплемента, тогда как иммуноглобулины подкласса IgG2 в РСК не участвуют. У других животных (лошадей, овец и коз, свиней, а также собак, кошек и птиц) обнаружены иммуноглобулины разных классов и подклассов. Однако для серологии имеют реальное значение в основном иммуноглобулины с константой седиментации 7S (IgG) и 19S (IgM).

Рекомендации Комитета экспертов по бруцеллезу ФАО/ВОЗ (1971 г.) ограничиваются только двумя вышеуказанными классами иммуноглобулинов для исследований и обозначения в ветеринарной практике. Вместе с тем экспертами отмечено, что у телок после вакцинации их вакциной из штамма № 19 IgM-антитела появляются примерно на 5-й день после иммунизации и достигают максимального значения через 13 дней, в то время как IgG-антитела появляются одновременно с первыми или несколько позднее и достигают максимального значения на 28—42-й день после вакцинации. Напряжение IgM-антител уменьшается, но не всегда исчезает из сыворотки крови вакцинированных животных. Вместе с тем IgG-антитела исчезают из организма скорее, чем IgM-антитела.

После естественного инфицирования в организме появляются IgM — и IgG-антитела, но они резко различаются после вакцинации. Так, например, при бруцеллезе человека IgM-антитела являются основными агглютинирующими антителами, а IgG-антитела — фиксирующими комплемент, но часто не вызывают агглютинации корпускулярного антигена. В крови же крупного рогатого скота и IgM — и IgG — антитела вызывают агглютинацию, т. е. оба антитела агглютинируют корпускулярный антиген РА и способны фиксировать комплемент, т. е. соединяться с экстрактантигеном бруцелл. В крови свиней после их иммунизации вакциной из штамма № 19 IgM-антитела не фиксировали комплемент.

Отмечено, что на показания реакции связывания комплемента влияли следующие факторы: температура фиксации антигена (на холоде или при 37° С), структура антигена, виды сыворотки и класс антигена. Следовательно, при постановке РДСК на холоде можно получить лучшие результаты с одним и тем же классом иммуноглобулинов, чем при связывании комплемента при 37° С (см. РДСК при инфекционном заболевании, вызываемым Br. ovis, и при бруцеллезе).

Имеются сообщения о том, что неполные антитела у животных, вначале вакцинированных вакциной из штамма № 19 или 45/20, а затем инфицированных, обнаруживались дольше, чем агглютинирующие и фиксирующие комплемент антитела. Однако о наличии связи между инфекцией и неполными антителами не сообщается.

У собак, естественно инфицированных Br. canis, в сыворотке крови вначале появлялись IgM-антитела, а затем, через 7—13 дней, появлялись 4 подгруппы IgGS-антител и первые три IgGS-антител агглютинировали корпускулярный антиген.

В борьбе с бруцеллезом сельскохозяйственных животных имеет большое значение ранняя диагностика заболевания. Чем быстрее будут выявлены больные животные, тем раньше можно принять меры по ликвидации заболевания. Серологические реакции отвечают этому требованию более удовлетворительно по сравнению с методами аллергической, биологической и бактериологической диагностики. Диагноз на бруцеллез по реакции агглютинации и реакции связывания комплемента и другим реакциям, основанным на выявлении антител в крови, может быть установлен в близкие и отдаленные сроки после заражения животного бруцеллезом. После внедрения в организм заражающей дозы возбудителя через разные сроки у животных появляются в крови антитела. У крупного рогатого скота, овец, свиней антитела в крови появляются иногда на 5—8-й день после аборта, возникающего на почве генерализованного бруцеллеза. В других случаях в неблагополучном стаде молодняк заражается бруцеллезом в молочном периоде, а антитела в крови появляются через несколько месяцев или уже в период беременности (скрытое бруцеллоносительство). После наступившей бактериемии в крови животных могут быть обнаружены антитела методом РА раньше на 1-2 сут. чем по РСК. При параллельной постановке РА и РДСК эта разница не обнаруживается. Обычно такие случаи бывают на 5—8-е сут после наступившей бактериемии. Следовательно, ранний серологически и диагноз открывает для исследователя только тех зараженных животных, у которых инфекция уже приобретает активную форму. Животные, у которых инфекция находится в состоянии первичной латенции, не обнаруживаются серологическими методами, так как в крови таких животных еще не образовались бруцеллезные антитела. Поэтому важно, чтобы метод диагностики наиболее полно охватывал различные состояния инфекционного процесса, на этапах которого антитела могут быть разными. Например, в период начального развития инфекции обнаруживаются главным образом IgM-антитела, а в последующем — преимущественно IgG-антитела.

