9. Гуморальные факторы резистентности. Лизоцим, нормальные антитела, белки острой фазы. Нормальные антитела


14. Антитела, их структура, свойства, функции. Нормальные показатели иммуноглобулинов сыворотки крови человека.

Ig (АТ) – белки плазмы крови, по хим составу – гликопротеиды, по электрофоретической подвижности – γ-глобулины.

СТРУКТУРА Ig

Белковая часть молекулы Ig состоит из 4 полипептидных цепей: 2 одинаковых тяжелых Н-цепей и 2 легких L-цепей (различаются по Мг). Каждая цепь состоит из вариабельной V- (начинается с N-конца, примерно 110АК = 1 домен) и стабильной С-части (4-5 доменов). Каждая пара легких и тяжелых цепей связана S-S мостиками, меж­ду их С-участками, обе тяжелые цепи также соединены друг с другом между их константными участками → шарнир. В пре­делах каждого домена поли­пептидная цепь уложена в виде петель. Петли в V-до­менах легкой и тяжелой цепи составляют гипервариабельный участок, который входит в состав антигенсвязывающего центра.

При гидролизе IgG протеолитическим ферментом папаином, легкие и тяжелые цепи распадаются на 3 фрагмента: два Fab- (Fragment antigen binding) и один Fc-фрагмент (Fragment cristalline). Свободные N-концы концы каждого Fab-фрагмента входят в состав V-доменов, формирующих антигенсвязывающий (активный) центр. Fc-фраг­мент имеет свободные С-концы, одинаковые у разных АТ, функции которых заключаются в фиксации и последующей активации системы комплемента по классическому пути после, в прикреплении иммуноглобулина G к Fc-рецепторам  мембран и в прохождении IgG через плаценту. В области Fc-фрагментов антител локализуются участки (эпитопы), определяющие индивидуальную, видовую, группо­вую, антигенную специфичность данного иммуноглобулина.

КЛАССЫ И ТИПЫ Ig:

в зависимости от структуры, свойств и антигенных особенностей их легких и тя­желых цепей.

Легкие цепи в молекулах Ig пред­ставлены двумя ИЗОТИПАМИ – ламбда (λ) и каппа (κ), которые различаются по химическому составу. Тяжелые цепи Ig подразделены на 5 изотипов (γ, μ, α, δ, ε), которые опреде­ляют их принадлежность к одному из 5 классов: G, M, A, D, Е соответственно. Они отличаются друг от друга физ-хим особенностями и биол свойствами.

Наряду с изотипическими вариантами Ig имеются аллотипические (АЛЛОТИПЫ), несущие индивидуаль­ные АГ генетические маркеры. Каждая плазма­тическая клетка продуцирует АТ одного аллотипа.

По различиям в АГ свойствах Ig делят на ИДИОТИПЫ. V-домены разных Ig можно различить и по их АГ свойствам (идиотипам). Накопление любых АТ, несущих в структуре своих активных центров новые для организма антигенные эпитопы (идиотипы), приводит к индукции иммунного ответа на них с образованием анти-АТ, получив­ших название антиидиотипических.

СВОЙСТВА Ig

Молекулы Ig разных классов построены из одних и тех же мономеров, имеющих по две тяжелых и по две легких цепи. К мономерам относятся иммуноглобулины G и Е, к пентамерам – IgM, a IgA могут быть представлены мономерами, димерами и тетрамерами. Мономеры соеди­нены между собой j-цепью (joining). Разные классы Ig отличаются друг от друга биол свойствами, в частности их способностью связывать гомологичные АГ. В реак­ции у мономеров IgG и IgE участвуют 2 антигенсвязывающих участка, при этом образуется сетевая струк­тура, которая выпадает в осадок. Суще­ствуют также моновалентныеАТ, у которых функционирует лишь один из 2 центров  без обра­зования сетевой структуры. Такие анти­тела называются неполными, они выявляются в сыво­ротке крови с помощью реакции Кумбса.

Иммуноглобулины характеризуются различной авидностью (скорость и прочность связыва­ния с молекулой АГ). Авидность зависит от класса Ig, содержащих разное количество мономеров. Наибольшая авидность у IgМ. Авидность АТ меняется в про­цессе иммунного ответа в связи с переходом от синтеза IgM к преимущественному синтезу IgG.

Разные классы Ig отличаются по способности проходить через плаценту, связывать и активи­ровать комплемент и др. За эти свойства отвечают отдельные домены Fc-фрагмента.

