Большая Энциклопедия Нефти и Газа. Антитела к ксантиноксидаза сульфитоксидаза


Большая Энциклопедия Нефти и Газа, статья, страница 1

Сульфитоксидаза

Cтраница 1

Сульфитоксидаза из бычьей печени имеет молекулярный вес 115 000 и состоит из двух субъединиц молекулярным весом 55 000 каждая. Функциональная конгруентность тема и ферментативной активности подтверждается также корреляцией между исчезновением ферментативной активности и утратой тема, восстанавливаемого сульфитом, при тепловой инактивации сульфитоксидазы. Аналитические данные указывают на наличие двух ге-мовых групп в молекуле сульфитоксидазы. Один из гемов восстанавливается сульфитом с высокой скоростью, а другой существенно медленнее. Интересно, что гем оказывается полностью восстановленным, когда в роли акцептора выступает цитохром с. Было высказано предположение, что одноэлектрон-ные акцепторы взаимодействуют с сульфитоксидазой по центру, предшествующему тему.  [2]

Сульфитоксидаза превращает сульфит в сульфат и строго специфична к своему субстрату. Фермент присутствует преимущественно в печени, где он локализуется в межмембранном пространстве митохондрий. Его физиологическим акцептором электронов является митохондриальиый цитохром с. Сульфитоксидаза выделена из печени человека, крупного рогатого скота, кроликов и крыс. Она представляет собой димер, образованный двумя идентичными субъединицами с молекулярной массой 55000 - 60000, из которых каждая содержит по одному атому молибдена и одной молекуле цитохрома Ь5 - типа.  [3]

Подтверждением важной роли сульфитоксидазы в организме человека является сообщение о ребенке, печень, почки и мозг которого совершенно не обнаружили сульфитоксидазной активности.  [4]

Было показано, что сульфитоксидаза - простейший молиб-денсодержащий фермент, в состав которого входят только две про-стетические группы - молибденовая и гемовая. Двухэлектронный окислительный субстрат - молекулярный кислород, вероятно, связывается с гемовой группой, хотя прямых доказательств этого не получено. Сходство в спектрах ЭПР сульфитоксидазы и ксантиноксидазы указывает на общность структуры окружения молибдена в этих двух ферментах. Потребуются дальнейшие эксперименты с сульфитоксидазой того же типа, что и исследования, выполненные методом ЭПР в случае ксантиноксидазы, для того чтобы уточнить пределы аналогии в структуре этих ферментов. Анионы подавляют реакции обоих ферментов с одноэлектронными акцепторами. Причины этих эффектов пока неизвестны.  [5]

В ранних работах по сульфитоксидазе имеется некоторая путаница. Позже ситуация в значительной мере прояснилась [109], однако детали механизма окисления сульфита молекулярным кислородом все еще неизвестны.  [6]

Из перечисленных в табл. 20 ферментов остановимся на ксантиноксидазе и сульфитоксидазе, которые имеют существенное значение в патологии человека, а также упомянем молибденовый кофактор, содержащий молибден, железо и серу.  [7]

В настоящее время известно 15 молибденсодержащих ферментов, три из которых встречаются в животном организме. Это альдегидоксидаза, ксантиноксидаза и сульфитоксидаза. В биологических системах молибден присутствует в четырех состояниях окисления ( IV-VI), из которых соединения Mo ( V) имеют отчетливый ЭПР-сигнал, легко распознаваемый по его характерной сверхтонкой структуре, содержащей шесть сателлитных пиков.  [8]

Дача крысам вольфрама приводит к инактивации молибденсодержащих ферментов. Вольфрам частично замещает молибден в сульфитоксидазе, но значительная часть фермента остается полностью лишенной металла. Вольфрам в биологических системах не способен восстанавливаться, подобно молибдену, в четырехвалентную форму из пятивалентной, что, по-видимому, и является причиной инактивации им молибденсодержащих ферментов. Что же касается ксантиноксидазы, то в присутствии вольфрама образуется ее не содержащий металла апопротеид, лишенный ферментативной активности. Молибденовый кофактор восстанавливает активность обоих апопротеидов.  [9]

ЭПР, типичный для аксиально симметричного поля лигандов, однако при диссоциации этой группы симметрия понижается до ромбической. Значение сверхтонкого расщепления около 1 мТ у кислой формы сульфитоксидазы ( рис. 43) указывает на то, что протон связан не непосредственно с молибденом. Изменения симметрии поля лигандов вокруг молибдена могут быть объяснены протонированием и де-протонированием одной из лигандных групп. Поскольку не обнаружено расщепления на азоте, можно предположить, что протон связан с кислородом или серой. Зависимость сигнала ЭПР Mo ( V) сульфитоксидазы от рН дает объяснение различий между спектрами фермента, восстановленного сульфитом, после введения фер-рицианида в стационарном состоянии, и спектрами, наблюдаемыми после полного восстановления феррицианида. После восстановления всего феррицианида конечный спектр ЭПР все еще характерен для кислой формы, хотя и в меньшей степени, чем стационарный спектр в ходе реакции. Возможно, что при окислении сульфита феррицианидом образуются существенные количества кислоты.  [10]

Это различие может определяться большей стабилизацией парамагнитного мономерного состояния в равновесии мономер - димер в случае сульфитоксидазы или более слабым взаимодействием между Mo ( V) и другим парамагнитным центром этого фермента. Несмотря на эти количественные различия, спектры ЭПР сульфитоксидазы и ксантиноксидазы во многих отношениях сходны между собой. Спектры ЭПР обоих ферментов обнаруживают двухфазную зависимость от температуры: переход в окружении молибдена наблюдается примерно при - 113 С. Это дублетное расщепление, по-видимому, определяется взаимодействием с протоном кислотнодиссоциирующей группы.  [11]

Сульфитоксидаза из бычьей печени имеет молекулярный вес 115 000 и состоит из двух субъединиц молекулярным весом 55 000 каждая. Функциональная конгруентность тема и ферментативной активности подтверждается также корреляцией между исчезновением ферментативной активности и утратой тема, восстанавливаемого сульфитом, при тепловой инактивации сульфитоксидазы. Аналитические данные указывают на наличие двух ге-мовых групп в молекуле сульфитоксидазы. Один из гемов восстанавливается сульфитом с высокой скоростью, а другой существенно медленнее. Интересно, что гем оказывается полностью восстановленным, когда в роли акцептора выступает цитохром с. Было высказано предположение, что одноэлектрон-ные акцепторы взаимодействуют с сульфитоксидазой по центру, предшествующему тему.  [13]

Было показано, что сульфитоксидаза - простейший молиб-денсодержащий фермент, в состав которого входят только две про-стетические группы - молибденовая и гемовая. Двухэлектронный окислительный субстрат - молекулярный кислород, вероятно, связывается с гемовой группой, хотя прямых доказательств этого не получено. Сходство в спектрах ЭПР сульфитоксидазы и ксантиноксидазы указывает на общность структуры окружения молибдена в этих двух ферментах. Потребуются дальнейшие эксперименты с сульфитоксидазой того же типа, что и исследования, выполненные методом ЭПР в случае ксантиноксидазы, для того чтобы уточнить пределы аналогии в структуре этих ферментов. Анионы подавляют реакции обоих ферментов с одноэлектронными акцепторами. Причины этих эффектов пока неизвестны.  [14]

В этом одна из причин, которая затрудняла изучение молибденсодержащих белков. Наличие двух атомов молибдена в молекуле белка может отражать отчетливо выраженную склонность низкомолекулярных соединений молибдена к образованию димерных комплексов, однако оно может быть и случайным, поскольку ни в одном из указанных белков не обнаружено взаимодействия между атомами молибдена. Ферменты млекопитающих ( альдегидоксидаза, сульфитоксидаза, ксантиндегидроге-наза и ксантиноксидаза) выделены из печени, однако наилучшим источником ксантиноксидазы является молоко. Основным источником нитратредуктазы и нитрогеназы служат бактерии.  [15]

Страницы:      1    2

www.ngpedia.ru

Сульфитоксидаза - Справочник химика 21

    В пятом периоде периодической системы только молибден н иод обладают четко выраженными биологическими функциями. Молибден активирует ксантиноксидазу и альдегидоксидазу вероятно, он входит в состав связывающего центра нитратредуктузы и сульфитоксидазы. Механизм, с помощью которого молибден связывает субстрат и участвует в каталитической стадии ферментативной реакции, далеко еще не выяснен. Модельные эксперименты с комплексами молибден — цистеин как будто указывают на возможную связь молибдена с серой в его ферментных комплексах. Все три вышеназванных фермента содержат также флавины [Р1], хотя молибден, по-видимому, не связан с ними непосредственно. [c.365]     Уже давно признано, что молибден относится к элементам, необходимым растениям для роста, однако никаких убедительных данных об обязательном его присутствии в пище животных пока не получено. Тем не менее он обнаружен по крайней мере в трех ферментах животных и, кроме того, еще в четырех ферментах бактерий и растений - . Альдегидоксида-за, ксантиноксидаза печени (т. 2, стр. 265) и родственные ксантиндегидрогеназы некоторых бактерий содержат молибден, существенный для проявления каталитической активности. Сульфитоксидаза печени (гл. 14, разд. Ж), нитратредук-таза бактерий растений (гл. 10, разд. Е.2), бактериальная формиатдегидрогеназа (гл. 9, разд. В, 3) и нитрогеназа (данный раздел книги) — вот список известных ферментов, активность которых зависит от присутствия молибдена. [c.85]

    Точный механизм участия молибдена в катализе неизвестен. Состояния Мо(1П) и Mo(V) парамагнитны, но легко регистрируемые ЭПР-сигналы отвечают лишь состоянию Mo(V). Этот сигнал легко распознать по его характерной сверхтонкой структуре, содержащей шесть линий. Такой сигнал был зарегистрирован в случае ксантиноксидазы, нитратредуктазы и сульфитоксидазы при их взаимодействии с субстратами. Однако нитрогеназа дает только сигналы ЭПР, характерные для железа. Более того, нет никаких данных, из которых следовало бы, что N2 в нитрогеназе реагирует непосредственно с атомами молибдена. Тем не менее заманчиво предположить, что присутствие молибдена в нитрогеназе связано со способностью Mo(VI) акцентировать три электрона с образованием Мо(П1). Два атома Мо(П1), отдавая далее по три электрона, могли бы доставить те шесть электронов, которые нужны для осуществления реакции (14-10). [c.86]