Бруцеллез протекает своеобразно почти у каждого в отдельности взятого животного, в зависимости от возраста, пола, беременности, физиологического состояния, вирулентности возбудителя, суперинфицирования и др. Поэтому в одном и том же неблагополучном стаде при возникновении инфекции наблюдаются индивидуумы, резко отличающиеся по времени и напряжению продукции антител. Кроме того, показания одной и тон же реакции выражение колеблются в зависимости от давности течения болезни и степени ее патологического проявления. Так, свежеинфицированные животные реагируют по РА в большем проценте, чем длительно болеющие; истощенные животные могут не реагировать либо реагировать очень слабо по всем реакциям.

Очень большое значение для своевременного распознавания болезнен имеет применяемый метод диагностики. Так, например, бараны, зараженные Br. ovis, в очень большом проценте реагируют по РДСК с экстракт-антигеном Br. ovis (до 95), но по РА они реагируют с корпускулярным антигеном Br. ovis слабо и в очень небольшом проценте (10—15), Эта разница объясняется тем, что клетки Br. ovis не имеют поверхностного бруцеллезного липополисахаридного S-антигена, следовательно, больные животные не имеют IgM-антител. Это положение в известной степени касается и бруцеллезной инфекции, поскольку поверхностно-оболочечный S-антиген сильно подвижен и резко снижается в клетках при диссоциации, происходящей в организме животных после начала бактериемии. Подвижность S-антигена немедленно отражается на степени эффективности отдельных реакций. Так, при параллельном исследовании по РА, РСК, РФ (реакции флокуляции) и КР (кольцевой реакции) сывороток крови крупного рогатого скота мы наблюдали несоответствие показаний от 0,5 до 8%. При этом меньше несовпадающих показаний отдельных реакций было с сыворотками свежеинфицировапных животных. Поэтому является общепризнанным, что при постановке двух, трех, четырех или большего количества реакций выявляется больных животных больше, чем при одной какой-либо реакции.

Если вы нашли ошибку, пожалуйста, выделите фрагмент текста и нажмите Ctrl+Enter.

www.activestudy.info

Носитель твердофазный для антител - Справочник химика 21

    Для проведения такого анализа необходимо эффективное отделение комплексов от свободных компонентов. Эта задача достаточно легко решаема, если антиген, либо антитело иммобилизовать на твердом носителе. Иммобилизация позволяет предотвратить агрегацию в растворе и разделить иммунные комплексы и свободные компоненты. Возможность прочного связывания на носителе антигенов или антител с сохранением их способности к специфическому образованию иммунных комплексов привела к созданию твердофазных иммунохимических методов, широко используемых в настоящее время в химическом анализе. [c.114]     Особую значимость для широкого внедрения твердофазного ИФА в практику имела разработка в качестве носителей для сорбционной иммобилизации антител и антигенов специальных полисти-рольных плат, содержащих 96 лунок. Факт сорбции антител на поверхности полистирола был установлен в середине 60-х годов и использован первоначально в методах РИА. Введение в практику ИФА полистирольных плат позволило значительно увеличить число-проводимых анализов и упростить методическую процедуру его выполнения. Были сконструированы специальные приборы, позволяющие автоматизировать стадии добавления реагентов, промывки и осуществлять одновременную регистрацию каталитической активности фермента-метки в каждой из лунок платы. [c.7]