IgG составляют около 80% сывороточных Ig (12 г/л). Они обра­зуются на высоте первичного иммунного ответа и при повторном введении антигена (вторичный ответ). Обладают достаточно быстро связываются с АГ, особенно бактериальной природы. При связывании IgG с эпитопами АГ в области его Fc-фрагмента открывается участок, ответственный за фиксацию первой фракции системы комплемента, с последующей активацией системы комплемента по классическому пути. IgG является единственным классом антител, проникающим через плаценту в организм плода. Через некоторое время после рождения ребенка содержание его в сыворотке крови падает и достигает минимальной концентрации к 3–4 мес, после чего начинает возрастать за счет накопления собственных IgG, достигая нормы к 7-летнему возрасту. Из всех классов Ig в  больше всего синтезируется IgG. Около 48% IgG содержится в тканевой жидкости, в которую он диф­фундирует из крови.

IgM первыми начинают син­тезироваться в  плода и первыми появляются в сыво­ротке крови после иммунизации. Составляют около 13% сывороточных иммуноглобулинов (1 г/л). По Мг они значительно больше остальных Ig, т.к. состоят из 5 субъединиц. К IgM принадлежит большая часть изогемагглютининов (группы крови). Они не проходят через плаценту и обладают наиболее высокой авидностью. При взаимодействии с АГ in vitro вызывают их агглютинацию, преципитацию или связывание комплемента.

IgA встречаются в сыворотке крови и в секретах на поверхности слизистых оболочек. В сыво­ротке крови (после 10 лет) их 2,5 г/л. Сывороточный IgA синтезируется в плазматических клетках селезенки, лимфатических узлов и слизистых оболочек. Они не агглютинируют и не преципитируют АГ, не активируют комплемент.

SIgA отличают­ся от сывороточных наличием секреторного компонента (β-глобулин), свя­занного с 2 или 3 мономерами иммуноглобулина А. Секреторный компонент синтезируется клетками секреторного эпи­телия, а к IgA присоединяется при его прохождении через эпите­лиальные клетки. Играют существенную роль в местном им­мунитете, препятствуют адгезии мк на эпителиальных клетках. В агрегированной форме активирует комплемент по альтернатив­ному пути.

Около 40 % общего IgA содержится в крови.

IgD До 75% содержится в крови (0,03 г/л). Не проходит через плаценту, не связывает комплемент. Функции не выяснены (предположительно – является одним из рецепторов предшественников В-лимфоцитов).

IgE – в крови 0,00025 г/л, синтезируется плазмати­ческими клетками в лимфати­ческих узлах, в слизистой оболочке ЖКТ. Их называют также РЕАГИНАМИ, т.к. они принимают участие в анафилактических реакциях, обладая выраженной цитофильностью.

studfiles.net

9. Гуморальные факторы резистентности. Лизоцим, нормальные антитела, белки острой фазы.

Гуморальные факторы неспецифической резистентности состоят из разнообразных белков, содержащихся в крови и жидкостях организма. Они сами могут обладать антимикробными свойствами или способны активизировать другие гуморальные и клеточные механизмы иммунитета. Эти вещества осуществляют функцию первичной защиты от чужеродных антигенных и неантигенных частиц. Количество этих гуморальных факторов значительно. К числу более активных, или наилучшим образом изученных, следует отнести нормальные антитела, лизоцим, комплемент, пропердин, лейкины, бета-лизины и др.

По химической структуре лизоцимотносится к полипептидам. Он растворим в слабокислой среде, устойчив к непродолжительному кипячению, к трипсину.

Лизоцим (мурамидаза) способен расщеплять основное вещество клеточной стенки бактерии муреин путем разрушения связи между первым углеродным атомом n-ацетилмурамовой кислоты и четвертым углеродным атомом n-ацетилглюкозамина, входящего в состав клеточной стенки бактерий. В результате этого изменяется ее проницаемость.

Лизоцим является мощным защитным фактором слизистой оболочки полости рта, глаза, содержится в слезах, слюне, крови, материнском молоке, тканях различных внутренних органов. Высокая концентрация лизоцима выявляется в околоплодных оболочках и водах плода.

Основная масса лизоцима синтезируется, по-видимому, тканевыми макрофагами и нейтрофилами.

Лизоцим выполняет в организме важные биологические функции: бактерицидное действие, стимулирующее воздействие на фагоцитоз, способность нейтрализовать некоторые микробные токсины, а также противовоспалительное действие.