    С молибденом в организме может конкурировать вольфрам. Так, у крыс, получающих с пищей вольфрам в количестве 100 ч. на млн., образуется вольфрамсодержащая сульфитоксидаза, которая уже неспособна нормально функционировать. Однако при этом в еще больших количествах накапливается не содержащий металла апобелок. У этих крыс образуется также и неактивная, не содержащая металла ксантиноксидаза . Очевидно, вольфрам каким-то образом препятствует включению молибдена в молекулы ферментов. Большая часть молибдена в азотфиксирующих бактериях Azotoba ter находится в специальном белке, предназначенном для накопления молибдена.  [c.86]

    Есть еще реакция, которая у животных обычно играет подчиненную роль, ио может приобретать важное значение при недостатке сульфитоксидазы окислительное слияние двух молекул сульфита в тиосульфат (реакция р, рис. 14-15). Тиосульфат участвует в одной интересной реакции — фермент со странным названием роданеза, найденный в печени, катализирует вытеснение сульфит-иона из молекулы тиосульфата цианид-ионом [уравнение (14-39)]. Реакция приводит к детоксикации циа-ннд-нонов. [c.135]

    Окисление сульфита в сульфат осуществляется сульфит-цитохром с — редуктазой [сульфитоксидазой уравнение (10-28), стадия д -или идет через образование адеиилилсульфата (называемого также адено-зин-5 -фосфосульфатом, сокращенно APS). [c.429]

    Бактерии не единственные организмы, способные окислять восстановленные соединения серы. Например, в печени животных присутствует содержащая молибден сульфитоксидаза (гл. 14, разд. Ж), функция которой, вероятно, состоит в детоксикации двуокиси серы путем окисления сульфита в сульфат [122]. [c.430]

    Установлено, что фиксация происходит и в том случае, когда два белка происходят не только из одного и того же организма, но и из разных организмов. По-видимому, природа создала только один основной механизм фиксации азота, и возможны лишь некоторые вариации на этой основе. Интересно, что нитратредуктаза (NOj - -- N02 ) из Neurospora rassa тоже состоит из двух белков, один из которых содержит молибден, причем этот молибденсодержащий белок можно заменить на другие молибденовые белки (обычно после обработки кислотой), входящие в состав совершенно отличных ферментов, включая ксантин-, альдегид- и сульфитоксидазы, или MoFe-белок нитрогеназы из двух разных бактерий [156]. Пока не появлялись сообщения о реконструкции нитрогеназы из обычного Fe-белка и свободного Мо-белка. В работе [156] было отмечено, что, возможно, существуют молибденсодержащие субъединицы, которые выступают в качестве кофактора и являются общими для всех молибденсодержащих ферментов животных,растений и микроорганизмов. Эти субъединицы, вероятно, не только функционируют как переносчики электронов, но и связывают между собой субъединицы фермента. Если это предположение справедливо, то весьма вероятно, что основную электрон-транспортную реакцию в нитрогеназах осуществляет Мо-белок, тогда как другой белок модифицирует реакцию, приспосабливая ее к определенному субстрату. Таким [c.232]

    Мы подчеркнули важное значение молибдена для растений, однако он входит в состав и некоторых ферментов, содержащихся в животных организмах. Он участвует в окислении пуриновых оснований в мочевую кислоту. Ксантиноксидаза и родственный ей фермент альдегидоксидаза обладают двойственной субстратной специфичностью. Оба эти фермента катализируют окисление многих гетероциклических азотсодержащих соединений, а также альдегидов и, по-видимому, используют кислороде качестве физиологического конечного акцептора электронов. Третий фермент — ксан-тиндегидрогеназа — имеет близкие функциональные свойства, но, вероятно, использует НАД в качестве акцептора электронов. Спектры ЭПР этих молибденсодержащих ферментов существенно различаются. Это может означать, что различия между ферментами, по крайней мере отчасти, определяются тонкими различиями в составе комплекса молибдена, связанного с простетической группой. Сравнительно недавно к списку молибденсодержащих ферментов была добавлена сульфитоксидаза. Наличие в ней молибдена было случайно обнаружено при исследовании методом ЭПР гемового компонента [6. Роль этих ферментов млекопитающих изучена слабо. Однако в литературе описан случай смерти ребенка в возрасте 23 месяцев с нейрологическими и другими патологическими нарушениями, по-видимому связанными с отсутствием в организме сульфитоксидазы [7]. [c.261]

    Известно, что молибден является существенным компонентом шести ферментов альдегидоксидазы, нитратредуктазы, нитрогеназы, сульфитоксидазы, ксантиндегидрогеназы и ксантиноксидазы. Из них четыре содержат флавинадениндинуклеотид (ФАД) (УП), и все шесть содержат железо в виде цитохрома или серусодержа- [c.263]

    В данной главе рассмотрены те свойства соединений молибдена, которые могут оказаться существенными для выяснения электронной структуры и стереохимических свойств комплексов молибдена. Наибольшее внимание будет уделено соединениям молибдена в водных растворах, хотя по последним данным сульфитоксидаза печени крыс локализована во внутримембранном пространстве митохондрий (разд. 14.6), откуда видно, что исследование неводных систем представляет также значительный интерес. Из образуемых молибденом ионов устойчивы в биологическом окружении ионы Мо(П1), Мо(1У) и Мо(У), и они имеют три, два и один -электрон соответственно. Следовательно, эти ионы должны давать в электронных спектрах (1—(1-переходы, их можно обнаружить методом ЭПР, и они могут быть также охарактеризованы статическим парамагнетизмом. Все эти свойства могут быть в принципе использованы для установления природы лигандов, связанных с металлом, окислительного состояния молибдена и стереохимии лигандного окружения. [c.266]

    Катализ неферментативного аэробного окисления сульфита ионами металлов и свободными радикалами, а также его подавление перехватчиками частиц, способных передавать цепи, помогли идентифицировать этот процесс как свободнорадикальную цепную реакцию. В отличие от неферментативных реакций окисление сульфита до сульфата при участии сульфитоксидазы в организмах млекопитающих, растений и бактериях происходит в окружении, содержащем множество веществ, являющихся перехватчиками свободных радикалов. Кроме того, этот процесс идет при концентрациях сульфита, слишком малых для поддержания эффективно распространяющейся цепной реакции. [c.297]

    Сульфитоксидаза была выделена в высокоочищенном состоянии из организмов млекопитающих и птиц [96, 97]. У млекопитающих ее роль состоит, по-видимому, в окислительной детоксикации соединений серы, особенно в окислении двуокиси серы и сульфита до сульфата [98, 99]. Активность фермента из печени крыс была локализована во внутримембранном пространстве митохондрий [100]. Подтверждением важной роли сульфитоксидазы в организме человека является сообщение о ребенке, печень, почки и мозг которого совершенно не обнаружили сульфитоксидазной активности. Этот ребенок умер в возрасте 23 месяцев с признаками ией-рологических и других патологических аномалий [7]. [c.297]

    В ранних работах по сульфитоксидазе имеется некоторая путаница. Сообщения о прямой оксидазной активности и наличии гемовой простетической группы в ферменте из печени, а также о способности бактериальной сульфитоксидазы переносить электроны на кислород то подтверждались 101—103], то опровергались [104— 106]. Позже ситуация в значительной мере прояснилась [109], однако детали механизма окисления сульфита молекулярным кислородом все еще неизвестны. Сульфитоксидаза из бычьей печени очищена до 75%-ной однородности [96]. Этот белок способен передавать электроны от сульфита на такие одноэлектронные акцепторы, как цитохром с и феррицианид, и на такие двухэлектронные акцепторы, как молекулярный кислород, 2,6-дихлорфенол, индофенол и метиле- [c.297]

    Сульфитоксидаза из бычьей печени имеет молекулярный вес 115 ООО и состоит из двух субъединиц молекулярным весом 55 ООО каждая. Удивительное сходство УФ-спектров поглощения восстановленного фермента и восстановленного цитохрома, параллельное обогащение гемом, рост сульфитоксидазной активности в процессе очистки фермента и идентичная миграция гема и ферментативной активности в процессе электрофореза позволяют идентифицировать гем как простетическую группу сульфитоксидазы [108]. Функциональная конгруентность гема и ферментативной активности подтверждается также корреляцией между исчезновением ферментативной активности и утратой гема, восстанавливаемого сульфитом, при тепловой инактивации сульфитоксидазы. Аналитические данные указывают на наличие двух гемовых групп в молекуле сульфитоксидазы. Один из гемов восстанавливается сульфитом с высокой скоростью, а другой существенно медленнее. Интересно, что гем оказывается полностью восстановленным, когда в роли акцептора выступает цитохром с. Было высказано предположение, что одноэлектронные акцепторы взаимодействуют с сульфитоксидазой по центру, предшествующему ге-му. Кроме того, полагали, что перенос электронов от некоторого центра фермента на одноэлектронный акцептор, например на феррицианид, должен идти медленнее, чем перенос электрона от сульфита на этот центр, поскольку стадия, замедление которой тормозит [c.298]

