Антинейтрофильные антитела (ANCA) к MPO, PR3, антитела к GBM IgG, качественное определение. Антинейтрофильные антитела


Антинейтрофильные цитоплазматические антитела в диагностике системных васкулитов

Лабораторное обследование больных системными васкулитами включает определение аутоантител, компонентов системы комплемента, клеточных иммунологических реакций, показателей активации эндотелия и острофазового ответа организма.

Для идентификации инфекционных агентов, ассоциирующихся с развитием васкулитов, проводят бактериологические и серологические тесты.

Основным методом определения антинейтрофильных цитоплазматических антител (АНЦА) является метод реакции непрямой иммунофлюоресценции (НРИФ) с использованием фиксированных спиртом нейтрофилов [A.Wiik, 1989], с помощью которого выявляются два основных типа аутоантител: классические цитоплазматические АНЦА (к-АНЦА) и перинуклеарные (п-АНЦА).

В некоторых случаях обнаруживается атипичное диффузное свечение нейтрофилов (а-АНЦА). В последнее время для определения антинейтрофильных цитоплазматических антител вместо НРИФ применяют проточную цитофлюориметрию.

к-АНЦА дают гранулярную цитоплазматическую флюоресценцию с большей интенсивностью по направлению к ядру нейтрофилов, чем к периферии. Кроме того, они реагируют с цитоплазмой моноцитов, но не эозинофилов, лимфоцитов или НЕр-2 клеток, которые используются для определения антинуклеарного фактора (АНФ), и обычно специфичны в отношении ПР-3.

п-АНЦА вызывают перинуклеарное свечение нейтрофилов и некоторых моноцитов и наиболее часто реагируют с миелопероксидазой. Этот тип свечения является как бы артефактом, обусловленным спиртовой фиксацией нейтрофилов. Обработка их спиртом позволяет зафиксировать клетки на поверхности стекла и увеличивает проницаемость клеточной мембраны для молекул Ig, но приводит к растворению липидной мембраны.

В результате этого содержимое цитоплазмы нейтрофилов распределяется вокруг них. Катионные молекулы (лизоцим, миелопероксидаза, эластаза, катепсин G и лактоферрин) могут связываться с отрицательно заряженными компонентами ядра собственных и близлежащих клеток и давать свечение, напоминающее АНФ. Вот почему при определении п-АНЦА необходима постановка соответствующих контролей с лимфоцитами донора или НЕр-2 клетками.

О наличии п-АНЦА можно судить только в том случае, если сыворотки реагируют только с нейтрофилами (или моноцитами) или если титр антител, реагирующих с полиморфно-ядерными лейкоцитами, в 2 раза выше, чем у антител, связывающихся с лимфоцитами. Для исключения перераспределения катионных антигенов предлагается фиксировать клетки формальдегидом, но это приводит к увеличению аутофлюоресценции и к потере ими некоторых антигенных детерминант.

В последнее время для определения антинейтрофильных цитоплазматических антител разработаны иммуноферментные методы с использованием иммобилизованных на твердой фазе кислых экстрактов цитоплазмы нейтрофилов, а-гранул или «чистых» нейтрофильных ферментов (ПР-3, миелопероксидаза и др.). В целом примерно у 85% больных с к-АНЦА обнаруживаются антитела к ПР-3, а у 90% больных с п-АНЦА выявляются антитела к миелопероксидазе.

Однако, хотя результаты определения АНЦА методом непрямой иммунофлюоресценции и иммунофермеитный метод (ИФМ) нередко совпадают, последний требует стандартизации [E.Hagen, 1993]. У части больных с к-АНЦА, по данным иммунофлюоресценции, в сыворотках обнаруживаются антитела к миелопероксидазе, и, наоборот, в сыворотках, в которых выявляются только антитела к миелопероксидазе, иногда идентифицируются не п-АНЦА, а к-АНЦА [M.Segelmark et al.,1994; J.Jennings et al.,1994].

Данные, касающиеся распространенности и типов антинейтрофильных цитоплазматических антител при заболеваниях человека, суммированы в таблицах 5.1 и 5.2.

Таблица 5.1. Частота (%) обнаружения АНЦА при заболеваниях человека (C.G.M.Kallenberg et al.,1995; W.L.Gross,1995)