В сыворотке людей и животных выявляются нормальные антителапротив различных микробных антигенов. Они обладают агглютинирующим, комплементсвязывающим, литическим, нейтрализующим влиянием на микробные антигены. Сыворотка крови может содержать иммуноглобулины даже по отношению к антигенам, о которых заведомо известно, что они никогда не поступали в данный организм. Такие антитела получили название естественных или «нормальных». Они обычно определяются в низких титрах, однако их иммунологическая роль довольно выражена, особенно по отношению к инфекционным агентам.

Считается, что нормальные антитела появляются в результате так называемой неприметной иммунизации возбудителями или антигенами, поступающими с пищей, однако нельзя отрицать и спонтанный (генетически обусловленный) механизм их образования.

Реакции антител по отношению к антигенам, о которых заведомо известно, что они не проникали в данный организм, могут расцениваться и как перекрестные, отсюда и их более низкие титры. Нормальные антитела могут поступать трансплацентарно или с молоком матери.

Белки острой фазы– большая группа белков, обладающих антимикробным действием, способствующих фагоцитозу, активации комплемента, формированию и ликвидации воспалительного очага. Белки острой фазы продуцируются в печени под действием цитокинов. Основную массу белков острой фазы составляют С-реактивный белок и сывороточные амилоиды А и Р, а также – факторы свертывания крови, металлосвязывающие белки, ингибиторы протеаз, компоненты комплемента и некоторые другие.

  • С-реактивный белок (СРБ) присоединяется к фосфатидилхолину – компоненту клеточной мембраны любых клеток. Способен присоединяться к микроорганизмам, активированным лимфоцитам, поврежденным клеткам разных тканей, активируя при этом комплемент. Присоединяясь к нейтрофильным фагоцитам, усиливает фагоцитоз и элиминацию объектов фагоцитоза.

  • Сывороточный амилоидный белок А – липопротеин, обладающий спообностью к хемоаттракции нейтрофилов, моноцитов и лимфоцитов, вызывает временную репарацию повреждений клетки и тканей при воспалении.

  • Сывороточный амилоид Р близок по структуре в СРБ, обладает способностью к активации комплемента.

  • Белки, связывающие железо – гаптоглобин, гемопектин, трансферрин – препятствуют размножению микроорганизмов, нуждающихся в железе.

  • Ингибиторы протеаз (антитрипсин, антихимотрипсин, церулоплазмин и макроглобулин) препятствуют разрушению тканей протеазами нейтрофилов в очагах воспаления.

studfiles.net

Open Library - открытая библиотека учебной информации

Биотехнологии Нормальные антитела. Моноклональные антитела и их получение. Неполные антитела и их выявление

просмотров - 146

Афинность и авидность антител

Аффинность, или аффинитет (К-константа связывания) — сила связывания отдельной детерминанты (эпитопа) антиген со специфическим к нему активным центром (паратопом) антитела.

Афинность зависит от площади контакта между антителом и эпитопом, межмолекулярных расстояний в области контакта͵ распределœения заряженных и гидрофобных групп, а также от тех конформационных изменений, которые вызваны перекрыванием электронных облаков (если электронные облака двух молекул перекрываются, то возникают мощные силы отталкивания). Следует отметить, что термин аффинность относится к связыванию антитела с моновалентным гаптеном или с одной антигенной детерминантой.

Авидность, или авидитет — прочность связывания всœей молекулы иммуноглобулина с антигеном, характеристика общей стабильности комплекса антигена и антитела. Авидность определяется аффинностью антитела к антигену, количеством антигенсвязывающих центров в молекуле антитела и особенностями пространственной структуры антигена.

Различают нормальные и иммунные антитела. Нормальные (естественные) антитела находятся в организме без предварительного введения Аг (иммунизации). Примеры естественных антител:

1) α- и β-изогемагглютинины сыворотки крови человека I группы;

2) антитела против эритроцитов животных;

3) естественные АТ против микробов;

4) аутолитические антитела.

Иммунные антитела накапливаются в сыворотке крови после предварительной иммунизации антигенами.

Все молекулы Ig, продуцируемые отдельным лимфоцитом и его потомками (ᴛ.ᴇ. клоном плазматических клеток), несут один и тот же идиотип и обозначаются термином «моноклональные антитела». Моноклональные антитела моноспецифичны и являются исключительно удобным диагностическим средством.