Рис. 43. Спектры ЭПР Мо(У) сульфитоксидазы в присутствии сульфита [109]. Рис. 43. Спектры ЭПР Мо(У) сульфитоксидазы в присутствии сульфита [109].
    В спектрах ЭПР сульфитоксидазы проявляет себя около 50% всего содержащегося в ней молибдена, тогда как в случае ксантиноксидазы — только около 37%. Это различие может определяться большей стабилизацией парамагнитного мономерного состояния в равновесии мономер —димер в случае сульфитоксидазы или более слабым взаимодействием между Мо(У) и другим парамагнитным центром этого фермента. Несмотря на эти количественные различия, спектры ЭПР сульфитоксидазы и ксантиноксидазы во многих отношениях сходны между собой. Спектры ЭПР обоих ферментов обнаруживают двухфазную зависимость от температуры переход в окружении молибдена наблюдается примерно при —113°С. Спектры обоих ферментов зависят от pH, причем в них обнаруживается дублетное расщепление, исчезающее при высоких pH или при замене обычной воды на ОгО (рис. 39 и 43). Это дублетное расщепление, по-видимому, определяется взаимодействием с протоном кислотнодиссоциирующей группы. При более низких значениях [c.299]

    Было показано, что сульфитоксидаза — простейший молибденсодержащий фермент, в состав которого входят только две про-стетические группы — молибденовая и гемовая. Данные спектроскопии ЭПР и результаты ингибиторного анализа показывают, что молибден входит в состав центра, связывающего сульфит, и что металл в этом центре активного фермента находится в состоянии Мо(У). Двухэлектронный окислительный субстрат - молекулярный кислород, вероятно, связывается с гемовой группой, хотя прямых доказательств этого не получено. Сходство в спектрах ЭПР сульфитоксидазы и ксантиноксидазы указывает на общность структуры окружения молибдена в этих двух ферментах. Потребуются дальнейшие эксперименты с сульфитоксидазой того же типа, что и исследования, выполненные методом ЭПР в случае ксантиноксидазы, для того чтобы уточнить пределы аналогии в структуре этих ферментов. Сульфитоксидаза птиц [97] очень близка к сульфитоксидазе из бычьей печени [96]. Анионы подавляют реакции обоих ферментов с одноэлектронными акцепторами. Кроме того, они влияют на седиментационные свойства сульфитоксидазы птиц и на сигнал ЭПР Мо(У). Причины этих эффектов пока неизвестны. [c.300]

    Как и в случае других молибденсодержащих ферментов, имеется досадно мало сведений о структуре сульфитоксидазы. Однако относительная простота этого фермента и его важная физиологическая роль в организме человека делают его весьма перспективным объектом дальнейших исследований. [c.300]

    В СВЯЗИ С проблемой исследования молибденовых ферментов наибольший интерес представляет обнаружение слабого сигнала ЭПР водных растворов Мо(У) и цистеина [П7]. Хотя этот сигнал соответствует менее чем 1% всего молибдена (тогда как в случае ксантиноксидазы и сульфитоксидазы сигнал ЭПР соответствует до 50% молибдена), его появление указывает на возможность равновесия типа диамагнитный димер парамагнитный мономер. Наличием такого равновесия было объяснено несоответствие между величиной сигнала ЭПР и содержанием молибдена в ферментах [61 ]. Стабильность и интенсивность сигнала ЭПР растворов Мо(У) и цистеина критически зависит от концентрации компонентов, pH и природы буфера. В 1 М фосфатном буфере (pH 6) при концентрации Мо(У) 10 М наблюдается слабый неустойчивый сигнал ЭПР [117]. Однако Хуанг и Хэйт [118] получили вполне устойчивый, хорошо разрешенный сигнал ( г = 2,029, = 1,972, == 1,931 Л(9 Мо), 22 = 5,4, уу = 2,4,. гл = 3,4 мТ) при pH 7 —10 в 0,2 М фосфатном буфере при концентрации Мо(У) 10 М. При введении цистеина в раствор Мо(У) наблюдаются два изменения окраски. Сигнал ЭПР появляется при втором переходе. Интенсивность сигнала ЭПР пропорциональна квадратному корню из концентрации молибдена. Эти наблюдения подтверждают, что сначала Мо(У) и цистеин образуют диамагнитный димер, который затем диссоциирует с образованием парамагнитного мономера. С повышением температуры интенсивность сигнала ЭПР уменьша- [c.305]

    Прямые доказательства участия молибдена в связывании субстрата и в каталитической фазе ферментативного цикла получены только для ксантиноксидазы. Отчетливое сходство между параметрами спектров ЭПР и субстратной специфичностью этого фермента и альдегидоксидазы приводит к выводу, что молибден находится и в связывающем центре альдегидоксидазы. Ограниченные данные по ЭПР позволяют предположить, что молибден участвует и в структуре связывающего центра нитратредуктазы из М. (1епИг111сапз, а также сульфитоксидазы млекопитающих и птиц. Исследования молибденовых комплексов как моделей ферментов сосредоточились в основном на комплексах с серусодержащими лигандами, особенно с цистеином, хотя и не получено надежных доказательств того, что в ферментах молибден действительно связан с серой. Молибден-цистеиновый комплекс проявляет редуктазную активность в отношении ряда субстратов, которые в то же время являются и субстратами нитрогеназы, однако в присутствии этих модельных комплексов обнаруживаются лишь следы аммиака от восстановления азота. Модельные комплексы существенно отличаются от ферментов и по количеству молибдена, который проявляет себя в спектрах ЭПР. Спектры ЭПР ферментов соответствуют до 50% общего содержания в них молибдена, тогда как модельные комплексы дают сигнал, соответствующий не более 4% содержащегося в них молибдена. Возможно, что конформация белка в области активного центра фермента стабилизирует каталитически активную мономерную структуру молибденового комплекса. Однако в отсутствие надежных структурных данных все это, как и различные схемы механизма нитрогеназной реакции, не более чем умозрительные предположения. [c.327]

    Сульфитоксидаза (КФ 1.8.3.1), локализованная, очевидно,, между внутренней и наружной мембранами митохондрий, не обнаруживает активности, если митохондрии помещают в среду с высокомолекулярным акцептором — цитохромом с, а не с феррицианидом эти данные свидетельствуют о том, что наружная мембрана является барьером для первого вещества и не препятствует прохождению второго [810]. С другой стороны, 3-гидроксибутиратдегидрогеназа (КФ 1.1.1.30) также не проявляет активности в митохондриях печени крысы, но в этом случае даже и химическая обработка митохондрий дает лишь небольшой эффект чтобы демаскировать фермент, требуется весьма сильное воздействие, например разрушение митохондрий ультразвуком [2744]. Бендолл и де Дюв [351] сравнивали активацию латентных дегидрогеназ из митохондрий с активацией ферментов, находящихся в лизосомах, и пришли к заключению, что имеются два типа активации. Во-первых, может увеличиться проницаемость митохондриальных мембран, так [c.90]

    Сульфитоксидаза печени, окисляющая S0 " до SO4 , локализована в межмембранном пространстве митохондрии. Фермент представляет собой димер двух идентичных субъединиц (мол. масса 57 000), каждая из которых содержит один гем и один атом молибдена. Последний (в форме Мо +) непосредственно принимает электроны от SO -, превращаясь в Мо"+, способный восстанавливать гем. Полностью восстановленный фермент имеет форму Mo +-Fe +, которая легко обнаруживается методом ЭПР. In situ восстановленный фермент передает электроны цнтохрому с, так что отношение Р/О для окисления SO3 составляет единицу. [c.497]

chem21.info

Содержание антител к ксантиноксидазе у больных системной красной волчанкой в зависимости от характера течения, продолжительности заболевания, объема кумулятивного повреждения организма

Содержание антител к ксантиноксидазе у больных системной красной волчанкой в зависимости от характера течения, продолжительности заболевания, объема кумулятивного повреждения организма

Содержание антител к КО исследовали в зависимости от показателей СКВ, характеризующих развитие патологического процесса на всем его протяжении (вариант течения СКВ по классификации В.А.Насоновой, продолжительность заболевания, объем кумулятивного повреждения организма вследствие СКВ).

Учитывая наличие выраженных связей между иммунологическими нарушениями и характером течения СКВ, нами была проведена попытка анализа особенностей антителообразования к КО в зависимости от варианта течения заболевания. Под нашим наблюдением находилось 2 больных с острым течением СКВ, 44 – с подострым и 14 – с хроническим течением болезни. При анализе изучаемых показателей статистически значимых различий в зависимости от варианта течения СКВ выявлено не было (см. таблицу 11).

Таблица 11.

Уровень антител к КО в зависимости от варианта течения СКВ

Показатель

Течение СКВ

P

Острое (n=2)

Подострое (n=44)

Хроническое (n=14)

Уровень Ат к КО, Ед

M

(SD)

0,192

(0,018)

0,141

(0,088)

0,110

(0,086)

0,33

Позитивны по Ат к КО

n

(%)

2

(100%)

24

(54,5%)

6

(43%)

0,29

После проведенного в условиях стационара лечения у больных СКВ отмечена существенная динамика показателей содержания Ат к КО как в группе больных с хроническим течением заболевания (F=38,4; р<0,0001), так и с подострым вариантом течения СКВ (F=35,9; р<0,0001). У больных с острым течением достоверных изменений в содержании антител к КО после проведенного лечения обнаружено не было (р> 0,05). Следует отметить, что при повторных обследованиях одних и тех же пациентов иногда происходила смена оценки варианта течения. Клиническая оценка варианта течения часто включала в себя тяжесть состояния, то есть активность процесса. Так, все больные СКВ, течение которых было оценено как острое, имели очень высокую активность болезни, больные с хроническим вариантом течения – минимальную или умеренную. В то же время в дебюте СКВ оценка варианта течения всегда затруднительна и не удается выделить факторы, позволяющие предсказать тот или иной вариант течения.

Продолжительность болезни также не оказывала существенного влияния на уровни исследуемых показателей, так как основным фактором, определяющим наблюдаемые изменения, являлась активность СКВ. Изучение антител к КО у больных в дебюте СКВ (продолжительность болезни менее 2 лет) показало возможность использования этого индикатора для ранней диагностики СКВ. Более чем у 60% больных нами были обнаружены антитела к КО на ранних стадиях болезни.