Заболевание Тип антител
к-АНЦА (или а-ПР-3) п-АНЦА (или а-МПО)
Гранулематоз Вегенера 80 20
Классический узелковый полиартериит 10 20
Микроскопический полиангиит 50 50
Синдром Чарга—Стросса 10 70
Болезнь Кавасаки 0 6-91
Полиангиитный перекрестный синдром 40 20
Системная красная волчанка (СКВ) 0 4
Смешанное заболевание соединительной ткани 0 0
Системная склеродермия 0 0
Полимиозит/дерматомиозит 0 10
Ревматоидный артрит 0 3-40
Ревматоидный васкулит 0 50-75
Синдром Фелти 0 21-100
Болезнь Стилла 0 23
Синдром Шегрена 0 27
Синдром Рейтера 0 0
Реактивный артрит 0 0
Анкилоизирующий спондилоартрит 0 0
Псориатический артрит 0 0
Таблица 5.2. Тип антинейтрофильных цитоплазматических антител при заболеваниях человека
Заболевание Тип свече­ния ПР-3 МПО ЛФ h-lamp-2 Кат-G ББП ЛЗ р- ГН Эластаза Неиз­вес­тен
Микроскопический полиангиит К + ++
Гранулематоз К +++ +
Вегенера
Геморрагический васкулит К +
Синдром Чарга—Стросса К и П + ++ +
Болезнь Кавасаки К и П + +
Гигантоклеточный артериит П +
Классический узелковый полиартериит (УП) К и П + +
Лекарственный васкулит П +
Быстропрогрессирующий гранулематоз П и А + + +
Синдром Гудпасчера К и П + +
Ревматоидный артрит (РА) А + + +
Синдром Фелти А + +
Ревматоидный васкулит П +
СКВ А + + +
Воспалительные заболевания кишечника, ВИЧ А + + + +

Классические антинейтрофильные цитоплазматические антитела

к-АНЦА (а-ПР-3) наиболее часто обнаруживаются при гранулематозе Вегенера, реже они выявляются у больных с другими формами системных васкулитов, которые по характеру клинико-лабораторных проявлений напоминают это заболевание (микроскопический полиангиит (МПА) и синдром Чарга—Стросса) [W.Gross et al.,1993] (табл. 5.1).

Они практически не встречаются при гигантоклеточном артериите (ГКА) и артериите Такаясу [А.А.Баранов,1998; X.Bosch et al.,1991; P.Dagenais et al.,1993; T.Baranger et al.,1994], болезни Кавасаки [LRider et al.,1993], классическом УП [S.Hauschild et al.,1994], геморрагическом васкулите [N.Ronda et al.,1994], кожном лейкоцитокластическом васкулите [B.Nolle et al.,1989], криоглобулинемическом васкулите и болезни Бехчета [B.Nolle et al.,1989; M.Hamza et al.,1990].

Использование определения к-АНЦА в качестве скринингового теста позволяет увеличить выявляемость гранулематоза Вегенера, особенно на ранней стадии болезни, у больных с лимитированной и атипичной формами заболевания или перекрестными ангиитными синдромами.

Оно также помогает верифицировать диагноз у некоторых пациентов с почечной недостаточностью, находящихся на гемодиализе [S.Weidemann et al.,1993]. Описаны больные, у которых АНЦА-ассоциированный васкулит манифестировал как синдром Tolosa — Hunt [C.Monteccucco et al.,1993] или начинался с паралича лицевого нерва [J.Macias et al.,1993], краниального полиневрита [K.Chakravanty & D.Scott, 1993], периферической нейропатии [С.Chalk et al.,1993], полихондрита [K.Handrock & W.Gross, 1993], легочных геморрагии [X.Bosch et al.,1994] и идиопатического некротизирующего нефрита с «полулуниями» [J.Velosa et al.,1993].

Серия исследований посвящена оценке чувствительности и специфичности к-АНЦА для диагностики гранулематоза Вегенера. Установлено, что их специфичность при гранулематозе Вегенера очень высока и приближается к 100% [J.Cohen Tervaert et al, 1989; B.Nolle et al., 1989; G.Kerr et al., 1993; J.Rao et al, 1995]. Например, G.Kerr и соавт.(1993), обследовав 112 больных с различными системными васкулитами (артериит Такаясу, УП, синдромом Чарга—Стросса, геморрагический васкулит и др.), кожными васкулитами, гранулематозными (лимфоматоидный гранулематоз, саркоидоз, туберкулез) и аутоиммунными заболеваниями (системная красная волчанка, полимиозит) и с другими воспалительными болезнями внутренних органов, обнаружили к-АНЦА только у 5 больных.

В то же время данные, касающиеся чувствительности к-АНЦА (антител к ПР-3) для диагностики гранулематоза Вегенера, неоднозначны. Чувствительность к-АНЦА при этом заболевании зависит от активности, распространенности патологического процесса и его формы. В «начальную» фазу она варьирует от 50%), при поражении только верхних и нижних дыхательных путей без признаков васкулита, и до 100% — у больных с генерализованным васкулитом мелких артерий [J.Cohen Tervaert et al.,1989; B.Nolle et al.,1989].

По данным ретроспективного исследования, чувствительность к-АНЦА в активную фазу гранулематоза Вегенера составляет 88%) [G.Kerr et al.,1993]. При лимитированной форме заболевания она равна 92%, а при генерализованной — 85%>. В период ремиссии чувствительность к-АНЦА снижается до 43%, составляя 37%) при лимитированной и 46% при генерализованной формах.