Ц.Мильштейн и Г.Келœер в 1975 ᴦ. разработали методику получения моноклональных антител, создав бессмертные клоны В-клеток, которые называют гибридомами. Получают гибридомы путем слияния нормальных по продолжительности жизненного цикла лимфоцитов, продуцирующих антитела, с опухолевыми (бессмертными) дефектными линиями В-клеток, не способных к секреции иммуноглобулинов. Для иммунизации антигеном (имеет 2 и больше детерминант) используют мышей или крыс. Получают лимфоциты селœезенки. При слиянии нормальных и опухолевых лимфоцитов разрушают клеточные стенки нормальных лимфоцитов с помощью полиэтиленгликоля.

Путем клонирования гибридом можно получить набор моноклональных антител фактически против любых эпитопов определœенного иммуногена. С по-мощью гибридом можно получить неограниченное количество антител, которые сохраняют свою высокую специфичность и чувствительность.

Гибридомы можно создавать на основе Т-лимфоцитов для получения клонов гибридом, избирательно синтезирующие те или иные лимфокины.

Среди иммуноглобулинов-мономеров по функциональной активности различают полные и неполные антитела. Полные антитела — бивалентные антитела (обычно IgG). Неполные антитела — моновалентные АТ, у которых действует один антигенсвязывающий центр из-за пространственной блокировки второго центра.

Для выявления неполных антител используют реакцию (тест) Кумбса. Тест Кумбса используется для выявления антител к резус-фактору у беременных женщин и определœения гемолитической анемии у новорожденных детей с резус-несовместимостью, влекущей разрушение эритроцитов. Учитывая зависимость отсостояния антител (бывают как в статичном, так и в свободном состоянии в плазме крови) проводится прямая или непрямая реакция Кумбса. Неполные AT предварительно инкубируют с корпускулярным Аг (эритроциты) и вносят антиглобулиновую сыворотку, содержащую антитела к иммуноглобулинам человека (непрямая реакция Кумбса). Одна молекула полных AT взаимодействует с двумя молекулами неполных AT (с Fс-фрагментом), связавших Аг, в результате происходит видимая агглютинация или гемагглютинация. В случае если есть основания для предположения, что антитела зафиксированы на поверхности эритроцитов, проводится прямой тест Кумбса. В этом случае тест проходит в один этап — добавляется антиглобулиновая сыворотка.

oplib.ru

Антитела нормальные - Справочник химика 21

    Гамма-глобулин для профилактики кори представляет собой раствор гамма-глобулиновой фракции белка крови человека и содержит антитела, нормально присутствующие в крови взрослых людей. Каждую серию препарата готовят путем фракционирования спирто-водными осади-телями при температурах ниже нуля из смеси сывороток, плазмы или плацент не менее чем от 1000 человек. Растворителем служит изотонический 0,9% раствор хлорида натрия или изотонический раствор с добавлением стабилизатора — глицина до концентрации 0,3—0,5 мол. [c.328]     Этот метод весьма полезен, например, при диагностике недостаточности синтеза иммуноглобулинов какого-либо класса. В этом случае электрофоретическому разделению подвергают нормальную сыворотку человека, в зону абсорбирующих антигенов вносят сыворотку больного, а в зону иммунной сыворотки — антисыворотку к сывороточным белкам человека. В образовании полос преципитации с фракциями нормальной сыворотки человека принимают участие только те антиглобулиновые антитела, которые не встретили соответствующих им иммуноглобулинов в сыворотке больного, диффундируя из зоны антисыворотки в зону нормальной сыворотки. В результате появляются полосы преципитации, которые соответствуют отсутствующему классу иммуноглобулинов, например IgG, IgA или IgM. [c.152]

    Одним из главных компонентов иммунной системы организма является комплемент. Комплемент был открыт французским ученым Ж. Борде в конце прошлого столетия как результат обнаруженной способности нормальной сыворотки крови убивать бактериальные клетки в присутствии соответствующих антител и назван алексином . Современное название комплементу дал П. Эрлих. [c.220]

    В нормальных природных условиях гены и наборы генов претерпевают рекомбинацию в ходе таких биологических процессов, как трансформация бактерий, вирусная трансдукция, конъюгация бактерий и обмен генов при слиянии половых эукариотических клеток. Гены и группы генов могут также перемещаться с одного места на другое как в пределах одной и той же хромосомы, так и между разными хромосомами. Например, белки-антитела, которые вырабатываются клетками крови (иммуноцитами) позвоночных против миллионов самых разных, не содержащихся в организме [c.991]