    К носителю с иммобилизованным антигеном добавляют раствор определяемого антигена и раствор, содержащий фиксированное количество меченных ферментом специфических антител. После инкубации и отмывки несвязавшихся с носителем компонентов определяют ферментативную активность на носителе. Метод является твердофазным, так как носитель с иммобилизованным антигеном используют на первой стадии анализа, включает лишь одну равновесную стадию инкубации, поэтому время анализа определяется в основном продолжительностью этой стадии, однако не дает возможности избежать контакта фермента-маркера с анализируемой средой. В связи с этим ограничения его применения могут возникать при необходимости анализа биологических жидкостей (сыворотка [c.95]

    Использование твердых носителей для иммобилизации антител с последующим специфическим связыванием определяемого соединения на сорбенте и идентификацией образовавшихся нммунокомплексов с помощью меченных ферментами компонентов лежит в основе методов твердофазного иммуноферментного анализа (метод гетерогенного ИФА). [c.115]

    Метод также является твердофазным и формально имеет сходные черты с вышеописанным ингибиторным анализом. Отличие заключается в том, что на первой стадии используют немеченые специфические антитела, а для выявления образующихся на носителе специфических иммунохимических комплексов вводят в него ферментативную метку с помощью реакции с меченными ферментом вторичными антителами. [c.96]

    Гетерогенные методы ИФА включают стадию разделения свободного меченого компонента от образовавшегося комплекса со связываюш,им агентом. Задача разделения эффективно решается при использовании антител (или антигенов), иммобилизованных на нерастворимых носителях. Методы, основанные на данном подходе, известны под названием твердофазных методов ИФА. [c.201]

    В связи с интенсивным применением иммобилизованных ферментов в биотехнологии методы получения различных нерастворимых производных соединений белковой и небелковой природы хорошо разработаны. Многие из них могут быть эффективными и для получения-иммобилизованных препаратов антител и антигенов (иммуносорбентов). Чаще всего для целей твердофазного ИФА приготовление иммуносорбентов осуществляют либо ковалентным связыванием, либо адсорбцией вещества на поверхности носителя. [c.201]

    Наиболее широко применяемыми носителями в твердофазном ИФА являются 96-луночные планшеты и пробирки из оптически прозрачного полистирола, поливинилхлорида или других полимерных материалов, с внутренней поверхностью которых связываются антитела. Как отмечалось ранее, в большинстве случаев иммобилизацию проводят адсорбционно, что упрощает процедуру, но снижает прочность связи белка с носителем. Увеличение прочности связывания может быть достигнуто при ковалентном закреплении антител на пластике. [c.206]

    Особое распространение получили методы, основанные на использовании антигенов и антител, меченных ферментами, — так называемый иммунофермеитный анализ. Они используются для изучения широкого круга соединений — антител, пептидных и стероидных гормонов, вирусных и бактериальных антигенов, различных белков и ферментов. Существуют гетерогенные (твердофазные) и гомогенные методы иммуноферментного анализа, принципиально различающиеся способом разделения компонентов иммунохимической реакции. Твердофазные методы основаны на применении антител или антигенов, иммобилизованных на нерастворимых носителях. [c.306]

    Иммобилизация антител на водорастворимых полимерах. Новым подходом в иммунохимическом анализе является применение антител, иммобилизованных на обратимо растворимых иммуносорбентах, что позволяет проводить анализ в растворе, а затем быстро разделять компоненты путем перевода носителя в нерастворимое состояние. Данный путь дает возможность сочетать чувствительность твердофазного анализа с быстротой гомогенного. В качестве водорастворимого носителя может быть использован альгинат натрия и полиметакриловая кислота (ПМАК). [c.211]