Результаты других авторов также свидетельствуют о низкой (28%) чувствительности к-АНЦА в отношении диагностики гранулематоза Вегенера [J.Rao et al.,1995]. Это частично связано с тем, что к-АНЦА редко выявляются при обострении заболевания, а у больных с частичной ремиссией они присутствуют в низких титрах. [B.Nolle et al.,1989; E.Petterson et al., 1992].

Результаты, касающиеся клинического значения определения к-АНЦА в динамике, также противоречивы. По данным одних исследователей, повышение уровня к-АНЦА у больных в стадии ремиссии является фактором риска развития обострения [C.Stegemann et al.,1994], а динамика их титра на фоне цитотоксической терапии позволяет дифференцировать обострение самого заболевания от интеркуррентной инфекции [B.Nolle et al.,1989; J.Cohen Tervaert et al.,1989; E.Petterson et al.,1992].

С другой стороны, корреляция между изменением титров к-АНЦА и клинико-лабораторных показателей наблюдается всего в 64% случаев [G.Kerr et al.,1993]. Увеличение титров антител предшествует клиническому обострению только у 24% больных, находившихся до этого в ремиссии или имевших низкую активность заболевания.

к-АНЦА редко обнаруживаются при инфекционных заболеваниях [W.Schmitt et al.,1991; A.Adebajo et al.,1993]. Тем не менее увеличение их титров при некоторых инфекциях, например при инфекционном эндокардите, может отражать развитие вторичного васкулита [J.Wagner et al.,1991; J.Duran et al.,1994].

Интересные результаты были получены при изучении антинейтрофильных цитоплазматических антител у больных с амебиозным поражением печени, при котором 75% АНЦА-позитивных сывороток реагировали с ПР-3 [D.Pudifin et al.,1994]. При этом заболевании морфология тканевого повреждения (дегрануляция нейтрофилов, васкулит) напоминает таковое при гранулематозе Вегенера.

Полагают, что антинейтрофильные цитоплазматические антитела могут перекрестно реагировать с антигенами Entamoeba histolytica или этот микроорганизм способен вызывать высвобождение ферментов из нейтрофилов и таким образом индуцировать синтез аутоантител.

С помощью реакции непрямой иммунофлюоресценции и ИФМ с иммобилизованным на твердой фазе нефракционированным экстрактом цитоплазмы нейтрофилов мы определяли АНЦА у 36 больных гранулематозом Вегенера и 10 больных МПА [В.А.Тищенко и соавт.,1995]. В группу сравнения вошли 68 больных, 44 — с системными васкулитами (13 — с узелковым полиартериитом, 30 — с артериитом Такаясу, 1 — с гангренесцирующей гранулемой носа), 13 — с СКВ, из них 8 с АФС, и 11 — с гломерулонефритами.

Результаты, касающиеся частоты обнаружения и уровня антинейтрофильных цитоплазматических антител, представлены в таблице 5.3.

Таблица 5.3. Частота обнаружения антинейтрофильных цитоплазматических антител у больных гранулематоэом Вегенера, микроскопическим полиангиитом, другими сосудистыми заболеваниями и у доноров

Заболевание АНЦА НРИФ (%) АНЦА ИФМ (%) АНЦА (ед.оп.пл. М±а)
Гранулематоз Вегенера:
активная стадия 94 88 1,305±0,488*
ремиссия 19 15 0,393±0,238
Микроскопический полиангиит 100 89 0,827±0,465
Группа сравнения 7 17 0,389±0,27б
Доноры 0 0 0,345±0,061
Примечание. * — р<0,001.

Как видно из таблицы, у больных гранулематозом Вегенера и МПА частота и уровень антинейтрофильных цитоплазматических антител достоверно выше, чем в группе сравнения и у доноров. При этом у больных с активным гранулематозом Вегенера эти показатели были достоверно выше, чем в период ремиссии. В группе сравнения АНЦА реакции непрямой иммунофлюоресценции были обнаружены у 2 больных с УП и у 1 больной с системной красной волчанкой.

При использовании иммунофермеитного метода антинейтрофильные цитоплазматические антитела выявлялись у 3 пациентов с УП и у 4 — с СКВ. При гранулематозе Вегенера отмечена корреляция между уровнем АНЦА и ИКАВ (r=0,64; р<0,01). При клиническом анализе полученных данных установлено, что у больных гранулематозом Вегенера с высокими титрами АНЦА (1/64) чаще наблюдались такие клинические проявления, как лихорадка, суставной синдром, поражение легких, почек, глаз, кожный васкулит, язвенно-некротический ринит, чем у пациентов с их низкими титрами (1/16—1/32). Антинейтрофильные цитоплазматические антитела с наиболее высокой частотой обнаруживались при активном гранулематозе Вегенера, независимо от формы заболевания (табл. 5.4).