    Вильямсон и Аллисон [13] сделали попытку усовершенствовать стадию иммунопреципитации с помощью метода Лорелла [63], заключающегося в проведении электрофореза антигена в гелях агарозы, включающих антитела. Согласно предложенной методике, белки после разделения переносят на полоску фильтровальной бумаги, которую затем помещают на слой агарозы с антителами, и проводят электрофорез. Таким путем в сыворотке мыши удалось обнаружить до 20 компонентов [13, 64 В другом варианте удаляют лишний сефадекс по Хансону [14 а затем осторожно переносят весь гель агарозы с антителами на полоску сефадекса. По такой методике выполнен анализ молекулярновесового распределения а-липопротеина нормальной сыворотки [65], приведенный на рис. 9. [c.275]

    При реакции антитела с соответствующим антигеном происходит одно или несколько из следующих явлений. 1) Антитела к токсинам нейтрализуют токсичность антигена, а антитела к вирусам — инфекционную способность антигена. 2) Антитела к растворимым белкам и другим растворимым антигенам вызывают преципитацию соответствующего антигена (фиг. 1). 3) Антитела к микроорганизмам и чужеродным эритроцитам вызывают склеивание (агглютинацию) клеток—носителей антигенов (фиг. 2). 4) Антитела к эритроцитам и некоторым микроорганизмам вызывают разрушение клеток подобное явление называется лизисом, и для его проявления необходимо еще участие некоторых нормальных компонентов плазмы, которые обозначаются в целом как комплемент. 5) Антитела к ряду микроорганизмов [c.10]

    В отличие от глобулинов кролика, характеризующихся однородностью, глобулины лошади — антитела или нормальный глобулин — отличаются гетерогенностью, и все препараты обнаруживали широкое разнообразие Ы-концевых групп. Различные глобулины человека также отличаются друг от друга по аминокислотному составу [12, 16]. [c.17]

    Тот факт, что еще не найдено выраженных химических различий между антителами или между антителами и нормальными глобулинами, заставляет предполагать, что часть молекулы антитела, ответственная за его специфические свойства, не очень велика. Эта мысль подтверждается и приводимыми в следующей главе данными, свидетельствующими [c.38]

    Бернет и Феннер [7] считают, что ферменты, участвующие в разрушении составных частей нормального организма, способны адаптироваться к молекулам чужеродных веществ. После удаления антигена эти ферменты самовоспроизводятся и продолжают увеличиваться в числе. Предполагалось, что антитела представляют собой ферментативно неактивные частичные копии этих адаптивных ферментов. Недавно Бернет изменил свою точку зрения [5, 6]. [c.42]

    Антитела связываются другими клетками, в том числе нормальными клетками, экспрессирующими антиген-мищень. Возможно и неспецифическое связывание антител клетками, имеющими F -рецепторы или рецепторы для углеводных компонентов иммуноглобулинов. Частично эти проблемы можно рещить путем химической модификации антител или их изменения методом генетической инженерии. Предотвратить связывание антител нормальными клетками можно было бы и путем применения биспецифичных антител, т. е. направленных сразу к двум различным антигенам, одновременно экспрессируемым на опухолевых клетках, при том что только один из них присутствует на нормальных клетках. [c.389]

    На иммунизацию организм отвечает синтезом очень неоднородной популяции антител, молекулы к-рых могут сильно отличаться друг от друга по сродству к антигену. Такая неоднородность объясняется участием в иммунном ответе очень большой популяции В-лимфоцитов, каждый из к-рых синтезирует лишь одну разновидность молекул антител. С помощью техники гибридом (гибридные клетки, получаемые слиянием злокачественных и нормальных анти-телобразующих клеток лимфоцитов) удается получить в больших кол-вах однородные моноклональные антитела, к-рые широко используют в качестве высокоспецифич. реагентов для обнаружения, локализации и выделения разл. в-в, а также для диагностики и лечения нек-рых заболеваний. Гомог. И. накапливаются в больших кол-вах в крови и моче больных при ряде злокачеств. поражений лимфоцитов (т. наз. миеломные И.). [c.217]