    Применение в ИФА иммуносорбентов позволяет проводить определение любых соединений, независимо от их валентности, размеров, структуры и молекулярной массы. Однако возможности твердофазных систем анализа (ни й ний предел обнаружения антигена, время, воспроизводимость) в значительной степени определяются такими величинами, как концентрация, аффинность и стабильность иммобилизованных антител. В связи с этим ниже дана краткая информация об этих параметрах и путях их определения на примере наиболее распространенных пористых и непористых носителей. [c.217]

    Стабильность иммобилизованных антител при хранении. Постоянство концентрации и сродства иммобилизованных антител является необходимым условием для получения воспроизводимых результатов твердофазного ИФА. Изменение этих характеристик может происходить за счет десорбции или разрыва химической связи антител с носителем и денатурации связанного белка. Экспериментально изменение концентрации или свойств иммобилизованных антител проявляется в уменьшении степени связывания в стандартных условиях фиксированной концентрации меченого антигена. [c.221]

    Описанный в разд. IV твердофазный РИА является очень чувствительной и удобной методикой определения липидных антигенов. Как уже было отмечено, некоторые антитела в условиях, при которых проводят эксперимент, имеют тенденцию к неспецифическому связыванию с твердофазным носителем, поэтому при первичных тестах следует использовать в качестве контроля носитель, не покрытый липидом. Это удваивает объем работы при скрининге супернатантов гибридом на связывание с липидными антигенами. [c.171]

    Одним из важных моментов в проведении иммуноферментного анализа является разделение свободных и связанных с антителами меченых компонентов. В настоящее время разработано несколько вариантов решения данной проблемы. Наиболее распространен метод, основанный на иммобилизации антител на твердой подложке (стеики полистирольных пробирок или шариков, целлюлозные диски, гранулы макропористых носителей для хроматографии). Особенно перспективными оказались полистироло-вые пробирки или планшеты, содержащие 96 лунок. Сущность методов разделения основана на том, что одни из компонентов, например антитела, могут быть сорбционно иммобилизованы на поверхности измерительной кюветы. После проведения инкубации с образцом антиген сорбируется на поверхности, а все остальные компоненты остаются в растворе и могут быть легко отделены, например, с помощью пористых частиц под действием магнитного поля. Основными проблемами, возникающими при реализации твердофазных методов разделения, являются стандартизация поверхности и уменьшение неспецифического связывания меченых компонентов с носителем. [c.114]

    Наиболее простой способ снятия неспецифического фонового излучения состоит в использовании твердофазных вариантов метода. В качестве твердой фазы берут пблистирольные пробирки, микропланшеты, полиакриламидные шарики. Иммобилизация антител (моноклональных или поликлональных) на полистироле осуществляется методом нековалентной физической адсорбции, а в случае полиакриламидных частиц — ковалентным связыванием. Различие в способах иммобилизации обусловливает некоторые различия в свойствах иммобилизованных антител. Из. всех перечисленных носителей полиакриламидные шарики, как правило, обеспечивают. повышенную стабильность и иммунореактивность иммобилизованных антител, более быструю кинетику специфического взаимодействия, что улучшает точность анализа и его воспроизводимость. [c.142]

    Получение фрагментов антител. При разработке некоторых модификаций ИФА может возникнуть необходимость использования конъюгатов фермента не с целой молекулой иммуноглобулина, а с тем ее фрагментом, который специфически связывается с молекулой антигена —Fab-фрагментом. Обусловлено это прежде всего тем, что рс-фрагмент молекулы, ответственный за эффек-торные функции иммуноглобулина, обладает способностью неспецифически взаимодействовать с другими белками, сорбированными на носителях при проведении твердофазного ИФА. Эффект неспецифической сорбции определяется природой антигена, концентрацией сорбированного на носителе белка и рядом других факторов. [c.155]

    Получение антигенов и антител, связанных с Носителем, является одной из суш,е-ственных процедур при разработке твердофазного ИФА, так как от степени сохранения стабильности и активности иммобилизованных препаратов зависят количественное характеристики метода и возможность его практического применения. Другой важной областью применения иммуноч сорбентов для целей ИФА является очистка антигенов и антител для последующей метки ферментом или использования в качестве стандартного образца. [c.201]