Таблица 5.4. Частота обнаружения АНЦА в зависимости от клинической формы гранулематоза Вегенера

Варианты АНЦА НРИФ (%) АНЦА ИФМ (%)
Генерализованная форма:
активная стадия 100 86
ремиссия 20 0
Локальная форма:
активная стадия 93 100
ремиссия 18 20
При сравнении антинейтрофильных цитоплазматических антител с другими лабораторными показателями отмечена корреляция между АНЦА и СОЭ (r=0,45; р

При обследовании 17 больных гранулематозом Вегенера в динамике — у 13 из них на фоне лечения отмечалось снижение титров антител, причем у 7 антинейтрофильные цитоплазматические антитела не определялись (рис. 5.2).

vas5.2.jpgРис. 5.2. Динамика титра АНЦА реакции непрямой иммунофлюоресценции у больных гранулематозом Вегенера (а) и микроскопический полиангиит (б)

У 6 человек обострение заболевания сопровождалось увеличением титра антител. У 4 из них повышение антинейтрофильных цитоплазматических антител опережало симптомы обострения соответственно на 20 и 25 дней, 1 и 6 месяцев.

Перинуклеарные антинейтрофильные цитоплазматические антитела

п-АНЦА и а-МПО IgG-изотипа наиболее часто обнаруживаются при МПА [M.Ulman et al.,1992; W.Gross et al.,1993]. Реже они встречаются при классическом узелковом полиартериите, синдроме Чарга—Стросса и гранулематозе Вегенера [S.Lee et al.,1990; J.Cohen Tervaert et al.,1989;1991; M.Ulmer et al.,1992; S.Hauschild et al.,1994].

Эти антитела практически не выявляются при болезни Кавасаки [L.Rider et al.,1993], артериите Такаясу [P.Dagenais et al.,1993], ГКА S.Hauschild et al.,1993], болезни Бехчета [В. Nolle et al.,1989; M.Hamza et al.,1990] и OTA [S.Schellong et al.,1992].

При геморрагическом васкулите не встречаются антитела к миелопероксидазе IgG-изотипа. Так, D.Donoghue и соавт.(1992), обследуя 100 больных с IgA-нефропатией и 30 с пурпурой Шенлейна — Геноха, не выявили а-МПО ни в одном случае. В то же время при геморрагическом васкулите N.Ronda и соавт.(1994) у 11 из 14 больных обнаружили IgA а-МПО. Изредка развитие легочного геморрагического синдрома ассоциируется с синтезом IgM п-АНЦА [V.Esnault et al.,1992].

п-АНЦА не являются специфическим маркером системных некротизирующих васкулитов. Они встречаются и при других заболеваниях, в том числе системных ревматических болезнях, воспалительных заболеваниях кишечника и некоторых инфекциях [H.Peter et al., 1993].

Антинейтрофильные цитоплазматические антитела, реагирующие с миелопероксидазой, идентифицированы у больных с идиопатическим альвеолярным геморрагическим синдромом [X.Bosch et al, 1994; R.DeRemee et al.,1994] и у 30% пациентов с синдромом Гудпасчера [D.Jayne et al., 1990; A.Volpi et al., 1991; M.Weber et al.,1992].

Эти аутоантитела выявлены при гломерулонефрите и волчаночно-подобном синдроме, индуцированном гидралазином [I.Nassberger et al.,1990; C.Cambridge et al.,1994], при системной склеродермии с почечной недостаточностью или легочными геморрагиями [H.Endo et al.,1994].

Недавно появились сообщения о связи между п-АНЦА-положительными заболеваниями почек и злокачественными новообразованиями. J.Edgar и соавт.(1993) описали 4 больных с клиническими признаками васкулита в сочетании с опухолями почек или мочеполовой системы, в сыворотках которых присутствовали п-АНЦА.

Кроме того, антинейтрофильные цитоплазматические антитела обнаружены у больных с недифференцированной аденокарциномой [J.Navarro et al., 1994], моноклональными гаммапатиями, миелодисплазией, а также лимфоматоидным гранулематозом и синдромом Свита, которые часто ассоциируются со злокачественными новообразованиями [D.Kemmett et al, 1991].

Несмотря на это, определение п-АНЦА имеет существенное значение для ранней диагностики МПА и быстропрогрессирующего гломерулонефрита, развитие которого может наблюдаться при широком спектре заболеваний: идиопатические формы пауси-иммунного некротизирующего гломерулонефрита; гломерулонефрит, сочетающийся с пауси-иммунным некротизирующим геморрагическим альвеолярным капилляритом; идиопатический иммунный альвеолярный геморрагический синдром без сопутствующего гломерулонефрита [S.Bonsid et al.,1994; J.Jennette et al.,1994].

п-АНЦА, направленные к гранулярным белкам — катепсину G, эластазе, лизосомам, выявляются при микроскопическом полиангиите, но также при заболеваниях, не осложненных васкулитом, включая РА, системная красная волчанка и воспалительные заболевания кишечника [P.Lesarve et al.,1993].

Сообщается о развитии АНЦА-позитивных васкулитов с поражением легких и почек на фоне лечения тиреотоксикоза пропилтиоурацилом [S.Stankus et al.,1992; К.Dolman et al.,1993; D.D'Cruz et al.,1995].