    Эта идея весьма привлекательна, однако самые разные экспериментальные данные указывают на то, что жгутик напоминает жесткий пропеллер , который вращается при помощи некоего мотора , находящегося у основания . Об этом, в частности, свидетельствует тот факт, что бактерия, искусственно связанная (отри помощи антител) с коротким выступом жгутика другой бактерии, может вращаться с помощью этой второй бактерии. Интересные результаты были получены при изучении мутантного штамма Salmonella, обладающего как бы завитыми жгутиками с вдвое меньшим шагом надспирали , чем у нормального штамма. Оказалось также, что к появлению завитых жгутиков приводит наличие в инкубационной среде п-фторфенилаланина, а нормальные жгутики превращаются в завитые соответствующим изменением pH. [c.282]

    Гибридома (Hybridoma) Гибридная клеточная линия, полученная при слиянии нормальных антителообразующих клеток (лимфоцитов) и миеломных клеток. Обладает способностью к неограниченному росту и синтезу моноклональных антител. [c.547]

    Моноклональные антитела (Mono lonal antibodies) Однотипные антитела, строго специфичные в отношении одного эпитопа (антигенной детерминанты). Синтезируются гибридомами - клеточными гибридами, полученными при слиянии нормальных антителообразующих клеток с миеломной опухолевой клеткой, способной к неограниченному росту. Некоторые мие- [c.553]

    Линия гибридомных клеток не истинно нейрональная модельная система, однако она должна быть упомянута здесь, поскольку представляет собой полезный инструмент исследования в нейрохимии. Каждый В-лимфоцит обычно секретирует только один тип антител. Смесь большого числа моноспецифических антител образует нормальную гетерогенную антисыворотку. Для получения высокопродуктивных моноспецифических лимфоцитов, секретирующих антитела, Кёлер и Милштейн проводили слияние В-клеток иммунной мыши с опухолевыми клетками. В отличие от нормальных лимфоцитов, полученные гибридные клетки растут и размножаются практически бесконечно и продуцируют смесь антител против антигена, используемого для иммунизации. Даже если антиген является индивидуальным белком, продуцируемые антитела представляют собой смесь многих антител, каждое из которых направлено против одного специфичного антигенного участка исходной молекулы. Для получения моноспецифической сыворотки, т. е. раствора антител против одной антигенной области и происходящих из одного вида гибридомных клеток, эти клетки необходимо отобрать и клонировать . Теперь клон продуцирует моноклональные антитела , гомогенную популяцию антител против только одной детерминанты антигена. Эти моноклональные антитела можно пспользовать для разнообразных исследований, например для идентификации функциональных участков молекулы. Но что еще более важно, такой метод может использоваться для полу- [c.371]

    Первые успехи в изучении строения иммуноглобулинов были связаны с изучением иммуноглобулинов, полученных от больных миеломой (см. 1.4). Как уже говорилось, у таких больных в результате присутствия одного злокачественно разросшегося клона В-лимфоцитов вырабатывается огромное количество индивидуального иммуноглобулина, который сравнительно леп о отделить от всех остальных. Дальнейшие успехи в получении индивидуальных антител связаны с достижениями клеточной биологии, позволившими осуществлять слияние клеток миеломы как носителей способности к неограниченному размножению с нормальными В-лимфоцитами как носителями программы для выработки антител определенной, задаваемой экспериментатором специфичности. Получающиеся клетки, гибридоми сохраняют способность к неограниченному размножению и вырабатывают индивидуальные антитела. Так как в этом случае гибридомы происходят от одной исходной слитной клетки, то они представляют собой единый клон получающиеся из них антитела называют поэтому моноклональными антителами. [c.39]

    Одним из перспективных методов получения целевых продуктов из животных клеток является их гибридизация. Примером может служить образование гибридом путем слияния нормальных и трансформированных злокачественных клеток. Г. Мильстейн и соавторы разработали метод получения моноклональных антител (мкАТ) в результате слияния клеток селезенки и миеломы. Образовавшиеся гибридомы от селезенки унаследовали способность к синтезу и секреции антител, а от миеломы — неограниченный рост и деление. [c.494]

    Успехи, достигнутые в изучении структуры иммуноглобулинов, оказались возможными благодвря установлению того факта, что каждый вид антител продуцируется отдельной популяцией клеток (клоном). Присутствующие в крови нормальных индивидов антитела являются продуктами секреции множества клонов и представляют собой сложнейшую смесь близких по структуре, но не идентичных белков. В связи с этим в квчестве материала для исследования в настоящее время используются иммуноглобулины пациентов, страдвющих множественной миеломой — заболеванием, при котором трансформированные клетки выделяют в кровь огромные количества иммуноглобулинов (так называемые миеломные белки). Эти патологические иммуноглобулины по структуре и биологическим свойствам являются нормальными иммуноглобулинами, однако секретируются одним клеточным клоном и поэтому гомогенны. [c.212]