Удалось установить значимую корреляционную связь уровня антител к КО с повреждением, определяемым с помощью индекса SLICC/ACR. Коэффициент корреляции составил 0,29 (р=0,022). Было выполнено сравнение пациентов СКВ, не имевших повреждения (значения индекса равны 0) (n=15, 25%), с больными, имевшую любую степень повреждения (n=45, 75%). У больных СКВ, не имевших повреждения, содержание антител к КО было заметно ниже, чем у больных с наличием повреждения (0,097±0,056 против 0,139±0,044; р=0,041) (см. рисунок 2).

Рисунок 2. Уровень Ат к ксантиноксидазе у больных СКВ с отсутствием/наличием повреждения ( – MSD; ■ – Mm)

Необратимые изменения в состоянии здоровья при СКВ связаны с последствиями активного воспалительного процесса, а также с неблагоприятными изменениями, возникшими в результате проводимой терапии или сопутствующих заболеваний. Принимая во внимание прямую корреляционную связь слабой силы уровня Ат к КО со степенью выраженности повреждения и возможную патогенетическую роль Ат к КО в повреждении можно предположить, что у больных с наличием аутоантител необратимые изменения развиваются быстрее, чем у пациентов с полностью функциональной системой ПМ.

У больных СКВ, принявших участие в исследовании, выявлено снижение показателей ВАШ EQ-5D (46,6±18 мм) по сравнению с популяционными данными. Обнаружена статистически значимая обратная связь с показателями повреждения (r= -0,497; p=0,0008). В то же время, корреляционный анализ не позволил выявить достоверной зависимости показателя качества жизни с уровнями антител к КО (r= -0,17; p=0,2). Сравнение между собой групп больных СКВ, имевших и не имевших Ат к КО, показало несколько более высокие значения показателей качества жизни, если такие аутоантитела не выявлялись (52±19,9 мм по сравнению с 42±15,4 мм), но эта разница была статистически не значимой (р=0,07).

Содержание антител к ксантиноксидазе у различных клинических групп больных системной красной волчанкой

Особый интерес представляют данные о зависимости уровня Ат к КО от наличия у больных СКВ различных клинических проявлений (см. рисунок 3). Корреляционный анализ выявил связь уровней Ат к КО с тяжестью поражения почек (r=0,31; p=0,024), а также наличием у больных СКВ цитопенического синдрома (r=0,35; p=0,012).

Рисунок 3. Спектр клинических проявлений среди больных СКВ позитивных и негативных по содержанию антител к КО.

Анализ связей уровня антител к КО с лабораторными и им­муно­логическими показателями позволил выделить ряд статистически значимых корреляций между изучаемыми показателями.

Уровень антител к КО имел достоверные связи слабой и средней силы с индикаторами поражения почек при СКВ – протеинурией (r=0,26; p=0,037), лейкоцитурией (r=0,36; p=0,002) и эритроцитурией (r=0,28; p=0,021), что позволяет рассматривать антитела к КО как дополнительный индикатор волчаночной нефропатии.

Таблица 12

Частота проявлений СКВ с различным уровнем антител к КО

Клинические проявления

и лабораторные показатели

Частота выявления

(абсолютное количество и %)

Досто-

вер-

Позитивные по Ат к КО (n=32)

Негативные по Ат к КО (n=28)

ность (2, р)

Поражение РЭС

22 (36,7%)

10 (16,7%)

2=5,3

р=0,021

Поражение почек

17 (28,3%)

7 (11,7%)

2=4,6

р=0,032

Васкулопатия

9 (15,0%)

2 (3,3%)

2=4,4

р=0,042

Малеолярная эритема

16 (26,7%)

20 (33,3%)

р=0,09

Поражение вегетативной нервной системы 

15 (25,0%)

18 (30,0%)

р=0,17

Экссудативный перикардит

7 (11,7%)

4 (6,7%)

р=0,45

Плеврит

7 (11,7%)

4 (6,7%)

р=0,43

Артралгии

23 (38,3%)

22 (36,7%)

р=0,55

Артрит

7 (11,7%)

9 (15,0%)

р=0,37

Цилиндрурия

3 (5,0%)

3 (5,0%)

р=0,86

Лимфопения (<1500 кл в мл)

17 (28,3%)

22 (36,7%)

р=0,1

Лейкопения (< 4000 кл в мл)

9 (15,0%)

5 (8,3%)

р=0,35

Тромбоцитопения

6 (10,0%)

1 (1,7%)

р=0,07

Антинуклеарный фактор

30 (50,0%)

25 (41,7%)

р=0,53

Антитела к нативной ДНК

23 (38,3%)

18 (30,0%)

р=0,52

Примечание: при определении достоверности различий использовали2 с поправкой Йетса (Yates corrected Chi-square).

Сравнение между собой групп больных СКВ, позитивных и негативных по наличию антител к КО (см. таблицу 12), продемонстрировало статистически достоверное увеличение частоты выявления признаков поражения почек (р=0,032) и РЭС (р=0,021), также была отмечена большая доля больных с наличием васкулопатии среди пациентов с наличием антител к КО (р=0,042). Несколько чаще, но статистически незначимо, у больных с наличием антител к КО отмечались признаки поражения вегетативной нервной системы (p=0,174).

Поражение почек крайне разнообразно и выявлялось у 24 (40%) больных СКВ. У подавляющего большинства (15 человек) волчаночный нефрит развился в течение первых 6 лет от начала заболевания, у 12% больных поражение почек было первым проявлением СКВ. Почечная патология разнообразна и варьировала от стойкой невыраженной протеинурии и микрогематурии до быстропрогрессирующего гломерулонефрита. Следует отметить, что диагностические трудности вызывали больные с поражением почек без иммунологических и морфологических признаков СКВ в первые годы заболевания.

Нефропатия является одним из самых грозных осложнений основного заболевания, так как влечет за собой, как правило, развитие почечной недостаточности. Учитывая, что при поражении почек при СКВ происходят значительные изменения пуринового метаболизма, нарушение почечной экскреции МК может приводить к выраженной гиперурикемии и образованию кристаллов уратов, имеющих сродство к протеогликанам хряща, синовии, сосудов, что обеспечивает в дальнейшем их поражение.

О поражении ретикулоэндотелиальной системы судили по увеличению различных групп лимфатических узлов (весьма частом и раннем признаке системности болезни), а также по увеличению печени и селезенки. Увеличение печени, которое наблюдается при хроническом течении СКВ, может быть обусловлено различными причинами, в том числе сердечной недостаточностью в случаях поражения сердца, возникновения легочного сердца, диффузного фиброза, может развиться вследствие жировой дистрофии печени в процессе хронического заболевания. Увеличение селезенки, как правило, было не значительным и наблюдалось у 16 (26,7%) больных СКВ; обычно спленомегалия отмечалась наряду с увеличением лимфатических узлов, что обусловлено развивающимися в организме аутоиммунными изменениями.

Поражение сосудов достаточно часто встречалось в исследуемой группе больных СКВ и имело место у 11 (18,3%) пациентов. Поскольку для подтверждения васкулита требуется выполнение биопсии сосуда или проведение ангиографии или доплеровского исследования сосудов, которые не производились у большинства больных с подозрением на поражение сосудов воспалительного характера, под термином «васкулопатия» были объединены клинические проявления, характерные как для васкулита, так и для невоспалительного поражения сосудов – тромбозы сосудов мелкого и среднего калибра, некротизирующие поражения кожных покровов, сетчатое ливедо. У некоторых больных эти проявления имели место в рамках вторичного антифосфолипидного синдрома при СКВ.

Достоверно более высокий уровень и достоверно большая частота обнаружения антител к КО у больных с поражением сосудов позволяют думать о том, что данный феномен может иметь не только диагностическое, но и патогенетическое значение. Механизмы связи аутоантител к КО с сосудистой патологией не ясны, но можно высказать некоторые предположения. Одним из факторов, приводящих к развитию сосудистой патологии при наличии антител к КО, может являться накопление АФК, оказывающих повреждающее действие на липиды, белки и другие компоненты сосудистой стенки, в результате чего они приобретают свойства аутоантигенов и стимулируют выработку аутоантител, имеющих вторичное повреждающее действие, таких как антитела к окисленным липопротеинам низкой плотности, описанные при СКВ. Следует упомянуть о том, что высокая активность КО при СКВ может являться причиной повреждения тканей, так как помимо антиоксидантных свойств, данный фермент обладает и прооксидантными свойствами, особенно в отношении липидов, и, вероятно, повышенный уровень КО может являться независимым фактором риска развития атеросклероза.

Влияние терапии на уровень антител к ксантиноксидазе у больных системной красной волчанкой

Изучение динамики содержания антител к КО во время стационарного лечения больных СКВ продемонстрировало возможность использования данного теста в качестве нового критерия эффективности проводимой терапии и дифференцированного подхода к назначению лечебных мероприятий.

Таблица 13.

Динамика уровня Ат к КО в процессе стационарного лечения, М(SD).

Категория больных

Уровень Ат к КО, Ед

P

При поступлении

При выписке

Все больные СКВ (n=60)

0,131 (0,083)

0,103 (0,065)

0,046

Лечение ГКСП (n=33)

0,126 (0,071)

0,113 (0,047)

0,377

Лечение цитотоксическими препаратами в комбинации с ГКСП (n=12)

0,140 (0,072)

0,090 (0,051)

0,047

Комплексная терапия с включением плазмафереза (n=15)

0,135 (0,074)

0,092 (0,046)

0,037

В результате проведенной терапии наблюдалось снижение уровня антител к КО, которое было статистически значимым к концу стационарного лечения (см. таблицу 13). Доля лиц, позитивных по Ат к КО, к окончанию пребывания пациентов в стационаре сократилась с 53% до 42% (25 человек). К концу пребывания больных в стационаре было отмечено статистически значимое снижение уровня антител к КО (р=0,046), хотя он и не достиг показателей, характерных для здоровых лиц (различия с донорами достоверны, р=0,008). Различия в динамике изучаемых показателей для разных видов лечения были незначительными и тесно коррелировали со снижением активности патологического процесса.