    Твердофазные иммунореагенты вначале использовали для выделения антигенов и аитител. Впоследствии иммобилизованные антитела применили для радиоиммуноанализа белков [1, 2] и гаптенов [3,4 ], где с их помощью удалось упростить разделение свободного и связанного с антителами определяемого вещества. Реагенты (антитела или антигены) связывали с носителем или ковалентно, или с помощью пассивной адсорбции. Ковалентное связывание требует проведения химических реакций и тщательной очистки готового продукта. Связывание путем пассивной адсорбции занимает много времени, а полученные таким способом реагенты сложно ис- [c.52]

    Ситуация резко изменилась после введения неизотопных меток для регистрации реакции антиген - антитело [5 ], и особенно после применения моноклональных антител в двухцентровом им-мунометрическом анализе белков [б ]. Необходимость создания высокочувствительных методов иммуноанализа для научных исследований, а также более простых методик для проведения анализов в поликлиниках, полевых условиях и для самодиагностики также содействовала бурному развитию твердофазных методов. Носители, применяемые в этих анализах, могут быть выполнены в виде трубок, шариков, мелких гранул, микропланшетов, полосок, пленок и электродов. [c.53]

    Данные, представленные в этом разделе, в целом подтверждают представления об ускорении переноса белков через грани-ду жидкость — твердое вещество при обработке ультразвуком. Известно сходное влияние ультразвука на гетерогенный катализ в системах, содержащих иммобилизованные ферменты (Berezin et al., 1977). Маловероятно, чтобы ультразвук необратимо изменял доступность или степень сродства иммобилизованных антител, однако нельзя исключить кратковременного уменьшения пространственных затруднений вследствие периодического возмущения твердого носителя. Наиболее удовлетворительное объяснение действия ультразвука состоит в том, что он вызывает эффективное микроперемешивание за счет схлопывания кавитационных пузырьков и создания в жидкости потоков. Считают, что такое перемешивание уменьшает толщину неподвижного слоя растворителя, прилегающего к твердым поверхностям, и тем самым благоприятствует диффузии и массопереносу через границу раздела фаз (Борисов, Статников, 1966). По-видимому, этот эффект имеет всеобщий характер и может быть использован в других методах, основанных на твердофазном связывании, таких, как метод ELISA в платах для микротитрования, радио-иммунологический анализ, анализ ДНК и рецепторов. [c.149]

    Романи и соавторы для проведения радиоиммунных определений различных белков хроматина, в частности HMG-1, в качестве твердофазного носителя использовали гибкие платы для микротитрования на 96 лунок, изготовленные из полихлорвинила. В лунки вносили по 0,1 мл белкового раствора в обычном фосфатно-солевом буфере, выдерживали 4 ч при комнатной температуре, а затем ночь на холоду (концентрации белка указаны ниже). Не сорбировавшиеся на пластик белки смывали шестью порциями по 0,3 мл того же раствора. Для блокирования центров сорбции на пластике, оставшихся незанятыми, лунки заполняли 1%-ным раствором БСА в фосфатно-солевом буфере, инкубировали и отмывали, как описано выше. Затем в лунки вносили по 0,1 мл иммунной антисыворотки кролика, разбавленной в отношении 1 200 тем же раствором БСА, инкубировали 4 ч при комнатной температуре с покачиванием и промывали 8 раз буфером. Наконец, для обнаружения связавшихся антител добавляли по 0,1 мл раствора [ 1]-белка А (10—50 тыс. имп./мин), инкубировали еще 4 ч, трижды тщательно промывали раствором БСА, 8 раз — буфером и 10 раз — водой. После этого лунки вырезали из платы и поочередно просчитывали в у-счетчике. [c.290]

chem21.info


Смотрите также