    К иммуноглобулинам, получаемым из крови человека, относятся 1д-ы антирабический, нормальный, противогриппозный, проти-востафилококковый, противостолбнячный, противоэнцефалитный (титрованный на антитела к вирусу клещевого энцефалита) из [c.590]

    В настоящее время люминесцентная микроскопия находит все более широкое применение в различных областях научной и практической работы в вирусологии, микробиологии, гистологии (нормальной и иатологи-ческой), в физиологии, ботанике, онкологии, радиобиологии, а также нри проведении лабораторно-клинических анализов, в санитарных и судебно-медицинских исследованиях. Среди новых направлений большой интерес представляет предложенный в свое время Кунсом с сотрудниками [4] исключительно чувствительный люминесцентно-иммунохимический метод меченых антител. [c.310]

    Большинство антигенов вызывает в организме образование целого набора антител, но каждый отдельно взятый лимфоцит продуцирует лишь одно из них. Миеломы — это злокачественные новообразования иммунной системы они развиваются в результате неконтролируемой пролиферации одной линии лимфоцитов. При этом в больших количествах синтезируется один тип белков-антител. Иными словами, миеломы являются природными продуцентами моноклональных антител. По методу Миль-штейна проводят слияние нормальных (неопухолевых) лимфоцитов и клеток миеломы. Вначале полученные гибриды синтезируют смесь антител, включающую два типа антител родительских клеток, а также гибридные их формы, образующиеся путем ассоциации тяжелых и легких цепей антител двух родительских форм. Впоследств ии в результате элиминации хромосом образуются клетки, способные к синтезу антител лишь одного типа. Это могут быть либо антитела, закодированные в геноме лимфоцита, либо антитела, характерные для клеток миеломы. Скрининг и обнаружение клона, синтезирующего искомое антитело, ведут при помощи биохимических и иммунохими-ческих методов. Схема этого метода дана на рис. 7.5. [c.313]

    СОСТОИТ из нескольких гетерогенных компонентов, к которым относится, в частности, у-глобулиновая фракция, или фракция антител. Около 40% крови приходится на эритроциты, которые в свою очередь на 35% состоят из гемоглобина — белка с молекулярным весом 64 500. Роль эритроцитов сводится просто к тому, чтобы не дать гемоглобину диффундировать из кровяного русла. Нормальный гемоглобин взрослого человека, обозначаемый символом НЬА, состоит из четырех по.липептидных цепей двух одинаковых а-цепей, каждая из которых содержит 141 аминокислотный остаток, и двух одинаковых более длинных р-це-пей, содержащих по 146 аминокислотных остатков. М-концевые участки этих цепей имеют следующий состав Вал-Лей-Сер-Про-Ала-Асп-Лиз-(а-цепь) и Вал-Гис-Лей-Тре-Про-Глу-Глу-Лиз-(р-цепь). С каждой цепью соединена также группа гема, несущая атом железа. Таким образом, в одной молекуле гемоглобина имеется четыре гемогруппы. Железо находится в геме в состоянии двухзарядного иона Ре +. Может возникнуть вопрос, есть ли смысл приписывать молекуле гемоглобина структуру гРа Не проще ли считать ее димером ар Однако при нормальных условиях роль переносчика кислорода в организме играет именно структура ааРг, простой димер ар способностью переносить кислород, по-види мому, не обладал бы (см. разд. 5 гл. XXII). Ряд других данных, в том числе данные по титрованию и равновесию диссоциации, о которых пойдет речь ниже, также свидетельствуют в пользу структуры агРг как наиболее простой структурной единицы гемоглобина. Пространственное строение этой единицы будет детально рассмотрено в разд. 2 гл. XV. [c.222]

    Антитела образуются в особых клетках, называемых плазмо-бластами, плазмобласты — вполне нормальные клетки, имеющие все, что нужно, для производства белков (рибосомный аппарат), но продукция их состоит из антител. Одной из удивительных биологических загадок является вопрос о том, каким образом плазмобласты принимают заказ на то или иное антитело. [c.186]