Полагают, что последний селективно накапливается в нейтрофилах, связывается с миелопероксидазой и вызывает изменение структуры и инактивацию этого фермента [D.Lam et al.,1979; H.Lee et al.,1988;1990]. Кроме того, описано развитие АНЦА-ассоциированного васкулита на фоне лечения омепразолом [S.Singer et al.,1994] и у больных с силиконовой нефропатией [A.Chevailler et al., 1994].

Атипичные антинейтрофильные цитоплазматические антитела

Антинейтрофильные цитоплазматические антитела, дающие гомогенное свечение цитоплазмы (атипичные АНЦА), иногда обнаруживаются при инфекционных заболеваниях: ВИЧ-инфекция [J.Koderisch et al.,1990; R.Klaasen et al.,1992], бактериальный эндокардит [J.Durand et al.,1994; A.Soto et al.,1994], поликистоз легких, связанный с хронической легочной инфекцией [J.Efthimiou et al.,1991], туберкулез [C.Gordon et al.,1993].

Антинейтрофильные цитоплазматические антитела при ревматоидном артрите

Гранулоцит-специфические антинуклеарные факторы были выявлены в сыворотках больных РА задолго до открытия антинейтрофильных цитоплазматических антител [V.Faber & P.Elling, 1966] и в дальнейшем обнаружены и другими исследователями [A.Wiil,1980]. В настоящее время доказано, что гранулоцит-специфические АНФ часто представляют собой АНЦА, а ядерное свечение является артефактом, связанным с нуклеофильными свойствами цитоплазматических антигенов [R.Falk et al, 1988; L.Burkholder & D.Bainton, 1990].

Однако, как уже отмечалось, метод иммунофлюоресценции с использованием фиксированных спиртом нейтрофилов не позволяет дифференцировать гранулоцит-специфический антинуклеарный фактор от п-АНЦА. По данным разных авторов, частота обнаружения антинейтрофильных цитоплазматических антител при ревматоидном артрите варьирует в от 0 до 75% (табл. 5.5).

Таблица 5.5. Частота обнаружения и характеристика АНЦА при ревматоидном артрите

Автор Число больных п-АНЦА к-АНЦА а-АНЦА а-МПО а-ПР-3
L.Nassberger et al.,1990 33 0 0 0
J.Savigeet al.,1991 58 7 3 0 2 0
S.Lassoueg et al.,1991 75 13 0 0 5
W.Gross et al.,1991 241 6 0 0
I.Coremans et al.,1992 80 0 0 36
A.Juby et al.,1992 94 4 0 7
M.UImer et al.,1992 25 0 0 0 0 0
I.Coremans et al.,1992 99 5 1 33 17 3
E.Abad et al., 1993 72 9 0 0
D.Metzger et al.,1993 120 0 0 45 0 0
A.Mulder et al.,1993 94 66 0 0 1 0
I.Corremans et al.,1993 50 4 0 14 6 0
G.Cambridge et al.,1994 97 12
E.Rother et al.,1994 111 0 3 19
X.Bosch et al.,1995 47 23 0 0 2 0
M.De Band et al.,1996 84 16 1 11 8
А.А.Баранов, 1998 52 9,6 0 0 - -
Антигены, с которыми реагируют антинейтрофильные цитоплазматические антитела при РА, до конца не идентифицированы. Результаты иммуноферментного анализа свидетельствуют о том, что в сыворотках больных присутствуют антитела к широкому спектру нейтрофильных антигенов, включая лактоферрин, катепсин G, лизоцим, эластазу, в-глюкоронидазу и др. [L.Halbwaxhs-Mecarelli et al.,1992; U.Martensson & L.Nassberger, 1992; Schmitt et al., 1993; De Bandt et al., 1996].

По данным ряда авторов, наиболее часто при РА выявляются антитела к лактоферрину [I.Corremans et al., 1993; A.Mulder et al., 1993]. I.Coremans и соавт.(1992) обнаружили их у 45% больных. A.Mulder и соавт.(1993), обследовав 94 больных ревматоидным артритом, выявили п-АНЦА у 30 из них.

При этом 19 сывороток содержали антитела к лактоферрину и только в одном случае антитела к миелопероксидазе и катепсину. С помощью иммуноблотинга показано, что, наряду с лактоферрином, в сыворотках некоторых больных присутствуют антитела, направленные к неидентифицированным полипептидам с молекулярной массой в 67/66 и 63/54 кд.

В то же время D.Bandt и соавт.(1996) полагают, что в иммунофермеитный метод при РА чаще выявляются антитела к эластазе (14%), реже к лактоферрину и миелопероксидазе (10%), а при использовании иммуноблотинга антинейтрофильные цитоплазматические антитела в сыворотках больных РА вообще не определяются.