Снижение уровня антител к КО у больных СКВ при применении ГКСП может быть объяснено тем обстоятельством, что нарушение синтеза специфических иммуноглобулинов, вероятно, происходит опосредованно за счет уменьшения миграции фагоцитирующих клеток в очаг воспаления, высвобождения и выработки лизосомальных ферментов, снижения выраженности тканевой деструкции, нарушения процесса презентации аутоантигенов с последующей блокадой взаимодействия макрофагов и лимфоцитов.

При сохранении активности СКВ часто наблюдали повторное образование антител к КО и курс плазмафереза приводил к относительно кратковременному снижению их уровня. В то же время контроль болезни с помощью кортикостероидов, иммуносупрессивных препаратов и поддержание активности СКВ на минимальном уровне ведет к прекращению выработки аутоантител. Таким образом, рекомендовать плазмаферез как метод монотерапии для лечения больных СКВ с наличием аутоантител к КО нельзя, однако включение экстракорпоральных методов в комплексную терапию приводит к более быстрому снижению уровня данных антител.

Влияние антител к ксантиноксидазе на ферментативную активность ксантиноксидазы и ксантиндегидрогеназы в сыворотке крови больных системной красной волчанкой

Предварительное изучение активности КО и КДГ в группе здоровых лиц показало, что амплитуда колебаний активности ферментов, определяемая по формуле MSD, составила для КО 3,70,7 мкмоль/л х мин, для КДГ – 5,70,9 мкмоль/л х мин. Коэффициент КО/КДГ составил 0,66 ± 0,05.

Изучение активности КО и КДГ в сыворотке крови больных СКВ дало следующие результаты (см. таблицу 14).

При минимальной активности СКВ по сравнению со здоровыми лицами обнаружено повышение ферментативной активности КО (5,28 ± 1,03, р<0,001) и КДГ (6,75 ± 0,84, р<0,001), увеличение соотношения КО/КДГ (0,82 ± 0,23; р=0,0028). С нарастанием активности патологического процесса (сравнивались показатели при минимальной и умеренной активности СКВ) на фоне увеличения содержания Ат к КО отмечалось снижение биохимической активности КДГ (4,72 ± 0,9, р<0,001) и рост активности КО (7,42 ± 1,5, р<0,001).

Таблица 14.

Активность КО и КДГ в сыворотке крови больных СКВ (мкмоль/л х мин)

Показатель

M

SD

m

95% ДИ для М

Me

IQR

Активность КО

7,2

1,8

0,19

6,78…7,62

7,14

2,8

Активность КДГ

5,1

1,3

0,14

4,76…5,28

4,82

1,9

Изменение активности КО/КДГ, наблюдаемое при СКВ, может быть вызвано различными причинами, однако предположение об участии иммунной системы в развитии нарушений пуринового метаболизма закономерно. Иммунные нарушения и изменения биохимических процессов при патологических состояниях неразрывно связаны. Так, с одной стороны, разнообразные ИК способствуют развитию воспалительной реакции с привлечением полиморфноядерных нейтрофилов и высвобождением большого количества лизосомальных и других ферментов, которые оказывают повреждающее действие структурные компоненты соединительной ткани. Метаболические нарушения, ведущие к повреждению мембран макрофагов, эритроцитов, лейкоцитов и других клеточных структур, способствуют выходу в экстрацеллюлярное пространство многих биологически активных веществ, в том числе и ферментов. Наличие антигенных свойств у ферментов обеспечивает ответную реакцию при их выходе из клетки, а воздействие различных факторов воспаления усиливает антигенные свойства энзимов вследствие возможного окисления их функциональных групп.

Влияние аутоантител на ферментативную активность КО показывает прямая корреляция умеренной силы (r= 0,492; p<0,001) между активностью фермента и уровнем данных антител. Учитывая, что между активностью КО и активностью КДГ обнаружена обратная корреляция высокой силы (r= -0,642; p<0,001), а между активностью КДГ и содержанием антител к КО обратная корреляция средней силы (r= -0,494; p<0,001), можно предположить, что антитела к КО оказывают определенное влияние на трансформацию КО ↔ КДГ в сторону увеличения образования КО. Предположительно это влияние выражается в изменении функциональной активности КО, когда под воздействием специфических антител происходит усиление процессов трансформации D-формы фермента в О-форму, что в итоге ведет к существенному увеличению генерации супероксидных радикалов при СКВ.

диагностическое значение антител к КСАНТИНОКСИДАЗе; определение антител к КСАНТИНОКСИДАЗе В ДИФФЕРЕНЦИАЛЬНОЙ ДИАГНОСТИКЕ СКВ

Сходство клинической картины воспалительных РЗ часто затрудняет их дифференциальную диагностику. В сыворотке крови большинства больных СКВ были выявлены антитела к КО, в то время как в группе сравнения данные антитела определялись значительно реже. В связи с эти была проведена оценка возможности дифференцирования СКВ от других ревматических заболеваний при помощи антител к КО.

Рисунок 4. Характеристическая (ROC) кривая определения диагностической ценности исследования уровня антител к КО в дифференциальной диагностике СКВ и других ревматических заболеваний.

Характеристическая кривая (см. рисунок 4) для дифференциации больных СКВ от группы сравнения показала удовлетворительные параметры для использования уровня Ат к КО (площадь под кривой 0,894, p<0,0001; 95% доверительный интервал 0,840 – 0,947). Точка разделения составила 0,087 е.о.п. (чувствительность 79,6%, специфичность 80,1%).

Данный тест был сопоставим с определением уровня Ат к КО при разграничении больных СКВ от здоровых лиц. Площадь под кривой составила 0,806 (p=0,045; 95% ДИ 0,722 – 0,895). Однако полученная характеристическая кривая показала ограниченную ценность определения уровня антител к КО для выделения больных СКВ от здоровых лиц, так как при высокой специфичности анализа (100%) наблюдалась недостаточная чувствительность – 53% (точка разделения – 0,109 Ед), а при повышении чувствительности (68,9%) довольно существенно снижалась специфичность (82,1%) (точка разделения – 0,083 Ед). Таким образом, исследование Ат к КО может быть рекомендовано к использованию только в комплексе диагностических средств и применяться у лиц с достаточной априорной вероятностью наличия СКВ.

Сравнение операционных характеристик предложенного метода по выявлению Ат к КО с другими общепринятыми иммунологическими маркерами СКВ (по данным литературы) позволило сделать определенные выводы. При подозрении на СКВ на первом этапе тестирования оптимальным следует считать определение антинуклеарных антител. Отрицательный результат выявления АНФ делает диагноз СКВ маловероятным. При положительном результате, учитывая низкую специфичность антинуклеарных антител в целом (49%), рекомендуется подтвердить наличие отдельных подклассов антител, характерных для СКВ (антитела к Sm-антигену, нативной ДНК, PCNA/Ga/LE-4, U7snRNP, рибосомальному RNP и др.). Антитела к КО обладают сбалансированными значениями чувствительности и специфичности, что позволяет поставить их в ряд диагностических тестов, используемых для оценки активности СКВ (титры АНФ, антитела к н-ДНК, нуклеосомам, антиэндотелиальные антитела, содержание сывороточных Ig и гамма­глобулинемия, содержание компонентов системы комплемента, изменение уровней ЦИК и СОЭ). Совместное использование данных тестов позволит достоверно повысить суммарную чувствительность диагностики СКВ.

Таким образом, при СКВ обнаружена новая группа аутоантител – антитела к ксантиноксидазе, определение которых в сыворотке крови иммуноферментным методом позволяет улучшить диагностику СКВ, способствует более точному определению активности патологического процесса и указывает на наличие определенных клинических форм болезни. Применение этих показателей для мониторинга проводимой терапии позволяет более точно оценить ее эффективность.

Выявление причин и механизмов аутоантителообразования к КО при СКВ не входило в задачи исследования, однако обнаруженные нами закономерности указывают направления дальнейших научных изысканий. Учитывая дисбаланс иммунорегуляторных процессов при СКВ, представляется перспективным дальнейшее изучение процессов аутоантителообразования к ферментам пуринового метаболизма, что позволит глубже понять патогенетические механизмы метаболических и иммунологических нарушений при данном заболевании.

ВЫВОДЫ

  1. Разработан и апробирован способ получения иммобили­зированной формы ксантиноксидазы (ЕС 1.2.3.2.). Методом иммуноферментного анализа в сыворотке крови больных СКВ антитела к ксантиноксидазе выявляются в более высоком уровне и значительно чаще (53,3%), чем в среднем при других аутоиммунных ревматических заболеваниях (20,8%). У здоровых лиц антитела к ксантиноксидазе отсутствуют.

  2. Уровень антител к ксантиноксидазе зависит от активности СКВ и не зависит от варианта течения и продолжительности забо­левания, что может быть использовано в качестве дополнительного индикатора активности патологического процесса.

  3. Наиболее высокие значения антител к ксантиноксидазе выявлены у больных СКВ с умеренной и высокой степенью активности заболевания, на стадии развернутых клинических проявлений. Высокие уровни антител к ксантиноксидазе коррели­руют с наличием у больных СКВ поражения почек, сосудов и органов ретикуло-эндотелиальной системы.

  4. Динамика уровней антител к ксантиноксидазе, наблюдаемая на фоне проводимой терапии, позволяет использовать их в качестве дополнительных критериев эффективности лечения больных СКВ. Наиболее эффективно подавляет образования антител к ксантиноксидазе иммуносупрессивная терапия корти­косте­роида­ми в сочетании с цитостатическими препаратами. При использовании в комплексном лечении больных СКВ плаз­мафереза наблюдается выраженное, но непродол­жительное, снижение уровня антител к ксантиноксидазе.

  5. Измерение содержания сывороточных антител к ксантинок­сидазе позволяет с высокой сте­пенью эффективности дифференцировать СКВ от других аутоиммунных ревматических заболеваний.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

  1. Иммобилизированная форма ксантиноксидазы рекомендуется к использованию в качестве антигенной матрицы при проведении иммуноферментного метода исследования для выявления специфических антител к энзиму у больных системной красной волчанкой.