    Это центральное положение клонально-селекционной теории иммунитета долгие годы вызывало большие дискуссии. Была понятна предтерминированность к антигенам, с которыми организм встречался в процессе филогенеза, но возникали сомнения действительно ли есть Т-лимфоциты с рецепторами к новым (синтетическим и химическим) антигенам, возникновение которых в природе связано с развитием технического прогресса в XX веке. Однако специальные исследования, проведенные с помощью наиболее чувствительных серологических методов, выявили у человека и более чем у 10 видов млекопитающих нормальные антитела к ряду химических гаптенов — динитрофенилу, З-йод-4-оксифенилуксусной кислоте и т. д. [118]. По-видимому, трехмерные структуры рецепторов действительно весьма разнообразны, и в организме всегда может найтись несколько клеток, рецепторы которых достаточно близки к новой детерминанте. Возможно, что окончательная притирка рецептора к детерминанте может происходить после их соединения в процессе дифференцировки Трлимфоцитов в Тг-лимфоциты после встречи со своим антигеном Тр клетка путем одного — двух делений превращается в ан-тигенраспознающую и активированную (коммитирован-ную, примированную по терминологии разных авторов) антигеном долгоживущую Тг-клетку. Тг-лимфоциты способны к рециркуляции, могут повторно попадать в тимус, чувствительны к действию анти-0-, антитимоцитарных и антилимфоцитарных сывороток. Эти лимфоциты составляют центральное звено иммунной системы. После образования клона, т. е. размножения путем деления в морфологически идентичные, но функционально неоднородные клетки, Т-лимфоциты активно участвуют в формировании иммунного ответа. [c.8]

    Однако, хотя важная роль антител в иммунитете не вызывает сомнений, механизм иммунитета не исчерпывается реакцией антиген — антитело. Столь же важную роль играют более или менее неспецифические механизмы, например непроницаемость кожи и слизистых оболочек, их бактепицидная способность, повышение температуры, которое часто сопровождает инфекцию, действие нормальных компонентов плазмы, таких, как комплемент и пропердин, и, наконец, фагоцитоз. Очевидно, из всех механизмов сопротивляемости фагоцитоз является самым важным. Здесь мы остановимся лишь на специфических механизмах иммунитета, не обсуждая других перечисленных выше механизмов устойчивости. [c.12]

    В настоящее время нет сомнений в том, что специфичность антител зависит от их химической структуры. Однако еще неясно, чем именно обусловлена эта специфичность — аминокислотным составом, последовательностью аминокислот или характером свертывания полипептидной цепи при образовании глобулярных молекул, показанных на фиг. 3. Полинг [9] счит-ает правильным последнее предположение. Действительно, при анализе антител не обнаружено каких-либо четких различий в аминокислотном составе между разными антителами или между антителами и нормальным глобулином [1,15,16]. Если различия в основном заключаются в последовательности аминокислот и ограничиваются активным центром антитела ( entral differential segment ) [6], то они слишком незначительны, чтобы их можно было обнаружить существующими аналитическими методами. [c.16]

    Ерне [1 ] предположил, что в организме постоянно образуются молекулы глобулина, очень разнообразные по конфигурации и, следовательно, по специфической реактивности. Некоторые из этих молекул случайно имеют конфигурацию, дополнительную к поверхностным группам каких-либо антигенов. Это нормальные антитела . Если антиген попадает в кровь, то он соединяется с молекулами, случайно имеющими соответствующую специфичность. Подобные комплексы фагоцитируются и переносятся к клеткам, образующим антитела. Затем антиген отделяется и, вероятно, выводится, а клетка, по неясным еще причинам, начинает вырабатывать молекулы глобулина, подобные только что введенной молекуле. Попадание в кровь этих новых специфических глобулинов обусловливает увеличение количества антител. [c.42]

    Бернет и Ледерберг предположили, что клетки, образующие антитела, отличаются сверхмутабиль-ностью , т. е. что в нормальных условиях возможны частые изменения типа глобулиновых молекул, продуцируемых такими клетками. Поэтому в крови [c.43]

    Мы употребляем термин антиген по крайней мере в двух смыслах. Прежде всего антиген — это вещество, которое при введении в организм животного (обычно парентерально) вызывает образование специфических антител. Иммунологи применяют термин антиген и для препаратов, которые только реагируют с антителами in vitro. Например, смесь липидов нормальных тканей, применяемых в реакции Вассермана, обозначается как вассермановский антиген, хотя введение его животному, вероятно, не вызовет образования специфических антител. [c.47]

chem21.info


Смотрите также