Клиническое значение АНЦА при ревматоидном артрите неясно. По данным одних авторов, наличие антинейтрофильных цитоплазматических антител коррелирует с активностью заболевания, и они особенно часто выявляются при синдроме Фелти [J.Savage et al.,1991; I A.Juby et al., 1992; I.Coremans et al., 1993].

Однако другие исследователи не обнаружили подобной зависимости [X.Bosch et al.,1995; J.Helsloot et al.,1995; E. Rother et al.,1996], но положительные результаты чаще встречались у больных с более прогрессирующим течением заболевания [E.Rother et а1.,1994]. По мнению W.Gross (1995), при РА имеется связь между уровнем п-АНЦА и рентгенологической стадией поражения суставов по Штейброкеру.

A.Mustila и соавт.(1997) при РА выявили достоверную связь между увеличением титров п-АНЦА и активностью воспалительного процесса, а также развитием нефропатии. По нашим данным, при этом заболевании, несмотря на отсутствие достоверной связи между активностью воспалительного процесса и п-АНЦА, в группе п-АНЦА-позитивных больных средние значения индекса активности болезни были достоверно выше, чем у пациентов без данных аутоантител [А.А.Баранов,1998]. Кроме того, присутствие п-АНЦА в сыворотке крови достоверно положительно коррелировало с наличием у больных сетчатого ливедо и поражения почек.

I.Corremans и соавт.(1992) обнаружили достоверную корреляцию между увеличением уровня антител к лактоферрину и развитием васкулита при ревматоидном артрите. Напротив, другие авторы не отметили увеличения частоты встречаемости п-АНЦА или гранулоцит-специфического АНФ у больных с васкулитом или внесуставными проявлениями PA [J.Savige et al.,1991; A.Mulder et al.,1993; X.Bosch et al., 1995].

Установлено, что антинейтрофильные цитоплазматические антитела и антитела к лактоферрину достоверно чаще выявляются у больных РА с синдромом Фелти, чем у остальных пациентов (соответственно 77 и 36%; 50 и 4%) [l.Coremans et al.,1993].

Описано несколько больных РА с клиническими проявлениями МПА, в сыворотке которых присутствовали а-МПО [A.Toarralbo et al.,1994; X.Bosch et al., 1995]. G.Cambridge и coавт. (1994) обнаружили а-МПО у 12% больных ревматоидным артритом. Увеличение титров этих антител ассоциировалось с серопозитивностью по РФ, наличием ревматоидных узелков и поражением легких.

В недавних исследованиях H.Locht и соавт. (1995) выявили п-АНЦА у 12 (55%) из 22 больных с реактивным артритом. При этом сыворотки у 7 человек реагировали с миелопероксидазой, у 8 — с лактоферрином и у 4 — с а-антигеном (ПР-3 и катепсин). Частота и уровень антинейтрофильных цитоплазматических антител не коррелировали с активностью артрита.

Примечательно, что Т-лимфоциты больных реактивным артритом специфически распознают детерминанты стрессорного белка HSP-65, а лактоферрин перекрестно реагирует с ним. Установлено, что Т-лимфоциты, полученные от крыс с адъювантным артритом, индуцированным при иммунизации микобактериями, способны пролиферировать при их стимуляции лактооеррином [N.Esaguy et al., 1991; 1993]. Кроме того, выявлена определенная гомология в аминокислотных последовательностях миелопероксидазы и HSP-60 [D.Jones et al., 1993].

Антинейтрофильные цитоплазматические антитела при системной красной волчанке

Серия исследований посвящена изучению АНЦА при СКВ [L.Nassberger et al.,1990; S.Lee et al., 1992; S.Kuster et al.,1992]. По данным S.Lee и соавт.(1992), ядерное или перинуклеарное свечение клеток обнаружено при изучении сывороток большинства (90,8%) больных системной красной волчанкой, но слабое цитоплазматическое свечение идентифицировано только в 4% случаев.

При этом антитела к лактоферрину обнаружены у 39%> больных. Их синтез коррелировал с клинической активностью СКВ и «полулуния» при морфологическом исследовании почек. Умеренное увеличение концентрации а-МПО отмечено у 8 из 87 больных (9%), у 6 из них имелись признаки серозита.

S.Kuster и соавт.(1992) при изучении 44 больных системной красной волчанкой, включая 33 с поражением почек, не обнаружили к-АНЦА ни в одном случае, однако выявили п-АНЦА у подавляющего большинства (90,1%) пациентов. У 25% больных были обнаружены а-МПО в низком титре, чаще при васкулите кожи и гломерулонефрите.

R.Pauzner и соавт.(1994) идентифицировали антинейтрофильные цитоплазматические антитела у 35% из 114 больных СКВ, в том числе в 24,5% случаев — п-АНЦА и в 10,5% — к-АНЦА. Присутствие этих антител не коррелировало с активностью СКВ (индекс SLEDAI), наличием у больных васкулита, поражения почек или ЦНС.