  2. При определении антител к ксантиноксидазе в сыворотке крови иммуноферментным методом за норму следует считать показатели, не превышающие 0,097 Ед. При определении ферментативной активности ксантиноксидазы следует считать нормальными значения в диапазоне от 2,3 до 5,1 мкмоль/л х мин, для ксантиндегидрогеназы – от 3,9 до 7,5 мкмоль/л х мин. Коэффициент КО/КДГ в норме составляет 0,56 – 0,76.

  3. Для СКВ характерно снижение активности ксантиндеги­дрогеназы, увеличение активности ксантиноксидазы, коэф­фици­ента КО/КДГ и уровня антител к ксантиноксидазе.

  4. Для уточнения степени активности СКВ рекомендуется допол­нительно использовать совместное определение показателей уровня антител к ксантиноксидазе и активности фермента. При минимальной активности СКВ отмечается повышение значений активности ксантиноксидазы (4,25 – 6,3 мкмоль/л х мин) и ксантиндегидрогеназы (6,0 – 8,2 мкмоль/л х мин), уровни антител к ксантиноксидазе соответствуют показателям здоровых лиц. Для умеренной и высокой активности СКВ характерны повышенные значения активности ксантиноксидазы (5,9 – 9,0 мкмоль/л х мин) и антител к ферменту (0,14 – 0,16 Ед), а также снижение активности ксантиндегидрогеназы (3,8 – 5,6 мкмоль/л х мин).

  5. Выявление высокого уровня антител к ксантиноксидазе у больных СКВ (выше 0,145 Ед) при отсутствии нормализации определяемых показателей в течение 3-4 недель стационарного лечения может свидетельствовать о наличии органных пора­жений (почек, ретикуло-эндотелиальной системы, сосудов) и необходимой коррекции проводимой терапии.

  6. В процессе стационарного лечения больных СКВ рекомендуется использовать определение антител к ксантинокси­дазе (иммуноферментным методом) в качестве дополнительного критерия эффективности проводимой терапии. Снижение уровня антител к ксантиноксидазе коррелирует с клиническим улучшением.

  7. Определение антител к ксантиноксидазе реко­мендуется применять для дифференциальной диагностики между СКВ и другими аутоиммунными ревматическими заболеваниями (ревматоидным артритом, системной склеродермией, дерматомиозитом, системными васкулитами, болезнью Шегрена), используя данный тест как самостоятельно, так и совместно с другими лабораторными методами исследования (АНФ, антитела к ДНК).

ПУБЛИКАЦИИ

    1. Александров А.В., Алехина И.Ю., Махачев М.А., Маслова-Сорокина Е.В., Емельянов Н.Н., Зборовская И.А. Магнитоуправляемые сорбенты на основе иммобилизированных антигенов: новые возможности лабораторной диагностики воспалительных аутоиммунных заболеваний // Материалы Всероссийской научно-практической конференции «Актуальные проблемы клинической и экспериментальной медицины», Чита, 2008. – С.163-164.

    2. Алехина И.Ю., Махачев М.А., Маслова-Сорокина Е.В., Новикова О.В., Емельянова О.И. Определение антител к ферментам пуринового метаболизма в диагностике неврологической патологии у больных системной красной волчанкой // Материалы III Национального конгресса терапевтов «Новый курс: консолидация усилий по охране здоровья нации», Москва 5-7 ноября 2008 г. – М., Издательство «Бионика», 2008. – С.10-11.

    3. Александров А.В., Алехина И.Ю., Шилова Л.Н., Маслова-Сорокина Е.В., Махачев М.А., Матасова И.А., Емельянов Н.И. Современные биотехнологии в лабораторной диагностике ревматических заболеваний: иммунологические аспекты поражения сосудов у больных системной красной волчанкой и системной склеродермией // Аллергология и иммунология. – 2008. – Т.9, №3. – С.334.

    4. Алехина И.Ю., Махачев М.А., Маслова-Сорокина Е.В., Александрова Н.В., Емельянов Н.И. Клинико-патогенетическая роль антител к аденозиндезаминазе и ксантиноксидазе у больных системной красной волчанкой с лабораторными признаками антифосфолипидного синдрома. // Материалы IX Всероссийской научно-прак­тической конференции “Актуальные вопросы клиники, диагностики и лечения больных в многопрофильном лечебном учреждении”, 21-22 апреля 2009 г. – Вестник Российской военно-медицинской академии. – 2009, №1(25), Приложение (часть II). – С.586-587.

    5. Алехина И.Ю., Маслова-Сорокина Е.В., Александров А.В. Частота выявления аутоантител к ксантиноксидазе при системной красной волчанке // Тезисы докладов. V Съезд ревматологов России, – 23-27 марта 2009, Москва – С.9.

    6. Alekhina I.Y., Maslova-Sorokina E.V., Alexandrov A.V., Zborovskaya I.A. Autoantibodies to xantine oxidase as marker of immunological disorders in systemic lupus erythematosus // Annual European Congress of REUMATOLOGY, EULAR 2009. - Ann. Rheum. Diss. 2009; Vol.68 (Suppl. №3): 729.

    7. М.А. Махачев, Е.В. Маслова-Сорокина, Н.В. Александрова, И.Ю. Алехина, И.А. Зборовская. Роль антител к аденозиндезаминазе и ксантиноксидазе в диагностике клинических вариантов системной красной волчанки. Сборник научных работ / под ред. Академика РАМН А.Б.Зборовского/. – Вып. XXVI, Волгоград, ООО “Царицынская Полиграфическая компания”, 2009. с.46-47.

    8. Александров А.В., Алехина И.Ю., Шилова Л.Н., Емельянова О.И., Маслова-Сорокина Е.В., Емельянов Н.Н. Роль аутоантител к ксантиноксидазе в развитии иммунопатологических реакций при воспалительных ревматических заболеваниях // Аллергология и иммунология, 2009, Т.10, №2. – С.220.

    9. Александров А.В., Алехина И.Ю., Сущук Е.А., Сычева А.В., Александрова Н.В., Махачев М.А., Маслова-Сорокина Е.В., Зборовская И.А. Роль аутоантител к антиоксидантным ферментам в поражении нервной системы у больных системной красной волчанкой // Клиническая неврология, 2009, №2. – С.10-14.

    10. Александров А.В., Маслова-Сорокина Е.В., Алехина И.Ю., Никитин М.В., Зборовский А.Б. Клинико-патогенетическое значение антител к ксантиноксидазе в развитии иммунопатологических реакций при системной красной волчанке и ревматоидном артрите // Сборник материалов IV Национального конгресса терапевтов, Москва 2-4 декабря 2009 г. – М., 2009. – С.10-11.

    11. Александров А.В., Маслова-Сорокина Е.В., Алехина И.Ю., Никитин М.В. Исследование аутоантител к ксантиноксидазе при воспалительных ревматических заболеваниях у пациентов средних и старших возрастных групп // Вестник Санкт-Петербургской государственной медицинской академии им. И.И. Мечникова, 2009, №2/1 (31). – С.176-180.

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

АНФ антинуклеарный фактор

Ат аутоантитела

ГКСП глюкокортикостероидные препараты

КДГ ксантиндегидрогеназа

КО ксантиноксидаза

МК мочевая кислота

НАД никотинадениндинуклеотид

ПМ пуриновый метаболизм

ПОЛ перекисное окисление липидов

РА ревматоидный артрит

РЗ ревматические заболевания

РЭС ретикулоэндотелиальная система

СКВ системная красная волчанка

СРБ С-реактивный белок

ССД системная склеродермия

ЦИК циркулирующие иммунные комплексы

ECLAM European Consensus Lupus Activity Measure

SLEDAI Systemic Lupus Erythematosus Disease Activity Index

SLICC/ACR DI Systemic Lupus International Collaborating Clinics / American College of Rheumatology Damage Index

refdb.ru

Большая Энциклопедия Нефти и Газа, статья, страница 2

Сульфитоксидаза

Cтраница 2

Сульфитоксидаза превращает сульфит в сульфат и строго специфична к своему субстрату. Фермент присутствует преимущественно в печени, где он локализуется в межмембранном пространстве митохондрий. Его физиологическим акцептором электронов является митохондриальиый цитохром с. Сульфитоксидаза выделена из печени человека, крупного рогатого скота, кроликов и крыс. Она представляет собой димер, образованный двумя идентичными субъединицами с молекулярной массой 55000 - 60000, из которых каждая содержит по одному атому молибдена и одной молекуле цитохрома Ь5 - типа.  [16]

Было показано, что сульфитоксидаза - простейший молиб-денсодержащий фермент, в состав которого входят только две про-стетические группы - молибденовая и гемовая. Двухэлектронный окислительный субстрат - молекулярный кислород, вероятно, связывается с гемовой группой, хотя прямых доказательств этого не получено. Сходство в спектрах ЭПР сульфитоксидазы и ксантиноксидазы указывает на общность структуры окружения молибдена в этих двух ферментах. Потребуются дальнейшие эксперименты с сульфитоксидазой того же типа, что и исследования, выполненные методом ЭПР в случае ксантиноксидазы, для того чтобы уточнить пределы аналогии в структуре этих ферментов. Анионы подавляют реакции обоих ферментов с одноэлектронными акцепторами. Причины этих эффектов пока неизвестны.  [17]

Сульфит и другие анионы являются неконкурентными ингибиторами восстановления одноэлектронных акцепторов, но не влияют на двухэлектронное восстановление. Это указывает на наличие двух различных центров катализа этих процессов. Наличие у фермента центров, которые принимают электроны от сульфита, и центров, которые затем передают электроны на различные акцепторы, подтверждается также особенностями кинетики реакции окисления сульфитоксидазы кислородом. Отсутствие влияния су-пероксиддисмутазы [107] на скорость аэробного восстановления цитохрома сульфитоксидазой показывает, что при восстановлении кислорода ферментом анион-радикалы О2 - в качестве интермедиата не образуются.  [19]