По нашим данным, п-АНЦА обнаруживались почти у половины (47,7%) из 44 обследованных мужчин с системной красной волчанкой, преимущественно при остром течении заболевания. Однако их присутствие в сыворотке крови не коррелировало с клинико-лабораторными особенностями болезни, включая воспалительную активность, оцениваемую по общепринятым критериям и индексам SLAM и SLEDAI [А.А.Барандв,1998].

L.Nassberger и соавт.(1990) исследовали а-МПО и антитела к эластазе у 102 больных СКВ, включая 16 больных волчаночным нефритом и 6 больных с волчанкой, индуцированной гидралазином. У 21% больных в сыворотках присутствовали а-МПО, но какой-либо корреляции между ними и клиническими и иммунологическими особенностями заболевания отмечено не было. Антитела к эластазе выявлялись у 3 из 4 больных с поражением ЦНС. При гидралазиновой волчанке встречались оба типа аутоантител.

Другие авторы также отмечают присутствие а-МПО изотипов IgG и IgM у большинства больных СКВ или нефритом, развившихся при приеме гидралазина [L.Nassberger et al.,1991;G.Cambridge et al.,1994].

Антинейтрофильные цитоплазматические антитела при других ревматических заболеваниях

Имеются сообщения о наличии АНЦА при системной склеродермии. E.Endo и соавт.(1994) при этом заболевании обнаружили п-АНЦА в НРИФ у 6 из 100 больных. Сыворотки всех АНЦА-положительных больных реагировали с а-гранулами нейтрофилов и миелопероксидазой. У больных с п-АНЦА отмечено быстрое ухудшение функции почек с развитием почечной недостаточности, а у двух из них — легочные геморрагии.

Р.Т.Алекперов и соавт. (1998) при обследовании 73 больных с системной склеродермией выявили АНЦА у 31 (42,5%) из них. В большинстве случаев (24 человека) обнаружены п-АНЦА. У 4 встречались к-АНЦА и у 3 одновременно п-АНЦА и к-АНЦА. В группе АНЦА-позитивных больных наблюдалось достоверно более высокое содержание СРБ, чем у остальных. Титр антинейтрофильных цитоплазматических антител коррелировал с титром РФ и активностью комплемента. Не выявлено различий в продолжительности и характере течения болезни между двумя группами больных.

Нами при обследовании 15 женщин с первичным синдромом Шегрена п-АНЦА в реакции непрямой иммунофлюоресценции были выявлены только в 1 (6,7%) случае. Основные клинико-лабораторные проявления заболевания у этой больной не отличались от других пациентов. Следует отметить, что эти аутоантитела не присутствовали в сыворотках крови у больных, имеющих кожный криоглобулинемический васкулит, что согласуется и с данными других авторов [W.L.Gross et al.,1995; A.G.Tzioufas et al.,1996].

Насонов Е.Л., Баранов А.А., Шилкина Н.П.

medbe.ru

АНЦА, антинейтрофильные антитела - причины появления, норма

Антинейтрофильные цитоплазматические антитела исследуют для подтверждения диагноза гранулематоза Вагенера, микроскопического полиангиита и других аутоиммунных заболеваний.

Синонимы: АнтиНейтрофильные Цитоплазматические Антитела — АНЦА, anti-neutrophil cytoplasmic antibodies, ANCA.

Антинейтрофильные антитела – это несколько антител группы IgG против антигенов внутри гранул нейтрофилов и моноцитов. В крови ANCA появляется при некоторых аутоиммунных заболеваниях, но наиболее часто при васкулитах – воспалении стенки сосудов. Положительный результат у 5% здоровых людей.

Мишени антинейтрофильных антител

  • протеиназа 3
  • миелопероксидаза
  • эластаза
  • катепсин G
  • азурозидин
  • лактоферрин
  • лизоцим

Виды ANCA

  • cANCA (цАНЦА, классические) – центральные антитела нацелены против лизосомальной протеиназы 3 (фермента азурофильных гранул нейтрофилов)
  • pANCA (пАНЦА) – перинуклеарные, против миелопероксидазы и эластазы, катепсина G, лактоферрина, лизоцима, BPI-белка
  • xANCA или aANCA – атипичные антитела, против белка-BPI и лизоцима

Особенности анализа

Специальная подготовка не нужна.

Метод исследования — непрямая иммунофлуоресценция зафиксированного этанолом (или формалином) препарата. Картина активности pANCA изменяется в присутствии антиядерных антител, поэтому одновременно рекомендовано проводить и их исследование. При положительном результате комбинированного теста проводят анализы на антитела к каждому антигену отдельно (протеиназе, миелопероксидазе).

Показания

  • диагностика васкулитов с поражением мелких сосудов и некоторых не васкулярных синдромов, например, воспалительных заболеваний кишечника

Норма

  • отрицательно
  • до 0,4 Ед
  • титр ниже 1:20

Цифровые нормы колеблются в различных лабораториях.

Причины появления АНЦА

Антинейтофильные антитела появляются при васкулитах мелких сосудов и некоторых других заболеваниях:

  • cANCA – гранулематоз Вегенера (90 — 98%), синдром Чарга-Стросса (20 — 30%), муковисцидоз (50%), бактериальный эндокардит, лекарственный васкулит, паразитарные инфекции
  • pANCA – синдром Чарга-Стросса (60%), микроскопический полиангиит (50%), системная красная волчанка, васкулит при ревматоидном артрите, быстропрогрессирующий гломерулонефрит (30 — 60%), узелковый полиартериит
  • xANCA – воспалительные заболевания кишечника – болезнь Крона (20-30%) и неспецифический язвенный колит (50 – 75 %), первичный склерозирующий холангит, лекарственный системный васкулит, ревматоидный артрит

Отрицательный результат анализа на антинейтрофильные антитела  НЕ является доказательством отсутствия аутоиммунной патологии. Расшифровка результата проводится только в комплексе с другими анализами и данными объективного обследования.

Частота выявления антинейтрофильных антител при различных заболеваниях

cANCA

pANCA

xANCA

Гранулематоз Вегенера

+

Микроскопический полиангиит

+

+

Синдром Чарга-Стросса

+

+

Узелковый полиартериит

+

Быстропрогрессирующий гломерулонефрит

+

Системная красная волчанка

+

+

Ревматоидный артрит

+

+

Неспецифический язвенный колит

+

Болезнь Крона

+

Первичный склерозирующий холангит

+

Аутоиммунный гепатит

+

Первичный билианый цирроз

+

АНЦА — антинейтрофильные цитоплазматические антитела (ANCA) was last modified: Декабрь 6th, 2017 by Мария Бодян

gradusnik.net

Антинейтрофильные антитела (ANCA) к MPO, PR3; Аnca анализ крови, антитела к GBM, IgG; качественное определение в лаборатории

Антинейтрофильные цитоплазматические антитела (АНЦА) - гетерогенная популяция аутоантител, специфичных к цитоплазматическим антигенам гранулоцитов. АНЦА - надежные серологические маркеры системных некротизирующих васкулитов сосудов мелкого калибра, также именуемых ANCA-ассоциированными васкулитами (AAV).

В оответствии с Номенклатурой васкулитов пересмотра 2012 года (Arthritis & Rheumatism, 2013) к ANCA-ассоциированным васкулитам относятся: гранулематозный полиангиит (гранулематоз Вегенера), эозинофильный гранулематозный полиангиит (синдром Черджа-Стросс), микроскопический полиангиит, васкулит гиперчувствительности, пурпура Шенлейна-Геноха, болезнь Бехчета, криоглобулинемический васкулит, васкулит при ревматических заболеваниях (СКВ, РA, ССД, болезнь Шегрена), кожный лейкоцитокластический васкулит.

Различают два основных типа антинейтрофильных антител - цитоплазматические, взаимодействующие с протеиназой 3 (PR3, ПР3), и перинуклеарные, направленные против миелопероксидазы (МРО, МПО). Уровни анти-PR3 и анти-МРО коррелируют с клиническим статусом, они высоки в активную стадию заболеваний и снижаются во время ремиссии. Антитела к базальной мембране клубочков (AТ к GBM) используются в диагностике синдрома Гудпасчера, который характеризуется гломерулонефритом, легочными кровотечениями и образованием антител к базальной мембране клубочков.

Диагностическое значение аутоантител:

Быстропрогрессирующий гломерулонефрит (синдром Гудпасчера)
Антитела к MPO, PR3 Антинейтрофильные цитоплазматические АТ (АНЦА, ANCA) – серологический маркер системных некротизирующих васкулитов сосудов среднего и мелкого калибра. Различают 2 основных типа ANCA – АТ, взаимодействующие с протеиназой 3 (ПР3, PR3), и АТ, специфичные в отношении миелопероксидазы (МПО, MPO).
Антитела к GBM АТ к базальной мембране клубочка (GBM). Маркер быстропрогрессирующего гломерулонефрита. Одновременное обнаружение с ANCA указывает на плохой прогноз функции почек.

Референсные значения:

Антитела к MPO не обнаружено
Антитела к PR3 не обнаружено
Антитела к GBM не обнаружено

Интерпретация

Обращаем Ваше внимание на то, что интерпретация результатов исследований, установление диагноза, а также назначение лечения, в соответствии с Федеральным законом ФЗ № 323 «Об основах защиты здоровья граждан в Российской Федерации», должны производиться врачом соответствующей специализации..

Повышение значений

Антитела к PR3:

  • Гранулематоз с полиангиитом (гранулематоз Вегенера)
  • Эозинофильный гранулематоз с полиангиитом (ЭГПА, синдром Чарга-Стросса)

Антитела к MPO:

  • Быстро прогрессирующий нефрит Синдром Черга-Стросса
  • Микроскопический полиангиит (МПА)

Антитела к GBM:

  • Синдром Гудпасчера
  • Одновременное обнаружение с ANCA указывает на плохой прогноз функции почек

www.cmd-online.ru


Смотрите также