Сульфитоксидаза из бычьей печени имеет молекулярный вес 115 000 и состоит из двух субъединиц молекулярным весом 55 000 каждая. Функциональная конгруентность тема и ферментативной активности подтверждается также корреляцией между исчезновением ферментативной активности и утратой тема, восстанавливаемого сульфитом, при тепловой инактивации сульфитоксидазы. Аналитические данные указывают на наличие двух ге-мовых групп в молекуле сульфитоксидазы. Один из гемов восстанавливается сульфитом с высокой скоростью, а другой существенно медленнее. Интересно, что гем оказывается полностью восстановленным, когда в роли акцептора выступает цитохром с. Было высказано предположение, что одноэлектрон-ные акцепторы взаимодействуют с сульфитоксидазой по центру, предшествующему тему.  [21]

Мы подчеркнули важное значение молибдена для растений, однако он входит в состав и некоторых ферментов, содержащихся в животных организмах. Он участвует в окислении пуриновых оснований в мочевую кислоту. Ксантиноксидаза и родственный ей фермент альдегидоксидаза обладают двойственной субстратной специфичностью. Оба эти фермента катализируют окисление многих гетероциклических азотсодержащих соединений, а также альдегидов и, по-видимому, используют кислороде качестве физиологического конечного акцептора электронов. Третий фермент - ксан-тиндегидрогеназа - имеет близкие функциональные свойства, но, вероятно, использует НАД в качестве акцептора электронов. Спектры ЭПР этих молибденсодержащих ферментов существенно различаются. Это может означать, что различия между ферментами, по крайней мере отчасти, определяются тонкими различиями в составе комплекса молибдена, связанного с простетической группой. Сравнительно недавно к списку молибденсодержащих ферментов была добавлена сульфитоксидаза. Роль этих ферментов млекопитающих изучена слабо.  [22]

Страницы:      1    2

www.ngpedia.ru

Молибден и здоровье — Медицинский журнал

Известно существование трех молибден-зависимых ферментов у человека: сульфитоксидаза, ксантиноксидаза и альдегидоксидаза.

Генетический дефект молибденсодержащего фермента сульфитоксидазы у человека характеризуется:

  • выраженными аномалиями мозга
  • умственной отсталостью
  • эктопией хрусталика
  • повышенным выделением сульфатов с мочой микроэлементы

    микроэлементы

Ксантиноксидаза является важным ферментом обмена пуринов, завершающегося образованием мочевой кислоты в организме человека. Эта ферментативная реакция предотвращает развитие подагры, ускоряя метаболизм и удаление из организма мочевой кислоты. При ее генетическом дефекте нарушается реабсорбция ксантина в почечных канальцах, возникающая ксантинурия ведет к образованию ксантиновых камней. При этом содержание мочевой кислоты в сыворотке крови и моче резко снижается.

Дефицит молибдена встречается исключительно редко из связан с длительным полным парентеральным питанием больного.

Дефицит молибдена может привести к риску развития подагры, а также рака, кариеса и импотенции.

Клинические симптомы дефицита молибдена

  • тахикардия
  • мигрирующая головная боль, выраженные психические расстройства и кома, диарея

Молибден способствует метаболизму углеводов и жиров, помогает предупредить анемию, предотвращает разрушение зубов и импотенцию.

Молибден является ростовым фактором для бактерий и в повышенных количествах вызывает их усиленное размножение в кишечнике, проявляющееся диареей.

Большая часть молибдена откладывается в печени, а потом расходуется на метаболизм железа, поскольку является важной частью фермента, отвечающего за утилизацию железа.

Клинические эффекты молибдена

  • Помогает удалять излишек меди из организма, выступая физиологическим антагонистом меди в организме. Препарат тетратиомолибдат («Купренил») используется в фармакотерапии болезни Вильсона-Коновалова.
  • Молибден действует на человеческий организм прежде всего как «очиститель» клеток, помогая организму избавиться от альдегидов — вредных продуктов жизнедеятельности дрожжевых грибов, обитающих в толстом кишечнике. Этот микроэлемент является одним из важнейших диетологических средств в борьбе с сульфитными аллергиями и химической гиперчувствительностью
  • Способен облегчать разнообразные острые и хронические боли, в том числе и при артритах
  • Способствует прекращению астматического приступа и судорожных состояний у новорожденных
  • Снижаетопасностьвозникновенияракажелудкаикишечника
  • Молибден способствует предотвращению разрушения зубов

Избыток молибдена

Избыток молибдена встречается значительно чаще, чем его дефицит.

Клинические симптомы избытка молибдена

  • повышение судорожной готовности
  • слуховые и зрительные галлюцинация
  • повреждения фронтальной коры
  • токсическая энцефалопатия
  • нарушения способности к обучению
  • депрессивные расстройства
  • посттравматические стресс-индуцированные заболевания.

Хроническая профессиональная интоксикация молибденом вызывает

  • функциональные изменения печени
  • повышение содержания мочевой кислоты и самого молибдена в сыворотке крови
  • полиартралгии
  • артрозы
  • деформацию костей
  • мышечную атонию
  • артериальную гипотонию
  • снижение концентрации гемоглобина, числа эритроцитов и лейкоцитов в периферической крови.

Аэрозоли молибдена могут вызывать поражение бронхов и приводить к пневмокониозу.

При повышении допустимых концентраций в окружающей среде для молибдена увеличивается риск развития рака легкого, желудка, толстой и прямой кишок.

Похожие статьи :

prizvanie.su

Большая Энциклопедия Нефти и Газа, статья, страница 1

Ксантиноксидаза

Cтраница 1

Ксантиноксидаза катализирует окисление гипоксантина в, ксантин, а также ксаитина в мочевую кислоту.  [1]

Ксантиноксидаза содержится в молоке, печени, а также в других тканях ( растительного и животного происхождения.  [2]

Ксантиноксидаза - фермент, катализирующий это окисление. Уровень мочевой кислоты в крови имеет тенденцию повышаться, при некоторых нарушениях в клетках и освобождении из них нуклео-протеидов, например, при лейкемии и в ряде случаев при воспалении легких. Ксантиноксидаза катализирует также окисление альдегидов в карбоновые кислоты. Как и при окислении пуринов, этот процесс можно формально представить как гидроксилирование, в котором гидроксил отщепляется от молекулы растворителя. Хотя Ксантиноксидаза широко распространена в организме млекопитающих ( наилучшими источниками для ее получения служат молоко и печень крупного рогатого скота), биологическое значение этого фермента остается неясным. Поскольку адьдегиды в организме млекопитающих не встречаются в сколько-нибудь заметных количествах и поскольку окисление пурина молекулярным кислородом относится к числу самых быстрых реакций, катализируемых ксан-тиноксидазой, предполагается, что основная биологическая функция фермента состоит в окислении пуринов и альдегидов. Однако отсутствие ксантиноксидазной активности, по-видимому, не приводит к серьезным патологическим нарушениям, по крайней мере у человека.  [3]

Ксантиноксидаза находится во многих органах, главным образом в печени и селезенке.  [4]

Ксантиноксидаза коровьего молока ( фермент Шар-дингера) представляет собой димер с молекулярной массой 283000, содержащий на каждую субъединицу молекулу ФАД, кластер.  [5]

Ксантиноксидаза - фермент, катализирующий окисление ксантина, гипоксантина и альдегидов с поглощением кислорода и образованием соответственно мочевой кислоты, ксантина или карбоновых кислот и супероксидных радикалов [ Горкин В. Она является важным ферментом обмена пуринов, катализирующим реакцию, завершающую образование мочевой кислоты в организме человека и животных.  [6]

Ксантиноксидаза, альдегндоксндаза, пурннгидрокснлаза и ииридаксальонсидаэа объединяются обычно под названием молибденовые гидроксилазы [ Coughlan M.  [7]

Таким образом, альдегидоксидаза ( ксантиноксидаза) молока является ферментом мало специфичным как и донору, так и к акцептору водорода.  [8]

Лит, см. при ст. Ксантиноксидаза.  [9]

Гопкинсом с сотрудниками и названный ксантиноксидазой ( 128), оказался сложным ферментом с изоаллоксазиннуклеотидом в качестве кофактора.  [10]

Фермент ксантин: кислород-оксидородуктазг (1.2.3.2), или ксантиноксидаза представляет собой флавопротеид, содержащий м: олибден.  [11]

Как было отмечено ранее, спектры ЭПР ксантиноксидазы, ин-гибированной метанолом, и альдегидоксидазы очень близки между собой.  [12]

По крайней мере три из молибденсодержащих ферментов - ксантиноксидаза, альдегидоксидаза и нитратредуктаза - содержат одновременно флавиновый кофактор. По данным исследований методом ЭПР [44, 74, 124], в этих ферментах имеет место перенос электрона между молибденом и флавиновым кофактором, что привело к предположению о непосредственной связи молибдена с молекулой флавина. В связи с этим было исследовано взаимодействие молибдена с различными флавинами как возможная модель ферментативного электрон-транспортного процесса.  [13]

Чрезмерное содержание в воде молибдена приводит к увеличению активности ксантиноксидазы, сульфгидридных групп и щелочной фосфата-зы, увеличению мочевой кислоты в крови и моче, патоморфологическим изменениям внутренних органов.  [14]

Из перечисленных в табл. 20 ферментов остановимся на ксантиноксидазе и сульфитоксидазе, которые имеют существенное значение в патологии человека, а также упомянем молибденовый кофактор, содержащий молибден, железо и серу.  [15]

Страницы:      1    2    3    4

www.ngpedia.ru

Ксантиноксидаза ингибиторы - Справочник химика 21

    Категория. Ингибитор ксантиноксидазы. [c.31]

    В пользу предположения об ингибировании за счет образования комплексов в случае ксантиноксидазы гово рит полученное в настоящей работе совпадение температурного хода ферментативной реакции без ингибитора и в его присутствии. Такое совпадение позволяет оценить величину энергии активации стадии ингибирования [Ег) [8]  [c.150]

    Можно ли описать заболевание на молекулярном уровне Большим триумфом в этой области было выяснение молекулярных основ этиологии и патогенеза болезней, вызванных витаминной недостаточностью (часть шестая) и гормональными нарушениями (часть пятая). Это позволило предотвратить гибель многих миллионов людей от неполноценного питания и сделало возможным успешное лечение сотен тысяч больных с эндокринными расстройствами. Более того, современное развитие науки позволило синтезировать лекарства, которые облегчают течение ряда болезней. Так, например, ингибиторы карбоангидразы эффективны при лечении глаукомы и уремии, ингибитор ксантиноксидазы — прп подагре, ингибиторы синтеза нуклеиновых кислот при лейкемии, предшественник определенного нейромедиатора — при паркинсонизме и т. д. В последнее время в результате детальных исследований удалось выявить у человека около 1500 нарушений метаболизма, имеющих генетическую природу. Более трети из них возникает из-за мутаций в определенном специфическом гене. Имеющиеся данные позволяют считать, что каждый из нас является носителем не менее чем полудюжины дефектных генов. Эта обширнейшая область человеческого самопознания начала развиваться лишь в последнее время. [c.22]

    Среди них имеются кардиостимуляторы, вещества с сосудорасширяющим действием, диуретической и гипотеисивной активностью, ингибиторы ксантиноксидазы (используются при лечении подагры) и цитокинины (аналоги природных регуляторов роста растений) [c.589]

    Эффективное лечение подагры достигается путем сочетания соответствующей диеты с лекарственной терапией. Исключаются из рациона продукты с высоким содержанием нуклеотидов и нуклеиновых кислот, например печенка, а также кофе и чай, в которых содержатся пурины кофеин и теобромин. Хороший эффект дает применение аллопуринола этот препарат является ингибитором ксантиноксидазы-фермента, ответственного за [c.674]

    Лечение подагры. Аллопуринол (рис. 22-25), ингибитор ксантиноксидазы, используется для лечения хронической подагры. Какова биологическая основа такого лечения У больных, получавших аллопуринол, иногда образуются ксанти-новые камни. Однако мочевыводящие пути страдают от таких конкрементов гораздо реже, чем от нелеченой подагры. Объясните это наблюдение исходя из сле- [c.681]

    Попытки установить состояние окисления молибдена в ксантиноксидазе, ингибированной аллоксантином, путем титрования феррицианидом были неудачны из-за наличия неактивной формы фермента и лабильности сульфгидрильной группы [57]. Поэтому последняя была блокирована фенилмеркурацетатом. Количество неактивного фермента устанавливалось, исходя из стехиометрии ингибирования аллоксантином, для которого требуется 0,73 моля ингибитора на 1 моль фермента. Тот же результат получен радио-изотопным методом по связыванию аллоксантина, меченного Очевидно, аллоксантин связывается только с полностью функционально активными центрами. Разница между этими центрами и функционально неактивными центрами неизвестна. Взаимодействие этих центров с нефункциональными центрами другой природы неизвестно. Опыты по титрованию феррицианидом после введения поправки на неактивный фермент показывают, что на каждый моль фермента тратится по два эквивалента электронов и что реокисление Мо(1У) ->Мо(У1) сопровождает реактивацию фермента. Дальнейшим подтверждением этого служит стехиометрия реакции фермента с аллопуринолом. На каждый моль активных центров образуются 3 моля аллоксантина. По данным оптической и ЭПР-спектроскопии, аллопуринол восстанавливает железосерные и флавиновые хромофоры. Каждый железосерный хромофор принимает по одному электрону. Следовательно, за счет железосерных хромофоров и флавиновой простетической группы образуется 2 моля аллоксантина. Восстановление Мо(У1) до Мо(1 У) позволяет объяснить образование третьего моля продукта реакции. [c.284]

    В результате детального исследования различий в редуктазных реакциях при различных комбинациях альдегидоксидазы, ингибиторов и акцепторов электрона был сделан вывод [63], что имеется линейная последовательность по крайней мере четырех переносчиков электронов в молекуле фермента, причем восстановление молекулярного кислорода в этой цепи осуществляется в последнюю очередь. Этими четырьмя переносчиками, по-видимому, являются молибден, кофермент р, ФАД и Ре. Дальнейшие сведения о природе электрон-транспортной цепи были получены из опытов, выполненных методом ЭПР. Альдегидоксидаза отличается от ксантиноксидазы в том отношении, что покоящийся фермент дает слабый сигнал ЭПР Мо(У) с -фактором, равным 1,97, который соответствует примерно 3% всего содержания молибдена в ферменте. При инкубации Армента с избытком субстрата интенсивность сигнала возрастает, но только до уровня, соответствующего 15—20% полного содержания молибдена. В тех же условиях около 24% флавина находится в виде семихинонного радикала = 2,00), а 25% железа — в восстановленной форме [60, 61 ]. [c.286]

    Хотя у альдегидоксидазы и ксантиноксидазы много общих субстратов, которые связьшаются с молибденовым центром, приходится допустить, что в структуре связывающих центров имеются какие-то тонкие различия, которые определяют неодинаковое поведение этих ферментов. На присутствие сульфгидрильной группы в каталитическом центре альдегидоксидазы указывает сильное ингибирующее действие цианида и л-хлормеркурбензоата [61]. Действительно, в отсутствие субстрата альдегидоксидаза подавляется цианидом в концентрациях, на порядок меньших, чем концентрации, необходимые для подавления ксантиноксидазы. Однако п-хлор-меркурбензоат является ингибитором только в присутствии субстрата, причем он является конкурентным ингибитором альдегидоксидазы, но неконкурентно подавляет активность ксантиноксидазы [66]. [c.287]

    Аллопуринол — вещество, очень сходное по своей химической природе с гипоксантином, является конкурентным ингибитором ксантиноксидазы и поэтому подавляет образование мочевой кислоты. Указанное свойство иногда используется в клинике при лечении подагры — заболевания, связанного с накоплением в организме слишком больших количеств мочевой кислоты. У больных, которых лечат аллопурннолоы, вместо мочевой кислоты выделяется ксантин и гипоксантин. [c.37]

    Нарушения метаболизма пуринов и пиримидинов. Нарушения обмена пуринов. Подагра. При pH 5,75 в растворенном состоянии находят мочевую кислоту и ее натриевую соль (урат натрия) в эквимо-лярных количествах. При рНосновной формой является мочевая кислота, при рН>5,75 — урат натрия. О величине растворимого уратного пула можно судить по содержанию урата натрия в сыворотке крови (в норме 20—60 мг/л). При повышении этого показателя (гиперурикемия) и сдвиге pH в кислую сторону образуются кристаллы, чаще всего ведущие к острому или хроническому подагрическому артриту. В водных растворах мочевая кислота в 17 раз менее растворима, чем ее натриевая соль. При pH 5,0 насыщенный раствор уратов достигается при концентрации 150 мг/л, а при pH 7,0 в моче может раствориться в 10 раз больше уратов. Следовательно, интенсивность образования камней мочевой кислоты в мочевыводящих путях можно уменьшить, смещая pH мочи в щелочную сторону. В лечении подафы используют диету, бедную пуринами, а также аналог гипоксантина — аллопуринол. Этот препарат вначале действует в качестве субстрата ксантиноксидазы, а затем в качестве ее ингибитора (фермент гидроксилирует аллопуринол, превращая его в аллоксантин, который остается прочно связанным с активным центром). Это пример самоубийственного ингибирования, когда фермент превращает какое-то соединение в мощный ингибитор, который сразу же инактивирует фермент. [c.289]

    Укажите механизмы действия аллопуринола при лечении подагры а) является конкурентным ингибитором ксантиноксидазы б) увеличивает скорость выведения мочевой кислоты почками в) уменьшает скорость образования мочевой кислоты г) ускоряет катаболизм пиримидиновых нуклеотидов  [c.296]

    Решение этого вопроса связано со значительными методическими трудностями. Оценка абсолютного и относительного вклада метаболических путей, связанных с потреблением кислорода, проводится обычно с помощью ингибиторного анализа, т. е. путем искусственного вьшлючения работы различных звеньев метаболизма. Однако, по-видимому, практически не существует ингибиторов, которые в условиях интактной клетки не влияли бы на другие метаболические пути различных компартментов и гарантировали бы полное выключение лишь какой-то одной реакции. Так, цианиды являются специфическими ингибиторами цитохромоксидазы. Тем не менее в более высоких концентрациях они могут взаимодействовать с цитохромом Р-450, подавляя активность монооксигеназных реакций. Кроме того, они являются ингибиторами ката-лазы, ксантиноксидазы и других оксидаз цитозоля. В этом случае ингибирующий эффект проявляется при концентрациях, которые еще не действуют на дыхательную цепь митохондрий. Амитал, как и другие барбитураты (гексобарбитал, фенобарбитал и пр.), являясь ингибитором транспорта электронов в НАД-зависимом участке дыхательной цепи митохондрий, наряду с другими ксенобиотиками может метаболизироваться в системе монооксигеназных реакций. Антимицин А в клеточных системах может взаимодействовать с внутриклеточными белками раньше, чем проявится его эффект, связанный с дыхательной цепью. Кроме того, он может инициировать образование Н2О2, что также может искажать конечный результат, измеряемый по дыханию. [c.131]

    AAAonypuHOA-siHsmoT гипоксантина, в котором атомы N-7 и С-8 поменялись местами. Он используется для лечения подагры. Механизм действия аллопуринола очень интересен вначале он действует в качестве субстрата ксантиноксидазы, а затем в качестве ее ингибитора. Этот фермент гидроксилирует аллопуринол, превращая его в аллоксантин, который остается прочно связанным с активным центром. Атом молибдена ксантиноксидазы при связывании аллоксантина остается в степени окисления -h5, а не возвращается в степень окисления -h 6, как это происходит при нормальном каталитическом цикле. Механизм действия аллопуринола - пример самоубийственного ингибирования, когда фермент превращает какое-то соединение в мощный ингибитор, который сразу же инактивирует фермент. [c.276]

chem21.info


Смотрите также